| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 绪论 | 第11-15页 |
| 1 H-Y 抗原的研究现状 | 第11-13页 |
| 1.1 H-Y 抗原的血清学研究 | 第11-12页 |
| 1.2 H-Y 单克隆抗体的研究 | 第12页 |
| 1.3 H-Y 抗原相应基因的研究 | 第12-13页 |
| 2 IGY 技术 | 第13-14页 |
| 2.1 IgY 的分子结构及基本性质 | 第13页 |
| 2.2 免疫鸡产生IgY 的技术 | 第13页 |
| 2.3 IgY 的提取和纯化技术 | 第13-14页 |
| 3 本课题的研究思路 | 第14-15页 |
| 第2章 H-Y 抗原的制备和纯化 | 第15-31页 |
| 1 引言 | 第15-16页 |
| 2 实验材料及仪器 | 第16-18页 |
| 2.1 主要仪器 | 第16页 |
| 2.2 实验材料及试剂 | 第16-17页 |
| 2.3 主要溶液成分及配制 | 第17-18页 |
| 3 实验方法 | 第18-22页 |
| 3.1 小鼠H-Y 抗原的表达 | 第18页 |
| 3.2 小鼠H-Y 抗原的提取 | 第18-19页 |
| 3.3 不同浓度尿素溶液中SMCY 重组蛋白溶液的沉淀现象 | 第19页 |
| 3.4 Ni-NTA 柱纯化SMCY 重组蛋白 | 第19-21页 |
| 3.5 SDS-PAGE 分析蛋白样品 | 第21-22页 |
| 4 实验结果 | 第22-29页 |
| 4.1 不同浓度尿素溶液中SMCY 重组蛋白的沉淀现象 | 第22页 |
| 4.2 SMCY 重组蛋白的洗脱条件 | 第22-25页 |
| 4.3 杂蛋白的洗脱条件 | 第25-28页 |
| 4.4 Ni-NTA 柱纯化小鼠H-Y 抗原效率 | 第28-29页 |
| 5 讨论 | 第29-31页 |
| 第3章 抗小鼠H-Y 抗原抗体IGY 的纯化 | 第31-46页 |
| 1 引言 | 第31页 |
| 2 实验材料与仪器 | 第31-32页 |
| 2.1 主要仪器 | 第31页 |
| 2.2 主要试剂 | 第31-32页 |
| 2.3 主要溶液成分及配制 | 第32页 |
| 3 实验方法 | 第32-37页 |
| 3.1 鸡的免疫以及鸡蛋的收集 | 第32-33页 |
| 3.2 IgY 的提取 | 第33页 |
| 3.3 SMCY 重组蛋白-Sepharose 48 亲和层析柱的制备 | 第33-34页 |
| 3.4 不同缓冲液洗脱杂蛋白和目的蛋白 | 第34-35页 |
| 3.5 纯化前后IgY 抗体的SDS-PAGE 分析 | 第35页 |
| 3.6 纯化前后IgY 抗体的Western Bloting 分析 | 第35-36页 |
| 3.7 小鼠肝脏细胞的分离 | 第36页 |
| 3.8 纯化前、后IgY 抗体的免疫组化检测 | 第36-37页 |
| 4 实验结果 | 第37-44页 |
| 4.1 SMCY 重组蛋白-Sepharose 48 亲和层析柱制备过程中SMCY 重组蛋白的结合效率 | 第37-39页 |
| 4.2 SMCY 重组蛋白-Sepharose 48 亲和层析柱纯化抗小鼠H-Y 抗原抗体 IgY的条件 | 第39-42页 |
| 4.3 纯化前后IgY 抗体的Western-Blotting 分析 | 第42-43页 |
| 4.4 免疫组化检测纯化前后抗小鼠H-Y 抗原抗体IgY 的作用 | 第43-44页 |
| 5 讨论 | 第44-46页 |
| 第4章 亲和层析的研究现状 | 第46-60页 |
| 1 亲和层析定义及分类 | 第47页 |
| 2 亲和层析的原理 | 第47-48页 |
| 3 亲和层析的基质选择 | 第48-51页 |
| 4 亲和层析基质的活化 | 第51-56页 |
| 4.1 多糖基质的活化 | 第51-54页 |
| 4.2 聚丙烯酰胺基质的活化 | 第54-55页 |
| 4.3 多孔玻璃与硅胶的活化方法 | 第55-56页 |
| 5. 亲和层析配基的分类与选择 | 第56-58页 |
| 5.1 亲和层析配基的分类 | 第56-57页 |
| 5.2 亲和层析配基的选择 | 第57-58页 |
| 6. 蛋白样品的亲和层析纯化 | 第58-59页 |
| 6.1 上样 | 第58-59页 |
| 6.2 洗脱 | 第59页 |
| 7 展望 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 攻读硕士期间完成或发表的学术论文 | 第65页 |
