摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
缩略词表 | 第12-14页 |
前言 | 第14-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-50页 |
1 植物基因文库及EST序列分析研究进展 | 第16-31页 |
1.1 基因组文库 | 第16页 |
1.2 cDNA文库 | 第16-22页 |
1.3 EST技术的原理 | 第22页 |
1.4 EST研究的主要步骤 | 第22-23页 |
1.5 EST技术的形成及应用 | 第23-27页 |
1.6 生物信息学在EST研究中的应用 | 第27-31页 |
2 甜菜碱与植物耐盐基因工程 | 第31-42页 |
2.1 甜菜碱的生物功能 | 第31-34页 |
2.2 甜菜碱生物合成途径 | 第34-37页 |
2.3 甜菜碱基因工程与植物耐盐性 | 第37-42页 |
3 番茄遗传转化研究进展 | 第42-50页 |
3.1 番茄遗传转化方法 | 第42-45页 |
3.2 转基因番茄研究进展 | 第45-50页 |
第二章 野生茄子叶片cDNA文库构建及EST序列分析 | 第50-71页 |
第一节 野生茄子叶片cDNA文库构建 | 第51-65页 |
1 材料与方法 | 第51-60页 |
1.1 植物材料 | 第51-52页 |
1.2 试剂与仪器 | 第52页 |
1.3 试验方法 | 第52-60页 |
2 结果与分析 | 第60-63页 |
2.1 文库构建样品的总RNA浓度及质量检测 | 第60-61页 |
2.2 mRNA分离 | 第61-62页 |
2.3 mRNA反转录双链cDNA | 第62-63页 |
2.4 cDNA文库滴度测定及PCR检测 | 第63页 |
3 讨论 | 第63-65页 |
第二节 野生茄子叶片cDNA文库的EST序列分析 | 第65-71页 |
1 材料与方法 | 第65-66页 |
1.1 试验材料 | 第65页 |
1.2 测序模板的获得 | 第65页 |
1.3 ESTs序列分析 | 第65-66页 |
2 结果与分析 | 第66-69页 |
2.1 cDNA序列测定及EST序列获得 | 第66-67页 |
2.2 ESTs序列同源性比对 | 第67页 |
2.3 ESTs序列功能注释与分类 | 第67-69页 |
3 讨论 | 第69-71页 |
第三章 野生茄子甜菜碱醛脱氢酶基因(StBADH)的克隆及序列分析 | 第71-83页 |
摘要 | 第71页 |
1 材料与方法 | 第71-74页 |
1.1 植物材料 | 第71页 |
1.2 试剂与仪器 | 第71-72页 |
1.3 试验方法 | 第72-74页 |
2 结果与分析 | 第74-81页 |
2.1 总RNA提取质量与反转录效果检测 | 第74-75页 |
2.2 目的片段序列测定 | 第75-77页 |
2.3 StBADH全长序列的获得 | 第77页 |
2.4 氨基酸序列同源性比对 | 第77-79页 |
2.5 野生茄子甜菜碱醛脱氢酶氨基酸序列系统进化树构建 | 第79-81页 |
3 讨论 | 第81-83页 |
第四章 野生茄子耐盐相关基因StBADH的抗除草剂植物表达载体构建 | 第83-96页 |
摘要 | 第83页 |
1 材料与方法 | 第83-90页 |
1.1 试验材料 | 第83页 |
1.2 试剂与仪器 | 第83-85页 |
1.3 试验方法 | 第85-90页 |
2 结果与分析 | 第90-94页 |
2.1 目的片段的PCR扩增与回收纯化 | 第90-91页 |
2.2 中间载体pCAMBIA3301-T800的构建 | 第91-92页 |
2.3 抗除草剂植物表达载体pCAMBIA3301-StBADH-T800的构建 | 第92-93页 |
2.4 重组质粒pCAMBIA3301-StBADH-T800导入农杆菌双酶切检测 | 第93-94页 |
3 讨论 | 第94-96页 |
第五章 StBADH基因遗传转化番茄 | 第96-114页 |
摘要 | 第96-97页 |
1 材料与方法 | 第97-101页 |
1.1 试验材料 | 第97页 |
1.2 试剂与仪器 | 第97页 |
1.3 试验方法 | 第97-101页 |
2 结果与分析 | 第101-111页 |
2.1 不同激素配比对番茄愈伤组织诱导的影响 | 第101页 |
2.2 不同激素配比对番茄不定芽分化的影响 | 第101-103页 |
2.3 生根、炼苗与移栽 | 第103-104页 |
2.4 除菌剂(Carbenicillin)及筛选剂(Bialaphos)的最适浓度筛选 | 第104-106页 |
2.5 T_0代转基因番茄植株的分子鉴定及除草剂抗性检测 | 第106-110页 |
2.6 农杆菌介导的番茄遗传转化转化频率 | 第110-111页 |
3 讨论 | 第111-114页 |
全文讨论 | 第114-118页 |
全文结论 | 第118-120页 |
创新之外 | 第120-122页 |
参考文献 | 第122-142页 |
附录 | 第142-152页 |
攻读博士学位期间发表的论文及申请专利 | 第152-154页 |
致谢 | 第154页 |