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野生茄子(Solanum torvum)叶片cDNA文库构建及耐盐相关基因StBADH遗传转化番茄

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-11页
缩略词表第12-14页
前言第14-16页
第一章 文献综述第16-50页
    1 植物基因文库及EST序列分析研究进展第16-31页
        1.1 基因组文库第16页
        1.2 cDNA文库第16-22页
        1.3 EST技术的原理第22页
        1.4 EST研究的主要步骤第22-23页
        1.5 EST技术的形成及应用第23-27页
        1.6 生物信息学在EST研究中的应用第27-31页
    2 甜菜碱与植物耐盐基因工程第31-42页
        2.1 甜菜碱的生物功能第31-34页
        2.2 甜菜碱生物合成途径第34-37页
        2.3 甜菜碱基因工程与植物耐盐性第37-42页
    3 番茄遗传转化研究进展第42-50页
        3.1 番茄遗传转化方法第42-45页
        3.2 转基因番茄研究进展第45-50页
第二章 野生茄子叶片cDNA文库构建及EST序列分析第50-71页
    第一节 野生茄子叶片cDNA文库构建第51-65页
        1 材料与方法第51-60页
            1.1 植物材料第51-52页
            1.2 试剂与仪器第52页
            1.3 试验方法第52-60页
        2 结果与分析第60-63页
            2.1 文库构建样品的总RNA浓度及质量检测第60-61页
            2.2 mRNA分离第61-62页
            2.3 mRNA反转录双链cDNA第62-63页
            2.4 cDNA文库滴度测定及PCR检测第63页
        3 讨论第63-65页
    第二节 野生茄子叶片cDNA文库的EST序列分析第65-71页
        1 材料与方法第65-66页
            1.1 试验材料第65页
            1.2 测序模板的获得第65页
            1.3 ESTs序列分析第65-66页
        2 结果与分析第66-69页
            2.1 cDNA序列测定及EST序列获得第66-67页
            2.2 ESTs序列同源性比对第67页
            2.3 ESTs序列功能注释与分类第67-69页
        3 讨论第69-71页
第三章 野生茄子甜菜碱醛脱氢酶基因(StBADH)的克隆及序列分析第71-83页
    摘要第71页
    1 材料与方法第71-74页
        1.1 植物材料第71页
        1.2 试剂与仪器第71-72页
        1.3 试验方法第72-74页
    2 结果与分析第74-81页
        2.1 总RNA提取质量与反转录效果检测第74-75页
        2.2 目的片段序列测定第75-77页
        2.3 StBADH全长序列的获得第77页
        2.4 氨基酸序列同源性比对第77-79页
        2.5 野生茄子甜菜碱醛脱氢酶氨基酸序列系统进化树构建第79-81页
    3 讨论第81-83页
第四章 野生茄子耐盐相关基因StBADH的抗除草剂植物表达载体构建第83-96页
    摘要第83页
    1 材料与方法第83-90页
        1.1 试验材料第83页
        1.2 试剂与仪器第83-85页
        1.3 试验方法第85-90页
    2 结果与分析第90-94页
        2.1 目的片段的PCR扩增与回收纯化第90-91页
        2.2 中间载体pCAMBIA3301-T800的构建第91-92页
        2.3 抗除草剂植物表达载体pCAMBIA3301-StBADH-T800的构建第92-93页
        2.4 重组质粒pCAMBIA3301-StBADH-T800导入农杆菌双酶切检测第93-94页
    3 讨论第94-96页
第五章 StBADH基因遗传转化番茄第96-114页
    摘要第96-97页
    1 材料与方法第97-101页
        1.1 试验材料第97页
        1.2 试剂与仪器第97页
        1.3 试验方法第97-101页
    2 结果与分析第101-111页
        2.1 不同激素配比对番茄愈伤组织诱导的影响第101页
        2.2 不同激素配比对番茄不定芽分化的影响第101-103页
        2.3 生根、炼苗与移栽第103-104页
        2.4 除菌剂(Carbenicillin)及筛选剂(Bialaphos)的最适浓度筛选第104-106页
        2.5 T_0代转基因番茄植株的分子鉴定及除草剂抗性检测第106-110页
        2.6 农杆菌介导的番茄遗传转化转化频率第110-111页
    3 讨论第111-114页
全文讨论第114-118页
全文结论第118-120页
创新之外第120-122页
参考文献第122-142页
附录第142-152页
攻读博士学位期间发表的论文及申请专利第152-154页
致谢第154页

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