摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
第一章 绪论 | 第8-22页 |
1.1 马铃薯概述 | 第8页 |
1.2 马铃薯生物反应器的研究 | 第8-9页 |
1.3 禽流感病毒血凝素基因(HA)及其疫苗的研究进展 | 第9-12页 |
1.3.1 禽流感病毒 | 第10-11页 |
1.3.2 HA基因工程疫苗的研究进展 | 第11-12页 |
1.4 马铃薯淀粉的研究 | 第12-18页 |
1.4.1 马铃薯淀粉的组成及应用 | 第12-13页 |
1.4.2 淀粉的生物合成 | 第13-14页 |
1.4.3 淀粉合成过程中的关键酶 | 第14-17页 |
1.4.4 马铃薯淀粉的遗传改良 | 第17-18页 |
1.5 RNA干扰技术及应用 | 第18-21页 |
1.5.1 RNA干扰的定义 | 第18页 |
1.5.2 RNA干扰的特点 | 第18-19页 |
1.5.3 RNA干扰的作用机制 | 第19-20页 |
1.5.4 RNAi在植物中的应用 | 第20-21页 |
1.6 本实验研究的目的及意义: | 第21-22页 |
第二章 不同启动子对禽流感病毒HAH5基因在马铃薯体中表达的影响 | 第22-31页 |
2.1 材料 | 第22-23页 |
2.1.1 植物材料 | 第22页 |
2.1.2 菌株与质粒 | 第22-23页 |
2.1.3 主要试剂 | 第23页 |
2.2 方法 | 第23-26页 |
2.2.1 植物表达载体构建 | 第23-24页 |
2.2.2 农杆菌转化 | 第24页 |
2.2.3 外植体的准备 | 第24页 |
2.2.4 农杆菌菌液制备 | 第24页 |
2.2.5 马铃薯遗传转化及植株再生 | 第24-25页 |
2.2.6 转基因马铃薯检测 | 第25-26页 |
2.3 结果与分析 | 第26-29页 |
2.3.1 植物表达质粒构建及马铃薯转化 | 第26-27页 |
2.3.2 转基因马铃薯的PCR检测 | 第27页 |
2.3.3 重组蛋白的表达分析 | 第27-29页 |
2.4. 讨论 | 第29-31页 |
第三章 利用RNA干扰技术创制高直链淀粉马铃薯材料的研究 | 第31-47页 |
3.1 材料 | 第32页 |
3.1.1 植物材料 | 第32页 |
3.1.2 菌株与质粒 | 第32页 |
3.1.3 主要试剂 | 第32页 |
3.2 方法 | 第32-37页 |
3.2.1 基因片段的获取与扩增 | 第32-34页 |
3.2.2 中间载体构建 | 第34-35页 |
3.2.3 RNA干扰植物表达载体构建 | 第35-36页 |
3.2.4 农杆菌转化 | 第36页 |
3.2.5 外植体的准备 | 第36页 |
3.2.6 农杆菌菌液制备 | 第36页 |
3.2.7 马铃薯遗传转化及植株再生 | 第36页 |
3.2.8 马铃薯淀粉的分离与纯化 | 第36页 |
3.2.9 转基因马铃薯淀粉的理化性质的分析 | 第36-37页 |
3.3 结果与分析 | 第37-46页 |
3.3.1 植物表达质粒构建 | 第37-40页 |
3.3.2 转基因马铃薯薯块淀粉分析 | 第40-46页 |
3.4 讨论 | 第46-47页 |
全文结论 | 第47-48页 |
附录 | 第48-54页 |
附录1 农杆菌EHA105感受态细胞的制备及转化 | 第48-49页 |
附录2 CTAB法提取植物总DNA | 第49页 |
附录3 植物总RNA的提取 | 第49-50页 |
附录4 植物总蛋白的提取(SDS法) | 第50页 |
附录5 大肠杆菌基因组DNA的微量提取 | 第50-51页 |
附录6 上海生工DNA凝胶回收试剂盒操作流程 | 第51页 |
附录7 双波长分光光度法测定直链淀粉和支链淀粉 | 第51-52页 |
附录8 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备及转化 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-64页 |
攻读硕士学位期间发表的文章 | 第64-65页 |
致谢 | 第65页 |