用精子载体法制备转基因动物模型的研究
第一部分 文献综述 转基因动物的研究进展 | 第8-23页 |
1 转基因动物的发展简史 | 第8页 |
2 转基因动物的应用 | 第8-13页 |
2.1 改良畜禽生产性能、培育畜禽及鱼类新品系 | 第8-9页 |
2.2 进行畜禽的抗病育种 | 第9页 |
2.3 生产昂贵的药物 | 第9-10页 |
2.3.1 不同的动物乳腺中已表达的多肽类药物 | 第9-10页 |
2.3.2 转基因动物的选择条件 | 第10页 |
2.4 建立人类疾病的转基因动物模型 | 第10页 |
2.5 利用转基因动物进行组织器官移植 | 第10-13页 |
3 转基因导入的常方法 | 第13-18页 |
3.1 显微注射法 | 第13页 |
3.2 胚胎干细胞介导法 | 第13-14页 |
3.3 DNA的直接导入 | 第14页 |
3.4 核移植法(克隆)介导的基因转移 | 第14-15页 |
3.5 病毒介导的基因转移 | 第15-17页 |
3.5.1 逆转录病毒介导的基因转移 | 第15页 |
3.5.2 腺病毒载介导的基因转移 | 第15-16页 |
3.5.3 痘苗病毒介导的基因转移 | 第16-17页 |
3.6 用精子载体法制备转基因动物 | 第17-18页 |
3.6.1 精子载体法的基本原理 | 第17页 |
3.6.2 精子载体法的研究现状 | 第17-18页 |
4 几种转基因方法优缺点的比较图 | 第18页 |
5 转基因动物研究目前存在的问题 | 第18-20页 |
6 从畜牧兽医角度对转基因动物研究的展望 | 第20-23页 |
6.1 生产生物活性蛋白 | 第20页 |
6.2 改善牛羊奶的成分,全面提高人类健康 | 第20页 |
6.2.1 使马奶成为医补珍品 | 第20页 |
6.2.2 让牛羊奶的品质接近人奶 | 第20页 |
6.3 控制畜禽疾病 | 第20-21页 |
6.4 研究器官移植 | 第21-23页 |
第二部分 实验研究 | 第23-44页 |
实验研究一 睾丸组织转化法 | 第23-33页 |
1 材料与方法 | 第23-30页 |
1.1 材料 | 第23-27页 |
1.1.1 实验动物 | 第23页 |
1.1.2 分子生物学试剂及来源 | 第23-25页 |
1.1.3 所用主要仪器及来源 | 第25页 |
1.1.4 配制溶液 | 第25-27页 |
1.2 方法 | 第27-30页 |
1.2.1 质粒的提取及纯化 | 第27-28页 |
1.2.2 质粒检测 | 第28-29页 |
1.2.3 睾丸组织转化 | 第29页 |
1.2.4 转化个体精子PCR检测 | 第29页 |
1.2.5 仔兔的PCR | 第29-30页 |
1.2.6 对转化后七个月的雄兔睾丸组织检测 | 第30页 |
2 结果与分析 | 第30-31页 |
2.1 质粒的提取与检测 | 第30页 |
2.2 成熟精子的检测 | 第30页 |
2.3 仔兔的检测 | 第30-31页 |
2.4 七个月后的检测 | 第31页 |
3 讨论 | 第31-33页 |
实验研究二 输精管内成熟精子转染法 | 第33-36页 |
1 材料与方法 | 第33-34页 |
1.1 材料 | 第33页 |
1.2 方法 | 第33-34页 |
1.2.1 质粒纯化 | 第33页 |
1.2.2 手术 | 第33-34页 |
1.2.3 仔兔的检测 | 第34页 |
2 结果与分析 | 第34页 |
3 讨论 | 第34-36页 |
实验研究三 体外受精 | 第36-44页 |
1 材料与方法 | 第36-39页 |
1.1 卵子的准备 | 第36-37页 |
1.1.1 卵的收集 | 第36-37页 |
1.1.2 卵的洗涤与选择 | 第37页 |
1.1.3 成熟培养 | 第37页 |
1.2 成熟精子的收集 | 第37-38页 |
1.2.1 精子与精浆的分离 | 第37页 |
1.2.2 精子的洗涤 | 第37页 |
1.2.3 精子的冻存 | 第37-38页 |
1.3 精子的转染 | 第38页 |
1.4 精子的获能 | 第38页 |
1.5 体外受精 | 第38-39页 |
1.6 转染精子PCR检测 | 第39页 |
1.7 受精卵体外培养 | 第39页 |
1.8 早期胚胎的移植 | 第39页 |
2 结果与分析 | 第39-42页 |
2.1 精子转染后的检测 | 第39页 |
2.2 卵细胞培养的结果 | 第39-40页 |
2.3 精子获能结果 | 第40-42页 |
3 讨论 | 第42-44页 |
第三部分 结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
作者简介 | 第51页 |