| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 引言 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-24页 |
| 1.1 植物基因功能研究策略 | 第11-16页 |
| 1.1.1 超量表达 | 第11-12页 |
| 1.1.2 插入突变 | 第12-13页 |
| 1.1.3 定向诱导基因组局部突变 | 第13-15页 |
| 1.1.4 RNA干扰技术 | 第15-16页 |
| 1.2 病毒诱导基因沉默技术及其在禾本科植物中的应用 | 第16-20页 |
| 1.2.1 病毒诱导基因沉默的发现、发展及作用机制 | 第16-17页 |
| 1.2.2 病毒诱导基因沉默在禾本科植物中的应用 | 第17-19页 |
| 1.2.3 VIGS 在禾本科植物中应用的局限性及应用前景 | 第19-20页 |
| 1.3 小麦淀粉合成关键酶SBEIIa和SSIIa基因的研究进展 | 第20-22页 |
| 1.3.1 小麦淀粉分支酶SBEIIa基因的研究进展 | 第20-21页 |
| 1.3.2 可溶性淀粉合成酶SSIIa基因的研究进展 | 第21-22页 |
| 1.4 抗性淀粉的研究进展 | 第22-23页 |
| 1.5 本研究的目的与意义 | 第23-24页 |
| 第二章 材料与方法 | 第24-30页 |
| 2.1 试验材料、试剂及仪器 | 第24页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第24页 |
| 2.1.2 试验试剂 | 第24页 |
| 2.1.3 试验仪器 | 第24页 |
| 2.2 试验方法 | 第24-29页 |
| 2.2.1 小麦籽粒总RNA的提取及cDNA第一链的合成 | 第24-25页 |
| 2.2.2 小麦各目的基因的克隆和测序 | 第25-26页 |
| 2.2.3 VIGS重组载体的构建 | 第26-27页 |
| 2.2.4 VIGS载体的线性化及纯化 | 第27-28页 |
| 2.2.5 体外转录 | 第28页 |
| 2.2.6 接种 | 第28页 |
| 2.2.7 实时荧光定量PCR（Real-time quantitative PCR）检测 | 第28-29页 |
| 2.2.8 小麦籽粒直链淀粉和抗性淀粉含量的测定 | 第29页 |
| 2.3 数据统计分析 | 第29-30页 |
| 第三章 结果与分析 | 第30-42页 |
| 3.1 小麦籽粒总RNA的提取及cDNA第一链的合成 | 第30页 |
| 3.2 小麦各目的基因的克隆和测序 | 第30-33页 |
| 3.2.1 小麦PDS，SBEⅡa和SSⅡa基因片段克隆 | 第30-32页 |
| 3.2.2 小麦SBEⅡa和SSⅡa融合片段的克隆 | 第32-33页 |
| 3.3 VIGS重组载体的构建 | 第33-34页 |
| 3.4 VIGS载体的线性化 | 第34页 |
| 3.5 体外转录 | 第34-35页 |
| 3.6 在小麦穗部和籽粒中诱导PDS基因沉默 | 第35-36页 |
| 3.7 VIGS技术分别诱导SBEⅡa和SSⅡa基因沉默对小麦籽粒淀粉含量的影响 | 第36-39页 |
| 3.8 VIGS技术同时诱导SBEⅡa和SSⅡa基因沉默对小麦籽粒淀粉含量的影响 | 第39-42页 |
| 第四章 讨论与结论 | 第42-46页 |
| 4.1 BSMV 载体的开发应用 | 第42页 |
| 4.2 影响 BSMV-VIGS 技术应用的因素 | 第42-44页 |
| 4.2.1 培养温度 | 第42-43页 |
| 4.2.2 接种技术 | 第43页 |
| 4.2.3 BSMV 载体中插入的基因片段 | 第43-44页 |
| 4.3 BSMV-VIGS 技术诱导 SBEIIa 和 SSIIa 基因沉默 | 第44页 |
| 4.4 BSMV-VIGS 技术应用的展望 | 第44-45页 |
| 4.5 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-53页 |
| 作者简介 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 导师评阅表 | 第55页 |
