缩略词表 | 第1-10页 |
摘要 | 第10-13页 |
Abstract | 第13-16页 |
前言 | 第16-23页 |
1 本研究的目的意义 | 第16页 |
2 禽流感病毒 | 第16-17页 |
·禽流感病毒病原学特征 | 第16页 |
·致病机理 | 第16-17页 |
3 禽流感的抗体治疗研究进展 | 第17-18页 |
·治疗性IgG 类抗体药物的研究 | 第17页 |
·被动免疫预防和治疗禽流感的研究 | 第17-18页 |
4 预防性分泌型IgA 抗体的研究 | 第18-20页 |
·SIgA 结构与功能 | 第18-19页 |
·SIgA 的特征研究 | 第19页 |
·SIgA 基因工程抗体研究 | 第19-20页 |
5 基因工程抗体研究进展 | 第20-21页 |
6 本研究的内容及方案 | 第21-23页 |
·人鼠嵌合分泌型IgA SC 和IgJ 基因真核表达质粒的构建 | 第21页 |
·抗H5N1-HA 嵌合SIgA 抗体在CHO 细胞中的表达及免疫学特性分析 | 第21页 |
·提高SIgA 抗体表达量的相关研究 | 第21页 |
·分泌型IgA 的发酵培养研究 | 第21页 |
·SC 单克隆抗体的制备 | 第21-22页 |
·实验流程图 | 第22-23页 |
第一部分 人鼠嵌合分泌型IgA 真核表达质粒的构建 | 第23-32页 |
引言 | 第23-24页 |
1 材料与方法 | 第24-29页 |
·材料 | 第24页 |
·方法 | 第24-29页 |
2 实验结果 | 第29-30页 |
·人-鼠嵌合SIgA 抗体分泌片SC 表达质粒的构建 | 第29-30页 |
·人-鼠嵌合SIgA 抗体IgJ 表达质粒的构建 | 第30页 |
3 讨论 | 第30-32页 |
第二部分 抗H5N1-HA 嵌合SIgA 抗体在CHO 细胞中的表达、纯化和免疫学活性研究 | 第32-53页 |
引言 | 第32-33页 |
1 材料与方法 | 第33-43页 |
·材料 | 第33页 |
·方法 | 第33-43页 |
2 实验结果 | 第43-50页 |
·重链、轻链转染72h 后IgA 抗体的ELISA 检测 | 第43-44页 |
·IgA 单克隆细胞系表达IgA 的ELISA 检测 | 第44页 |
·IgA 单克隆细胞系表达IgA 稳定性的ELISA 分析 | 第44-45页 |
·IgA 单克隆细胞系表达IgA 的Western Blot 分析 | 第45页 |
·SC、IgJ 表达质粒转染72h 后SIgA 抗体的ELISA 检测 | 第45-46页 |
·嵌合分泌型IgA 单克隆细胞系的PCR 鉴定 | 第46-47页 |
·Western blotting 分析SIgA 抗体的完整性 | 第47-48页 |
·SIgA 抗体的H5N1-HA 抗原结合活性检测 | 第48-49页 |
·ELISA 鉴定SIgA 细胞培养上清中的SIgA 成分 | 第49页 |
·纯化的SIgA 抗体SDS-PAGE 检测 | 第49-50页 |
·纯化的SIgA 抗体的HA 抗原结合能力检测 | 第50页 |
3 讨论 | 第50-53页 |
第三部分 抗SC 单克隆抗体的制备 | 第53-65页 |
1 材料与方法 | 第53-60页 |
·材料 | 第53-54页 |
·pQE80L-SC 原核表达载体的构建 | 第54-56页 |
·SC 抗原蛋白的诱导表达 | 第56-57页 |
·SC 蛋白的纯化回收 | 第57-58页 |
·小鼠免疫 | 第58页 |
·细胞融合 | 第58页 |
·阳性杂交瘤细胞的筛选和克隆化培养 | 第58-59页 |
·腹水的制备 | 第59页 |
·单克隆抗体的纯化 | 第59-60页 |
·单克隆抗体特性鉴定 | 第60页 |
2 实验结果 | 第60-63页 |
·pQE80L-SC 质粒的构建 | 第60-61页 |
·SC 蛋白的诱导表达情况鉴定 | 第61页 |
·SC 蛋白的纯化回收 | 第61-62页 |
·单克隆抗体的筛选及阳性细胞株的建立 | 第62页 |
·单克隆抗体的纯化 | 第62-63页 |
·单克隆抗体亚型鉴定及效价测定 | 第63页 |
·Western blotting 鉴定 | 第63页 |
3 讨论 | 第63-65页 |
全文结论 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-71页 |
文献综述 | 第71-79页 |
参考文献 | 第77-79页 |
代表性论著 | 第79-86页 |
附录 | 第86-90页 |
个人简历 | 第90-91页 |
致谢 | 第91页 |