| 致谢 | 第5-10页 |
| 中文摘要 | 第10-12页 |
| 文献综述 | 第12-19页 |
| 1 中国肉牛产业发展现状 | 第12-14页 |
| 1.1 发展肉牛产业的重要性 | 第12-13页 |
| 1.1.1 是人类膳食结构调整的需求 | 第12页 |
| 1.1.2 是畜牧业产业结构调整的需求 | 第12-13页 |
| 1.1.3 是发展循环经济的需求 | 第13页 |
| 1.2 我国肉牛产业的发展趋势 | 第13-14页 |
| 1.2.1 利用杂交优势,进行肉牛选育改良 | 第13页 |
| 1.2.2 运行产业化模式,促进肉牛产业发展 | 第13页 |
| 1.2.3 生物技术的研究与应用 | 第13-14页 |
| 1.3 河南省本土黄牛——南阳牛的肉质改良相关工作进展 | 第14页 |
| 2 PPAR_γ基因研究进展 | 第14-19页 |
| 2.1 PPAR_γ表达规律的研究进展 | 第15-16页 |
| 2.1.1 PPAR_γ在不同物种动物组织中的表达规律 | 第15页 |
| 2.1.2 PPAR_γ在不同肥胖程度个体中的表达规律 | 第15页 |
| 2.1.3 PPAR_γ在不同祖源性脂肪细胞中的表达规律 | 第15-16页 |
| 2.2 介导PPAR_γ调控脂肪细胞分化的转录和调控因子研究进展 | 第16-17页 |
| 2.2.1 转录因子介导PPAR_γ调控脂肪细胞分化 | 第16-17页 |
| 2.2.2 miRNA介导PPAR_γ调控脂肪细胞分化 | 第17页 |
| 2.3 活化PPAR_γ并促进脂肪细胞分化的配体研究进展 | 第17-18页 |
| 2.4 小结 | 第18-19页 |
| 试验一 南阳牛前体脂肪细胞原代培养基诱导分化诱导 | 第19-27页 |
| 1 引言 | 第19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-22页 |
| 2.1 试验材料 | 第19-20页 |
| 2.1.1 组织来源 | 第19页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第19页 |
| 2.1.3 主要仪器与器械 | 第19-20页 |
| 2.2 主要溶液配制 | 第20-21页 |
| 2.2.1 无钙镁磷酸缓冲液(PBS) | 第20页 |
| 2.2.2 DMEM/F12完全培养液 | 第20页 |
| 2.2.3 基础分化培养液 | 第20页 |
| 2.2.4 诱导分化培养液 | 第20页 |
| 2.2.5 0.25%胰蛋白酶消化液 | 第20-21页 |
| 2.2.6 0.1%I型胶原酶消化液 | 第21页 |
| 2.2.7 油红O染液 | 第21页 |
| 2.3 试验方法 | 第21-22页 |
| 2.3.1 前体脂肪细胞的原代培养 | 第21页 |
| 2.3.2 前体脂肪细胞的传代培养 | 第21页 |
| 2.3.3 细胞计数 | 第21页 |
| 2.2.4 生长曲线绘制 | 第21-22页 |
| 2.3.5 前体脂肪细胞的诱导培养 | 第22页 |
| 2.3.6 油红O染色法测定细胞内脂肪含量 | 第22页 |
| 2.3.7 脂肪细胞标志基因表达检测 | 第22页 |
| 3 结果与分析 | 第22-25页 |
| 3.1 前体脂肪细胞的原代培养和传代培养 | 第22-23页 |
| 3.2 前体脂肪细胞生长曲线的绘制 | 第23页 |
| 3.3 前体脂肪细胞的诱导分化及形态观察 | 第23-24页 |
| 3.4 细胞内脂肪含量的变化 | 第24-25页 |
| 3.5 脂肪细胞标志基因表达检测 | 第25页 |
| 4 讨论 | 第25-26页 |
| 4.1 脂肪细胞与脂肪组织 | 第25页 |
| 4.2 牛前体脂肪细胞体外培养模型的建立 | 第25-26页 |
| 4.3 前体脂肪细胞分化的机制 | 第26页 |
| 5 小结 | 第26-27页 |
| 试验二 牛PPAR_γ基因的表达特性及其对脂肪细胞增殖分化的影响 | 第27-37页 |
| 1 引言 | 第27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-32页 |
| 2.1 试验材料 | 第27-28页 |
| 2.1.1 组织来源 | 第27页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第27-28页 |
| 2.1.3 主要仪器与器械 | 第28页 |
| 2.2 主要溶液配制 | 第28-29页 |
| 2.2.1 无钙镁磷酸缓冲液(PBS) | 第28页 |
| 2.2.2 DMEM/F12完全培养液 | 第28-29页 |
| 2.2.3 基础分化培养液 | 第29页 |
| 2.2.4 诱导分化培养液 | 第29页 |
| 2.2.5 0.25%胰蛋白酶消化液 | 第29页 |
| 2.2.6 0.1%1型胶原酶消化液 | 第29页 |
| 2.2.7 油红O染液 | 第29页 |
| 2.2.8 DEPC水(逆转录中所用的DEPC水的配制) | 第29页 |
| 2.2.9 75%乙醇(要在抽提时现配) | 第29页 |
| 2.2.10 10xTBE溶液 | 第29页 |
| 2.2.11 琼脂糖溶液(2.0%) | 第29页 |
| 2.3 试验方法 | 第29-32页 |
| 2.3.1 人前体脂肪细胞的原代培养、诱导分化和药物干预 | 第29-30页 |
| 2.3.2 脂肪细胞总RNA提取 | 第30页 |
| 2.3.3 RT(反转录) | 第30-31页 |
| 2.2.4 RT-PCR引物设计与合成 | 第31页 |
| 2.3.5 RT-PCR | 第31-32页 |
| 2.3.6 生长曲线绘制 | 第32页 |
| 2.3.7 油红O提取比色 | 第32页 |
| 2.3.8 统计分析 | 第32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-35页 |
| 3.1 牛PPAR_γ基因在脂肪细胞分化过程中的表达规律 | 第32-33页 |
| 3.2 吡格列酮干预对牛PPAR_γ基因表达量的影响 | 第33页 |
| 3.3 上调牛PPAR_γ基因表达量对脂肪细胞增殖的影响 | 第33-34页 |
| 3.4 牛PPAR_γ基因表达量上调后脂肪细胞分化情况 | 第34页 |
| 3.5 牛PPAR_γ基因表达量上调后其它基因表达量的变化 | 第34-35页 |
| 4 讨论 | 第35-36页 |
| 5 小结 | 第36-37页 |
| 结论 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-44页 |
| 英文缩写词表 | 第44-45页 |
| ABSTRACT | 第45-46页 |
| 作者简介 | 第47页 |
