| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 引言 | 第10-29页 |
| 1、植物抗旱研究进展 | 第10-15页 |
| 1.1 干旱胁迫下植物形态学特性 | 第10-11页 |
| 1.2 干旱胁迫下植物生理生化研究 | 第11-13页 |
| 1.3 植物抗旱分子研究机制 | 第13-15页 |
| 2、木薯耐旱调控机理研究进展 | 第15-20页 |
| 2.1 木薯概述 | 第15-16页 |
| 2.2 木薯抗旱研究进展 | 第16-20页 |
| 3、肌醇半乳糖苷合成酶的研究进展 | 第20-27页 |
| 3.1 糖基转移酶超基因家族8(GT8) | 第20-22页 |
| 3.2 棉子糖系列寡糖及其生物功能 | 第22-24页 |
| 3.3 肌醇半乳糖苷合成酶功能分析 | 第24-27页 |
| 4、本研究的目的和意义 | 第27-28页 |
| 5、技术路线 | 第28-29页 |
| 实验材料与方法 | 第29-47页 |
| 1、实验材料与试剂 | 第29-31页 |
| 1.1 实验材料 | 第29页 |
| 1.2 菌株与载体 | 第29页 |
| 1.3 培养基及添加成分 | 第29-30页 |
| 1.4 主要药品及试剂 | 第30页 |
| 1.5 主要仪器设备 | 第30-31页 |
| 2、实验方法 | 第31-47页 |
| 2.1 木薯总RNA提取及反转录 | 第31-33页 |
| 2.2 木薯肌醇半乳糖苷合成酶基因家族的克隆 | 第33-36页 |
| 2.3 木薯肌醇半乳糖苷合成酶基因家族的生物信息学分析 | 第36页 |
| 2.4 木薯肌醇半乳糖苷合成酶基因的表达分析 | 第36-37页 |
| 2.5 MeGolS5顺式作用元件分析 | 第37-38页 |
| 2.6 MeGolS5基因的亚细胞定位研究 | 第38-40页 |
| 2.7 MeGolS5基因在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达及抗旱性分析 | 第40-43页 |
| 2.8 MeGolS5基因在拟南芥中的抗旱功能验证 | 第43-47页 |
| 实验结果及分析 | 第47-76页 |
| 1、木薯肌醇半乳糖苷合成酶基因家族的克隆及生物信息学分析 | 第47-55页 |
| 1.1 木薯总RNA的提取 | 第47页 |
| 1.2 七个木薯肌醇半乳糖苷合成酶基因的克隆 | 第47-49页 |
| 1.3 木薯肌醇半乳糖苷合成酶基因蛋白序列分析 | 第49-51页 |
| 1.4 木薯肌醇半乳糖苷合成酶基因的内含子-外显子结构分析 | 第51-52页 |
| 1.5 木薯肌醇半乳糖苷合成酶蛋白的3D建模及结构分析 | 第52-54页 |
| 1.6 木薯肌醇半乳糖苷合成酶基因的进化树分析 | 第54-55页 |
| 2、响应干旱胁迫的木薯肌醇半乳糖苷合成酶基因的筛选 | 第55-57页 |
| 2.1 qRT-PCR引物的特异性检测 | 第56页 |
| 2.2 干旱胁迫下木薯肌醇半乳糖苷合成酶的表达分析 | 第56-57页 |
| 3、MeGolS5启动子顺式作用元件分析 | 第57-59页 |
| 4、MeGolS5基因的亚细胞定位研究 | 第59-60页 |
| 4.1 MeGolS5基因定位表达载体的构建 | 第59页 |
| 4.2 MeGolS5在烟草叶片表皮细胞中的定位 | 第59-60页 |
| 5、MeGolS5在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达及抗旱性分析 | 第60-69页 |
| 5.1 重组MeGolS5大肠杆菌表达载体的构建 | 第60-61页 |
| 5.2 重组MeGolS5大肠杆菌表达工程菌的构建 | 第61页 |
| 5.3 重组MeGolS5大肠杆菌表达工程菌的诱导表达 | 第61-62页 |
| 5.4 重组MeGolS5大肠杆菌表达工程菌的诱导条件的优化 | 第62-66页 |
| 5.5 重组MeGolS5工程菌的干旱胁迫分析 | 第66-69页 |
| 6、MeGolS5基因在拟南芥中的功能分析 | 第69-76页 |
| 6.1 植物表达载体PCAMBIA1301-35S-MeGolS5的构建 | 第69-70页 |
| 6.2 PCAMBIA1301-35S-MeGolS5转基因拟南芥的鉴定 | 第70-71页 |
| 6.3 PCAMBIA1301-35S-MeGolS5转基因拟南芥耐旱性分析 | 第71-74页 |
| 6.4 拟南芥抗旱相关基因的表达分析 | 第74-76页 |
| 讨论 | 第76-79页 |
| 1、木薯肌醇半乳糖苷合成酶基因的结构分析 | 第76页 |
| 2、肌醇半乳糖苷合成酶基因在木薯中表达特性分析 | 第76-77页 |
| 3、MeGolS5抗旱功能验证 | 第77页 |
| 4、MeGolS5基因抗旱分子机制 | 第77-79页 |
| 结论 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-89页 |
| 致谢 | 第89页 |
