| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 1 文献综述 | 第10-34页 |
| 1．1 蛋白表达载体的研究状况 | 第10-16页 |
| 1．1．1 蛋白表达载体的分类 | 第10-11页 |
| 1．1．2 蛋白表达载体的构建要求 | 第11-16页 |
| 1．2 蛋白表达的特点 | 第16-22页 |
| 1．2．1 原核蛋白表达的特点 | 第16-18页 |
| 1．2．2 原核细胞中蛋白表达的过程 | 第18-19页 |
| 1．2．3 原核细胞表达蛋白的分类 | 第19-22页 |
| 1．3 提高蛋白表达效率的途径 | 第22-25页 |
| 1．3．1 提高蛋白表达量的方法 | 第22-23页 |
| 1．3．2 提高蛋白可溶性的方法 | 第23-24页 |
| 1．3．3 提高蛋白的稳定性的方法 | 第24-25页 |
| 1．3．4 降低蛋白毒性的方法 | 第25页 |
| 1．4 包涵体的形成原因及解决方法 | 第25-28页 |
| 1．4．1 包涵体概念和形成原因 | 第25-27页 |
| 1．4．2 解决包涵体的措施 | 第27-28页 |
| 1．5 蛋白表达的发展前景 | 第28-30页 |
| 参考文献 | 第30-34页 |
| 2．pESP15b/pARA-SP6表达载体系统的构建 | 第34-45页 |
| 2．1 材料 | 第34-35页 |
| 2．1．1 主要试剂及生产厂家 | 第34页 |
| 2．1．2 主要仪器及生产厂家 | 第34页 |
| 2．1．3 引物 | 第34-35页 |
| 2．2 方法 | 第35-41页 |
| 2．2．1 pESP15b表达载体的构建 | 第35-38页 |
| 2．2．1．1 pESP11a载体构建(SP6 promoter替换T7 promoter) | 第36-38页 |
| 2．2．1．2 pESP15b载体构建(His 标签的加入) | 第38页 |
| 2．2．2 pARA-SP6表达载体的构建 | 第38-41页 |
| 2．3 结果分析 | 第41-44页 |
| 2．3．1 pESP15b/pARA-SP6表达载体的构建结果 | 第41-44页 |
| 2．3．1．1 pESP15b表达载体的构建结果 | 第41-42页 |
| 2．3．1．2 pARA-SP6表达载体的构建结果 | 第42-44页 |
| 2．4 小结 | 第44-45页 |
| 3．pESP15b/pARA-SP6表达载体的应用 | 第45-70页 |
| 3．1 重组质粒的构建 | 第45-54页 |
| 3．1．1 材料 | 第45-46页 |
| 3．1．1．1 主要试剂及生产厂家 | 第45页 |
| 3．1．1．2 主要仪器及生产厂家 | 第45-46页 |
| 3．1．1．3 引物 | 第46页 |
| 3．1．2 方法 | 第46-47页 |
| 3．1．2．1 pESP15b-ShAP重组表达质粒的构建 | 第46-47页 |
| 3．1．2．2 pET28(a)-ShAP重组表达质粒的构建 | 第47页 |
| 3．1．2．3 pColdI-ShAP重组表达质粒的构建 | 第47页 |
| 3．1．3 结果分析 | 第47-54页 |
| 3．1．3．1 pESP15b-ShAP重组表达质粒的构建结果 | 第48-50页 |
| 3．1．3．2 pET28(a)-ShAP重组表达质粒的构建结果 | 第50-52页 |
| 3．1．3．3 pColdI-ShAP重组表达质粒的构建结果 | 第52-54页 |
| 3．1．4 小结 | 第54页 |
| 3．2 重组质粒的表达 | 第54-68页 |
| 3．2．1 材料 | 第54页 |
| 3．2．2 方法 | 第54-56页 |
| 3．2．2．1 ShAP基因在pESP15b/pARA-SP6载体系统中的表达 | 第54-56页 |
| 3．2．2．2 ShAP基因在pET28(a)载体系统中的表达 | 第56页 |
| 3．2．2．3 ShAP基因在pColdI载体系统中的表达 | 第56页 |
| 3．2．3 结果分析 | 第56-63页 |
| 3．2．3．1 ShAP在pESP15b/pARA-SP6系统中的蛋白表达结果 | 第56-60页 |
| 3．2．3．2 ShAP在pET28(a)系统中的蛋白表达结果 | 第60-61页 |
| 3．2．3．3 pColdI载体系统中ShAP蛋白表达结果 | 第61-63页 |
| 3．2．4 讨论 | 第63-67页 |
| 3．2．5 小结 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-70页 |
| 4．结论与展望 | 第70页 |
| 4．1 主要结论 | 第70页 |
| 4．2 展望 | 第70页 |
| 5．创新点 | 第70页 |
| 6．发表论文情况 | 第70-71页 |
| 7．附录 | 第71-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
