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H5HA和SBE-RNAi重组基因在马铃薯体内表达的研究

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
第一章 绪论第8-22页
    1.1 马铃薯概述第8页
    1.2 马铃薯生物反应器的研究第8-9页
    1.3 禽流感病毒血凝素基因(HA)及其疫苗的研究进展第9-12页
        1.3.1 禽流感病毒第10-11页
        1.3.2 HA基因工程疫苗的研究进展第11-12页
    1.4 马铃薯淀粉的研究第12-18页
        1.4.1 马铃薯淀粉的组成及应用第12-13页
        1.4.2 淀粉的生物合成第13-14页
        1.4.3 淀粉合成过程中的关键酶第14-17页
        1.4.4 马铃薯淀粉的遗传改良第17-18页
    1.5 RNA干扰技术及应用第18-21页
        1.5.1 RNA干扰的定义第18页
        1.5.2 RNA干扰的特点第18-19页
        1.5.3 RNA干扰的作用机制第19-20页
        1.5.4 RNAi在植物中的应用第20-21页
    1.6 本实验研究的目的及意义:第21-22页
第二章 不同启动子对禽流感病毒HAH5基因在马铃薯体中表达的影响第22-31页
    2.1 材料第22-23页
        2.1.1 植物材料第22页
        2.1.2 菌株与质粒第22-23页
        2.1.3 主要试剂第23页
    2.2 方法第23-26页
        2.2.1 植物表达载体构建第23-24页
        2.2.2 农杆菌转化第24页
        2.2.3 外植体的准备第24页
        2.2.4 农杆菌菌液制备第24页
        2.2.5 马铃薯遗传转化及植株再生第24-25页
        2.2.6 转基因马铃薯检测第25-26页
    2.3 结果与分析第26-29页
        2.3.1 植物表达质粒构建及马铃薯转化第26-27页
        2.3.2 转基因马铃薯的PCR检测第27页
        2.3.3 重组蛋白的表达分析第27-29页
    2.4. 讨论第29-31页
第三章 利用RNA干扰技术创制高直链淀粉马铃薯材料的研究第31-47页
    3.1 材料第32页
        3.1.1 植物材料第32页
        3.1.2 菌株与质粒第32页
        3.1.3 主要试剂第32页
    3.2 方法第32-37页
        3.2.1 基因片段的获取与扩增第32-34页
        3.2.2 中间载体构建第34-35页
        3.2.3 RNA干扰植物表达载体构建第35-36页
        3.2.4 农杆菌转化第36页
        3.2.5 外植体的准备第36页
        3.2.6 农杆菌菌液制备第36页
        3.2.7 马铃薯遗传转化及植株再生第36页
        3.2.8 马铃薯淀粉的分离与纯化第36页
        3.2.9 转基因马铃薯淀粉的理化性质的分析第36-37页
    3.3 结果与分析第37-46页
        3.3.1 植物表达质粒构建第37-40页
        3.3.2 转基因马铃薯薯块淀粉分析第40-46页
    3.4 讨论第46-47页
全文结论第47-48页
附录第48-54页
    附录1 农杆菌EHA105感受态细胞的制备及转化第48-49页
    附录2 CTAB法提取植物总DNA第49页
    附录3 植物总RNA的提取第49-50页
    附录4 植物总蛋白的提取(SDS法)第50页
    附录5 大肠杆菌基因组DNA的微量提取第50-51页
    附录6 上海生工DNA凝胶回收试剂盒操作流程第51页
    附录7 双波长分光光度法测定直链淀粉和支链淀粉第51-52页
    附录8 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备及转化第52-54页
参考文献第54-64页
攻读硕士学位期间发表的文章第64-65页
致谢第65页

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