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水稻抗稻瘟病基因Pii40(t)的精细定位与稻瘟菌效应蛋白MoCDIP4及其互作蛋白OsDjA9的功能分析

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第一章 前言第13-36页
    1.1 植物抗病研究现状第13-16页
        1.1.1 植物抗病反应第13页
        1.1.2 植物抗病分子机制第13-14页
        1.1.3 植物抗病基因结构第14-16页
    1.2 稻瘟病研究概述第16-20页
        1.2.1 稻瘟病研究意义第16-18页
        1.2.2 稻瘟菌病原生物学第18-20页
    1.3 效应蛋白研究概述第20-24页
        1.3.1 效应蛋白在植物与病原菌互作中的作用第20-24页
        1.3.2 稻瘟菌无毒(Avr)效应蛋白第24页
    1.4 水稻稻瘟病抗性研究第24-29页
        1.4.1 水稻稻瘟病抗性类型第24-25页
        1.4.2 水稻稻瘟病抗性基因的遗传基础与定位第25-26页
        1.4.3 水稻稻瘟病抗性基因的克隆第26-29页
    1.5 热激蛋白研究概述第29-33页
        1.5.1 热激蛋白结构与功能第29-31页
        1.5.2 植物DnaJ蛋白功能第31-32页
        1.5.3 DnaJ与植物免疫第32-33页
    1.6 本研究目的与意义第33-36页
第二章 Pi40(t)基因的精细定位第36-49页
    2.1 实验材料第36-37页
        2.1.1 水稻材料第36页
        2.1.2 稻瘟菌菌株(小种)第36页
        2.1.3 常用试剂第36页
        2.1.4 引物第36-37页
    2.2 实验方法第37-41页
        2.2.1 稻瘟菌室内喷雾接种第37-38页
        2.2.2 稻瘟病病情调查第38页
        2.2.3 水稻叶片基因组DNA的提取第38-39页
        2.2.4 PCR反应第39-40页
        2.2.5 PCR产物酶切反应第40页
        2.2.6 PAGE电泳检测第40-41页
        2.2.7 IR65482-4-136-2-2基因组BAC文库构建第41页
    2.3 结果与分析第41-47页
        2.3.1 Pi40(t)基因供体亲本抗谱分析第41页
        2.3.2 Pi40(t)基因精细定位第41-43页
        2.3.3 Pi40(t)位点物理图谱与电子重叠群构建第43-46页
        2.3.4 筛选Pi40(t)位点BAC克隆第46页
        2.3.5 BAC克隆15-8-9序列分析及基因预测第46-47页
    2.4 讨论第47-49页
第三章 稻瘟菌效应蛋白MoCDIP4的生物学功能及其水稻互作蛋白的筛选第49-64页
    3.1 材料与方法第50-52页
        3.1.1 植物材料与种植方法第50页
        3.1.2 菌株第50页
        3.1.3 载体第50-51页
        3.1.4 试剂与试剂盒第51页
        3.1.5 引物第51-52页
        3.1.6 基因号第52页
    3.2 实验方法第52-59页
        3.2.1 稻瘟菌遗传转化第52-53页
        3.2.2 稻瘟菌基因组DNA的提取第53-54页
        3.2.3 稻瘟菌RNA的提取第54页
        3.2.4 稻瘟菌cDNA的合成第54-55页
        3.2.5 稻瘟菌室内打孔(Punch)接种第55页
        3.2.6 烟草注射异源表达蛋白和亚细胞定位第55-56页
        3.2.7 酵母双杂交第56-57页
        3.2.8 蛋白电泳和Western杂交第57-58页
        3.2.9 GST-Pull down第58-59页
    3.3 结果与分析第59-62页
        3.3.1 MoCDIP4转基因菌株表型分析第59页
        3.3.2 MoCDIP4在烟草中的亚细胞定位第59-60页
        3.3.3 MoCDIP4在水稻中的互作蛋白筛选第60-62页
        3.3.4 MoCDIP4与OsDjA9体外互作验证第62页
    3.4 讨论第62-64页
第四章 OsDjA9生物学功能研究第64-72页
    4.1 实验材料第64-65页
        4.1.1 植物材料第64页
        4.1.2 载体第64-65页
        4.1.3 稻瘟菌菌株第65页
        4.1.4 引物第65页
    4.2 实验方法第65-66页
        4.2.1 水稻转化第65-66页
        4.2.2 水稻叶片RNA的提取第66页
        4.2.3 水稻PAMP因子的处理第66页
        4.2.4 水稻叶片热激处理第66页
    4.3 结果与分析第66-70页
        4.3.1 OsDjA9表达模式分析第66-67页
        4.3.2 OsDjA9蛋白在烟草中的亚细胞定位第67-69页
        4.3.3 OsDjA9转基因水稻株系的抗病性鉴定第69-70页
    4.4 讨论第70-72页
第五章 研究结论和展望第72-74页
    5.1 研究结论第72页
    5.2 研究展望第72-74页
参考文献第74-90页
致谢第90-91页
作者简历第91-92页

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