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抗禽流感病毒H5N1分泌型IgA在CHO细胞中的表达及免疫学活性分析

缩略词表第1-10页
摘要第10-13页
Abstract第13-16页
前言第16-23页
 1 本研究的目的意义第16页
 2 禽流感病毒第16-17页
   ·禽流感病毒病原学特征第16页
   ·致病机理第16-17页
 3 禽流感的抗体治疗研究进展第17-18页
   ·治疗性IgG 类抗体药物的研究第17页
   ·被动免疫预防和治疗禽流感的研究第17-18页
 4 预防性分泌型IgA 抗体的研究第18-20页
   ·SIgA 结构与功能第18-19页
   ·SIgA 的特征研究第19页
   ·SIgA 基因工程抗体研究第19-20页
 5 基因工程抗体研究进展第20-21页
 6 本研究的内容及方案第21-23页
   ·人鼠嵌合分泌型IgA SC 和IgJ 基因真核表达质粒的构建第21页
   ·抗H5N1-HA 嵌合SIgA 抗体在CHO 细胞中的表达及免疫学特性分析第21页
   ·提高SIgA 抗体表达量的相关研究第21页
   ·分泌型IgA 的发酵培养研究第21页
   ·SC 单克隆抗体的制备第21-22页
   ·实验流程图第22-23页
第一部分 人鼠嵌合分泌型IgA 真核表达质粒的构建第23-32页
 引言第23-24页
 1 材料与方法第24-29页
   ·材料第24页
   ·方法第24-29页
 2 实验结果第29-30页
   ·人-鼠嵌合SIgA 抗体分泌片SC 表达质粒的构建第29-30页
   ·人-鼠嵌合SIgA 抗体IgJ 表达质粒的构建第30页
 3 讨论第30-32页
第二部分 抗H5N1-HA 嵌合SIgA 抗体在CHO 细胞中的表达、纯化和免疫学活性研究第32-53页
 引言第32-33页
 1 材料与方法第33-43页
   ·材料第33页
   ·方法第33-43页
 2 实验结果第43-50页
   ·重链、轻链转染72h 后IgA 抗体的ELISA 检测第43-44页
   ·IgA 单克隆细胞系表达IgA 的ELISA 检测第44页
   ·IgA 单克隆细胞系表达IgA 稳定性的ELISA 分析第44-45页
   ·IgA 单克隆细胞系表达IgA 的Western Blot 分析第45页
   ·SC、IgJ 表达质粒转染72h 后SIgA 抗体的ELISA 检测第45-46页
   ·嵌合分泌型IgA 单克隆细胞系的PCR 鉴定第46-47页
   ·Western blotting 分析SIgA 抗体的完整性第47-48页
   ·SIgA 抗体的H5N1-HA 抗原结合活性检测第48-49页
   ·ELISA 鉴定SIgA 细胞培养上清中的SIgA 成分第49页
   ·纯化的SIgA 抗体SDS-PAGE 检测第49-50页
   ·纯化的SIgA 抗体的HA 抗原结合能力检测第50页
 3 讨论第50-53页
第三部分 抗SC 单克隆抗体的制备第53-65页
 1 材料与方法第53-60页
   ·材料第53-54页
   ·pQE80L-SC 原核表达载体的构建第54-56页
   ·SC 抗原蛋白的诱导表达第56-57页
   ·SC 蛋白的纯化回收第57-58页
   ·小鼠免疫第58页
   ·细胞融合第58页
   ·阳性杂交瘤细胞的筛选和克隆化培养第58-59页
   ·腹水的制备第59页
   ·单克隆抗体的纯化第59-60页
   ·单克隆抗体特性鉴定第60页
 2 实验结果第60-63页
   ·pQE80L-SC 质粒的构建第60-61页
   ·SC 蛋白的诱导表达情况鉴定第61页
   ·SC 蛋白的纯化回收第61-62页
   ·单克隆抗体的筛选及阳性细胞株的建立第62页
   ·单克隆抗体的纯化第62-63页
   ·单克隆抗体亚型鉴定及效价测定第63页
   ·Western blotting 鉴定第63页
 3 讨论第63-65页
全文结论第65-66页
参考文献第66-71页
文献综述第71-79页
 参考文献第77-79页
代表性论著第79-86页
附录第86-90页
个人简历第90-91页
致谢第91页

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