| 中文摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 前言 | 第9-14页 |
| 实验材料和方法 | 第14-30页 |
| 一、材料 | 第14-17页 |
| (一) 实验菌株与细胞 | 第14页 |
| (二) 实验动物 | 第14页 |
| (三) 动物饲料 | 第14页 |
| (四) 主要试剂及试剂盒 | 第14-15页 |
| (五) 主要仪器和耗材 | 第15-16页 |
| (六) 所需溶液的配制 | 第16-17页 |
| 二、实验方法 | 第17-30页 |
| (一) 衣原体培养与包涵体计量 | 第17-18页 |
| 1、细胞培养 | 第17页 |
| 2、衣原体感染单层细胞 | 第17-18页 |
| 3、标本的染色 | 第18页 |
| 4、包涵体的计量 | 第18页 |
| 5、大量扩增衣原体 | 第18页 |
| (二) Real time PCR法检测衣原体 | 第18-23页 |
| 1、衣原体的收集及其基因组DNA的提取 | 第18-19页 |
| 2、引物选择及基因片段的扩增 | 第19-20页 |
| 3、质粒构建 | 第20-21页 |
| 4、质粒DNA提取(按试剂盒说明) | 第21页 |
| 5、标准品的制备 | 第21-22页 |
| 6、Real-time PCR | 第22-23页 |
| (三) 动物模型建立 | 第23-24页 |
| 1、雌激素预处理 | 第23页 |
| 2、感染用衣原体的制备 | 第23页 |
| 3、小鼠阴道接种衣原体 | 第23页 |
| 4、动物分组 | 第23-24页 |
| 5、感染后取样和解剖取材 | 第24页 |
| (四) 模型评价指标分析 | 第24-26页 |
| 1、一般状况观察指标 | 第24页 |
| 2、培养法检测衣原体 | 第24-25页 |
| 3、Real time PCR法检测衣原体 | 第25页 |
| 4、宫颈组织病理切片及炎症评价体系 | 第25-26页 |
| (五) 间接ELISA方法检测模型小鼠血清抗体效价 | 第26-27页 |
| 1、不同稀释度下的小鼠血清抗体效价比较 | 第26-27页 |
| 2、模型小鼠血清抗体比较 | 第27页 |
| (六) 间接ELISA方法检测模型小鼠血清细胞因子 | 第27-30页 |
| 1、血清IFN-γ检测(按试剂盒说明) | 第27-28页 |
| 2、血清IL-2检测(按试剂盒说明) | 第28页 |
| 3、血清IL-10检测(按试剂盒说明) | 第28-29页 |
| 4、统计方法 | 第29-30页 |
| 实验结果与讨论 | 第30-57页 |
| 结果一 衣原体的体外细胞扩增培养 | 第30-34页 |
| 结果二 衣原体核酸定量分析 | 第34-37页 |
| 结果三 感染小鼠的临床及病理指标分析 | 第37-46页 |
| 结果四 小鼠衣原体感染的病原学指标 | 第46-50页 |
| 1、感染动物衣原体的分离培养 | 第46-48页 |
| (1) 阴道拭子细胞培养 | 第46-47页 |
| (2) 宫颈拭子细胞培养 | 第47-48页 |
| 2、Real time PCR检测衣原体 | 第48-50页 |
| 结果五 小鼠衣原体感染模型的免疫学指标评价 | 第50-57页 |
| 1、抗体变化 | 第50-51页 |
| 2、细胞因子 | 第51-57页 |
| (1) 血清中IFN-γ含量检测 | 第51-52页 |
| (2) 血清中IL-2含量检测 | 第52-53页 |
| (3) 血清中IL-10含量 | 第53-57页 |
| 附:沙眼衣原体小鼠下生殖道感染模型标准操作规程(SOP) | 第57-64页 |
| 参考文献 | 第64-70页 |
| 个人简历 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
