| 摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-13页 |
| 第1章 文献综述 | 第14-28页 |
| 1.1 甘薯生产概况 | 第14页 |
| 1.2 甘薯研究现状 | 第14-15页 |
| 1.3 高等植物蔗糖转运蛋白的研究进展 | 第15-26页 |
| 1.3.1 植物光合产物运输 | 第15-16页 |
| 1.3.2 植物蔗糖转运蛋白概述 | 第16-22页 |
| 1.3.3 植物蔗糖转运蛋白的功能 | 第22-25页 |
| 1.3.4 基因的表达与调控 | 第25-26页 |
| 1.3.5 蔗糖转运蛋白的基因工程研究 | 第26页 |
| 1.4 本项研究的目的与意义 | 第26-27页 |
| 1.5 本项研究的技术路线 | 第27-28页 |
| 第2章 材料和方法 | 第28-49页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第28-30页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第28页 |
| 2.1.2 质粒及菌种 | 第28页 |
| 2.1.3 生化试剂 | 第28-29页 |
| 2.1.4 仪器 | 第29-30页 |
| 2.2 方法与步骤 | 第30-42页 |
| 2.2.1 不同品种甘薯农艺性状测定 | 第30页 |
| 2.2.2 3’RACE、5’RACE原理及制备 | 第30-31页 |
| 2.2.3 IbSUT保守序列的扩增 | 第31-33页 |
| 2.2.4 3’RACE扩增IbSUT的3’端 | 第33-34页 |
| 2.2.5 5’RACE扩增IbSUT的5’端 | 第34-36页 |
| 2.2.6 IbSUT全长cDNA的克隆 | 第36-37页 |
| 2.2.7 IbSUTs基因组序列分段扩增 | 第37-38页 |
| 2.2.8 IbSUT1、IbSUT2的亚细胞定位 | 第38-40页 |
| 2.2.9 染色体步移技术克隆IbSUT1启动子 | 第40-42页 |
| 2.3 IbSUTs基因的荧光定量PCR分析 | 第42-44页 |
| 2.3.1 不同品种和组织的取样 | 第42页 |
| 2.3.2 烯效唑处理 | 第42页 |
| 2.3.3 氮素处理 | 第42-43页 |
| 2.3.4 荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第43-44页 |
| 2.4 pSTART-IbSUT1过量表达载体的构建 | 第44-49页 |
| 2.4.1 cDNA开放阅读框两端加入酶切位点 | 第44页 |
| 2.4.2 IbSUT1、pSTART酶切、连接 | 第44-45页 |
| 2.4.3 pSTART-IbSUT1阳性克隆筛选 | 第45页 |
| 2.4.4 pSTART-IbSUT1质粒的提取 | 第45-46页 |
| 2.4.5 农杆菌EHA105感受态的制备、转化 | 第46-47页 |
| 2.4.6 拟南芥的侵染 | 第47页 |
| 2.4.7 转基因拟南芥的筛选 | 第47-49页 |
| 第3章 结果与分析 | 第49-76页 |
| 3.1 不同甘薯品种的生长差异分析 | 第49-50页 |
| 3.2 IbSUTs基因cDNA全长克隆 | 第50-62页 |
| 3.2.1 甘薯新鲜叶片RNA的制备 | 第50页 |
| 3.2.2 IbSUT3和IbSUT4 cDNA序列扩增 | 第50-52页 |
| 3.2.3 IbSUTs基因的生物信息学分析 | 第52-62页 |
| 3.3 IbSUTs基因组序列扩增 | 第62-65页 |
| 3.3.1 IbSUT3、IbSUT4基因组序列 | 第62-63页 |
| 3.3.2 IbSUT3和IbSUT4的基因结构 | 第63-64页 |
| 3.3.3 IbSUT1启动子克隆 | 第64-65页 |
| 3.4 荧光定量PCR | 第65-72页 |
| 3.4.1 IbSUTs基因在不同品种中的表达模式分析 | 第65-67页 |
| 3.4.2 广薯87和济薯25 IbSUTs达模式分析 | 第67-68页 |
| 3.4.3 氮素处理济薯25表达模式研究 | 第68-70页 |
| 3.4.4 烯效唑处理济薯25表达模式研究 | 第70-72页 |
| 3.5 IbSUT1过量表达转基因拟南芥的筛选 | 第72-74页 |
| 3.5.1 pSTART-IbSUT1过量表达载体的构建 | 第72-73页 |
| 3.5.2 转基因的拟南芥的筛选 | 第73-74页 |
| 3.6 小结 | 第74-76页 |
| 第4章 讨论 | 第76-80页 |
| 4.1 材料的选取与提取 | 第76页 |
| 4.1.1 材料的选取 | 第76页 |
| 4.1.2 RNA中基因组残留 | 第76页 |
| 4.2 甘薯光合产物转运途径 | 第76-77页 |
| 4.3 甘薯蔗糖转运蛋白家族成员 | 第77页 |
| 4.4 SUT蛋白的分类 | 第77页 |
| 4.5 IbSUTs功能 | 第77-78页 |
| 4.5.1 IbSUT1功能 | 第78页 |
| 4.5.2 IbSUT4的功能 | 第78页 |
| 4.6 IbSUTs在不同品种中表达量分析 | 第78-79页 |
| 4.7 研究计划 | 第79页 |
| 4.8 展望 | 第79-80页 |
| 附录 | 第80-85页 |
| 附录一 引物信息 | 第80-82页 |
| 附录二 有关试剂溶液的配置 | 第82-84页 |
| 附录三 相关图片 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-91页 |
| 致谢 | 第91-92页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第92-93页 |
| 附件 | 第93页 |
