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低毒力病毒CHV1-CN280对寄主毒性的影响及其p29基因在栗疫菌及稻瘟菌中的功能分析

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
上篇 文献综述第11-32页
 1 栗疫菌的发生与防治第12-13页
   ·栗疫病的发生与危害第12页
   ·栗疫病的病原及发病情况第12-13页
 2 栗疫菌的防治第13-20页
   ·栗疫病抗病育种和化学防治第13-14页
   ·利用低毒力病毒进行栗疫菌的生物防治第14-20页
     ·低毒力病毒的发现第14-15页
     ·低毒力病毒的传递第15-17页
     ·营养体亲和性第17-18页
     ·低毒力病毒应用于生物防治第18-20页
 3 低毒力病毒基因组遗传结构研究第20-27页
   ·低毒力病毒的基因组的特点第20-23页
   ·低毒力病毒的基因组功能第23-27页
 参考文献第27-32页
下篇 研究内容第32-71页
 第一章 低毒力病毒CHV1-CN280对寄主毒性的影响第33-49页
  1 材料和方法第34-39页
   ·供试菌株第34-35页
   ·试验材料第35页
   ·各菌株生物学特性测定第35-36页
     ·各菌株生长表型及生长速率测定第35-36页
     ·各菌株产孢量测定第36页
     ·各菌株室内毒力测定第36页
   ·田间试验第36-37页
     ·接种第36页
     ·采样、分离和纯化第36-37页
   ·低毒力菌株的形态学鉴定第37页
   ·林中分离病毒的分子生物学鉴定第37-39页
     ·菌丝粉制备第37页
     ·dsRNA提取第37-38页
     ·RT-PCR与cDNA测序第38-39页
  2 结果和分析第39-44页
   ·菌株生长表型第39-40页
   ·各菌株生长速度测定第40-41页
   ·菌株分生孢子量测定第41页
   ·弱毒力菌株致病性测定第41-42页
   ·田间分离结果鉴定第42-44页
     ·营养体亲和性鉴定第42-43页
     ·分子生物学鉴定第43-44页
  3 讨论第44-46页
  参考文献第46-49页
 第二章 CHV1-CN280低毒力病毒中p29基因在栗疫菌及稻瘟菌中的功能研究第49-71页
  1 材料与方法第52-57页
   ·供试菌株及培养条件第52页
   ·低毒力菌株CHV1-CN280的dsRNA的提取和反转录第52页
   ·p29基因的克隆及序列分析第52-53页
     ·栗疫菌中表达载体的构建第52页
     ·稻瘟菌中表达载体的构建第52页
     ·不同CHV1病毒中p29序列分析第52-53页
   ·原生质体的制备和转化第53-54页
     ·栗疫菌原生质体的制备和转化第53页
     ·稻瘟菌原生质体的制备和转化第53-54页
   ·转化子的筛选和验证第54-55页
     ·DNA、RNA的提取和cDNA的合成第54页
     ·PCR法检测第54页
     ·RT-PCR方法验证第54页
     ·Southern blot验证第54-55页
   ·栗疫菌中突变体表型分析第55-56页
     ·菌落形态观察及生长速率测定第55页
     ·突变体分生孢子产量测定第55页
     ·突变体漆酶活性测定第55页
     ·突变体致病力测定第55-56页
   ·稻瘟菌中突变体表型分析第56-57页
     ·菌落形态观察及生长速率测定第56页
     ·突变体分生孢子产量测定第56页
     ·致病力情况调查第56页
     ·突变体漆酶活性测定第56-57页
     ·突变体对胞外过氧化物酶的影响第57页
  2 结果分析第57-65页
   ·p29基因的克隆转化子的筛选和序列分析第57-60页
     ·PCR法检测第57-58页
     ·RT-PCR方法验证第58-59页
     ·Southern blot方法验证第59页
     ·p29编码蛋白的序列比对结果分析第59-60页
   ·突变体菌落形态观察及生长速率分析第60-62页
   ·突变体分生孢子产量第62页
   ·突变体对漆酶的影响第62-64页
     ·栗疫菌中转化子漆酶活性检测及相关基因表达量分析第62-63页
     ·稻瘟菌中转化子漆酶活性检测及相关基因表达量分析第63-64页
   ·突变体对胞外过氧化物酶的影响第64-65页
     ·胞外过氧化物酶活性检测及含量测定第64页
     ·胞外过氧化物酶相关基因表达量分析第64-65页
  3 讨论第65-68页
  参考文献第68-71页
附录1第71-77页
附录2第77-79页
攻读硕士学位期间发表的研究论文第79-81页
致谢第81页

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