| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-20页 |
| 1.1 植物非生物胁迫的研究进展 | 第12-14页 |
| 1.1.1 不同植物对逆境的响应机制 | 第12-13页 |
| 1.1.2 非生物胁迫相关基因的研究进展 | 第13-14页 |
| 1.2 植物泛素蛋白酶体途径 | 第14-16页 |
| 1.2.1 泛素 | 第15页 |
| 1.2.2 26S蛋白酶 | 第15页 |
| 1.2.3 泛素酶 | 第15-16页 |
| 1.2.4 泛素化 | 第16页 |
| 1.3 泛素蛋白酶体途径在非生物胁迫中的研究 | 第16-17页 |
| 1.4 研究目的和意义 | 第17-18页 |
| 1.5 试验技术路线 | 第18-20页 |
| 第二章 龙葵E2泛素结合酶SorUBC基因的克隆 | 第20-32页 |
| 2.1 试验材料 | 第20页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第20页 |
| 2.1.2 试验药剂 | 第20页 |
| 2.2 试验方法 | 第20-24页 |
| 2.2.1 植物RNA的提取 | 第20页 |
| 2.2.2 cDNA第一条链的合成 | 第20-21页 |
| 2.2.3 引物的设计及PCR反应体系 | 第21-22页 |
| 2.2.4 PCR扩增产物的回收 | 第22页 |
| 2.2.5 PCR产物的连接转化 | 第22-23页 |
| 2.2.6 质粒DNA的提取 | 第23页 |
| 2.2.7 双酶切验证 | 第23-24页 |
| 2.2.8 测序 | 第24页 |
| 2.2.9 SorUBC基因生物信息学分析 | 第24页 |
| 2.3 结果与分析 | 第24-30页 |
| 2.3.1 龙葵总RNA提取 | 第24页 |
| 2.3.2 龙葵SorUBC基因的PCR扩增及双酶切的验证 | 第24-25页 |
| 2.3.3 龙葵SorUBC基因序列比对 | 第25-28页 |
| 2.3.4 龙葵SorUBC基因编码蛋白性质分析 | 第28-30页 |
| 2.4 讨论 | 第30-31页 |
| 2.5 小结 | 第31-32页 |
| 第三章 龙葵泛素结合酶SorUBC基因和泛素连接酶SorRma1基因的组织表达分析 | 第32-36页 |
| 3.1 试验材料 | 第32页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第32页 |
| 3.1.2 试验试剂 | 第32页 |
| 3.2 试验方法 | 第32-33页 |
| 3.3 结果与分析 | 第33-34页 |
| 3.4 讨论 | 第34-35页 |
| 3.5 小结 | 第35-36页 |
| 第四章 非生物胁迫下龙葵SorUBC基因、SorRma1基因的表达分析 | 第36-44页 |
| 4.1 试验材料 | 第36页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第36页 |
| 4.1.2 试验试剂 | 第36页 |
| 4.2 试验方法 | 第36-37页 |
| 4.2.1 龙葵的处理 | 第36页 |
| 4.2.2 实时荧光定量分析 | 第36-37页 |
| 4.3 结果与分析 | 第37-42页 |
| 4.4 讨论 | 第42-43页 |
| 4.5 小结 | 第43-44页 |
| 第五章 不同非生物胁迫下龙葵植株的生理响应 | 第44-48页 |
| 5.1 试验材料 | 第44页 |
| 5.1.1 试验材料 | 第44页 |
| 5.1.2 试验试剂 | 第44页 |
| 5.2 试验方法 | 第44页 |
| 5.2.1 龙葵的处理 | 第44页 |
| 5.2.2 丙二醛(MDA)含量测定 | 第44页 |
| 5.2.3 超氧化物歧化酶(SOD)含量测定 | 第44页 |
| 5.2.4 过氧化物酶(POD)活性测定 | 第44页 |
| 5.3 结果与分析 | 第44-46页 |
| 5.4 讨论 | 第46-47页 |
| 5.5 小结 | 第47-48页 |
| 第六章 泛素SorUBC、SorRma1基因的过表达载体构建 | 第48-58页 |
| 6.1 试验材料 | 第48页 |
| 6.1.1 试验材料 | 第48页 |
| 6.1.2 质粒及菌株 | 第48页 |
| 6.1.3 试验试剂 | 第48页 |
| 6.2 试验方法 | 第48-53页 |
| 6.2.1 SorUBC、SorRmaI基因引物设计 | 第48-49页 |
| 6.2.2 泛素SorUBC、SorRmaI基因的克隆 | 第49-51页 |
| 6.2.3 对SorUBC、SorRmaI基因及表达载体PBI121分别进行酶切反应 | 第51页 |
| 6.2.4 目的基因与植物表达载体PBI121的连接反应 | 第51页 |
| 6.2.5 重组质粒导入农杆菌 | 第51-52页 |
| 6.2.6 农杆菌中重组质粒的鉴定 | 第52页 |
| 6.2.7 获得转基因拟南芥植株T_0 | 第52-53页 |
| 6.3 结果与分析 | 第53-56页 |
| 6.3.1 龙葵SorUBC、SorRmaI基因过表达载体的构建 | 第53-56页 |
| 6.3.2 重组质粒导入农杆菌 | 第56页 |
| 6.3.3 收获拟南芥T_0 | 第56页 |
| 6.4 讨论 | 第56-57页 |
| 6.5 结论 | 第57-58页 |
| 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-70页 |
| 攻读硕士期间所发表的学术论文 | 第70-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
