| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 0 前言 | 第15-16页 |
| 1 文献综述 | 第16-24页 |
| 1.1 HH信号通路的组成 | 第16页 |
| 1.2 HH信号通路的功能 | 第16-19页 |
| 1.2.1 HH的结构和功能 | 第16-18页 |
| 1.2.2 PTCH的结构和功能 | 第18页 |
| 1.2.3 SMO的结构和功能 | 第18-19页 |
| 1.2.4 GLI的结构和功能 | 第19页 |
| 1.3 HH信号通路的转导 | 第19-21页 |
| 1.4 半滑舌鳎性别决定基因研究现状 | 第21-23页 |
| 1.5 本研究的目的与意义 | 第23-24页 |
| 2 半滑舌鳎HH信号通路csshh、csdhh、csptch1 x1、csptch1 x2、cssmo基因的克隆 | 第24-54页 |
| 2.1 材料与方法 | 第25-34页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第25页 |
| 2.1.2 主要仪器和试剂 | 第25页 |
| 2.1.3 方法 | 第25-34页 |
| 2.2 结果 | 第34-51页 |
| 2.2.1 遗传性别鉴定 | 第34页 |
| 2.2.2 生理性别鉴定 | 第34-35页 |
| 2.2.3 cDNA序列分析 | 第35-47页 |
| 2.2.4 同源比对及系统进化树构建 | 第47-51页 |
| 2.3 讨论 | 第51-54页 |
| 2.3.1 cDNA序列结构分析 | 第51-52页 |
| 2.3.2 系统进化树分析 | 第52-54页 |
| 3 半滑舌鳎csshh、csdhh、csptch1 x1、csptch1 x2、cssmo、csgli1在早期胚胎的表达分析 | 第54-64页 |
| 3.1 材料与方法 | 第54-55页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第54页 |
| 3.1.2 试验方法 | 第54-55页 |
| 3.2 结果 | 第55-61页 |
| 3.2.1 扩增标准曲线 | 第55-57页 |
| 3.2.2 csdhh在早期胚胎中的转录水平 | 第57页 |
| 3.2.3 csshh在早期胚胎中的转录水平 | 第57-58页 |
| 3.2.4 csptch1 x1在早期胚胎中的转录水平 | 第58-59页 |
| 3.2.5 csptch1 x2在早期胚胎中的转录水平 | 第59-60页 |
| 3.2.6 cssmo在早期胚胎中的转录水平 | 第60-61页 |
| 3.2.7 csgli1在早期胚胎中的转录水平 | 第61页 |
| 3.3 讨论 | 第61-64页 |
| 4 半滑舌鳎csshh、csdhh、csptch1 x1、csptch1 x2、cssmo、csgli1在雌雄成鱼不同组织的表达分析 | 第64-72页 |
| 4.1 材料与方法 | 第64页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第64页 |
| 4.1.2 试验方法 | 第64页 |
| 4.2 结果 | 第64-69页 |
| 4.2.1 csdhh基因在成鱼不同组织中的转录水平 | 第64-65页 |
| 4.2.2 csshh基因在成鱼不同组织中的转录水平 | 第65-66页 |
| 4.2.3 csptch1 x1基因在成鱼不同组织中的转录水平 | 第66页 |
| 4.2.4 csptch1 x2基因在成鱼不同组织中的转录水平 | 第66-67页 |
| 4.2.5 cssmo基因在成鱼不同组织中的转录水平 | 第67-68页 |
| 4.2.6 csgli1基因在成鱼不同组织中的转录水平 | 第68-69页 |
| 4.3 讨论 | 第69-72页 |
| 5 半滑舌鳎csshh、csdhh、csptch1x1、csptch1 x2、cssmo、csgli1在不同性腺发育时期的表达分析 | 第72-85页 |
| 5.1 材料与方法 | 第72-73页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第72页 |
| 5.1.2 实验方法 | 第72-73页 |
| 5.2 结果 | 第73-83页 |
| 5.2.1 在仔鱼性腺中的转录水平 | 第73-78页 |
| 5.2.2 在成鱼性腺中的转录水平 | 第78-83页 |
| 5.3 讨论 | 第83-85页 |
| 6 csshh、csdhh及csptch1 x1基因启动区甲基化分析 | 第85-92页 |
| 6.1 材料与方法 | 第86-87页 |
| 6.1.1 性腺DNA提取 | 第86页 |
| 6.1.2 启动区克隆 | 第86页 |
| 6.1.3 甲基化检测 | 第86-87页 |
| 6.2 结果 | 第87-90页 |
| 6.3 讨论 | 第90-92页 |
| 7 半滑舌鳎csdhh、csptch1 x1及csptch1 x2在性腺中的组织原位杂交分析 | 第92-99页 |
| 7.1 材料与方法 | 第92-93页 |
| 7.1.1 实验材料 | 第92-93页 |
| 7.1.2 实验方法 | 第93页 |
| 7.2 结果 | 第93-97页 |
| 7.2.1 半滑舌鳎csdhh mRNA的组织原位杂交结果 | 第93-94页 |
| 7.2.2 半滑舌鳎csptch1 x1 mRNA的组织原位杂交结果 | 第94-95页 |
| 7.2.3 半滑舌鳎csptch1 x2 mRNA的组织原位杂交结果 | 第95-97页 |
| 7.3 讨论 | 第97-99页 |
| 8 半滑舌鳎csptch1 x1及csptch1 x2在雌性染色体中的定位 | 第99-106页 |
| 8.1 材料与方法 | 第99-102页 |
| 8.1.1 实验材料 | 第99-100页 |
| 8.1.2 实验方法 | 第100-102页 |
| 8.1.2.1 染色体制备 | 第100-101页 |
| 8.1.2.2 csptch1 x1及csptch1 x2基因在BAC文库中定位 | 第101页 |
| 8.1.2.3 荧光原位杂交 | 第101-102页 |
| 8.2 结果 | 第102-104页 |
| 8.2.1 半滑舌鳎雌雄染色体片的制备 | 第102页 |
| 8.2.2 csptch1 x1及csptch1 x2基因在BAC文库中定位 | 第102-103页 |
| 8.2.3 csptch1 x1及csptch1 x2基因的杂交探针制备 | 第103-104页 |
| 8.2.4 csptch1 x1及csptch1 x2基因在雌性染色体中的定位 | 第104页 |
| 8.3 讨论 | 第104-106页 |
| 9 半滑舌鳎csshh、csdhh基因真核表达载体构建及csshh、csptch1x1、csptch1x2原核表达载体构建 | 第106-115页 |
| 9.1 材料与方法 | 第106-110页 |
| 9.1.1 实验材料 | 第106页 |
| 9.1.2 实验方法 | 第106-110页 |
| 9.2 结果 | 第110-114页 |
| 9.2.1 csshh及csdhh基因信号肽预测结果 | 第110-111页 |
| 9.2.2 csshh及csdhh基因真核过表达载体酶切结果 | 第111-112页 |
| 9.2.3 csptch1 x1、csptch1 x2原核表达载体构建 | 第112页 |
| 9.2.4 csshh原核表达载体构建及蛋白诱导 | 第112-114页 |
| 9.3 讨论 | 第114-115页 |
| 10 结论与展望 | 第115-117页 |
| 10.1 结论 | 第115-116页 |
| 10.2 展望 | 第116-117页 |
| 参考文献 | 第117-125页 |
| 致谢 | 第125-126页 |
| 个人简历 | 第126-127页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第127页 |
