目录 | 第4-9页 |
摘要 | 第9-11页 |
ABSTRACT | 第11-13页 |
缩略词表 | 第14-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-35页 |
1 红皮梨种质资源 | 第15-18页 |
1.1 西洋梨 | 第15-16页 |
1.1.1 早红考密斯 | 第16页 |
1.1.2 红安久 | 第16页 |
1.1.3 考密斯 | 第16页 |
1.2 东方梨 | 第16-18页 |
1.2.1 红香酥 | 第17页 |
1.2.2 满天红 | 第17页 |
1.2.3 八月红 | 第17页 |
1.2.4 南果 | 第17-18页 |
2 红皮梨的发展前景 | 第18-19页 |
2.1 红皮梨遗传规律研究 | 第18页 |
2.2 皮梨资源与育种 | 第18-19页 |
3 梨果皮色泽的研究 | 第19-26页 |
3.1 花青素合成途径的关键酶 | 第20-22页 |
3.1.1 查耳酮合酶(CHS) | 第21页 |
3.1.2 苯基苯乙烯酮黄烷酮异构酶(CHI) | 第21页 |
3.1.3 黄烷酮-3-羟化酶(F3H) | 第21页 |
3.1.4 F3’H和F3’5’H | 第21-22页 |
3.1.5 二氢黄酮醇-4-还原酶(DFR) | 第22页 |
3.1.6 花色素合成酶(ANS) | 第22页 |
3.1.7 UDP-葡萄糖:类黄酮3-O-葡萄糖基转移酶(UFGT) | 第22页 |
3.2 花青素合成的调控因子 | 第22-24页 |
3.2.1 MYB蛋白 | 第22-23页 |
3.2.2 bHLH蛋白 | 第23页 |
3.2.3 WD40蛋白 | 第23页 |
3.2.4 MADS-box | 第23-24页 |
3.3 影响花青素合成的其它因素 | 第24-25页 |
3.3.1 糖对花青素合成的影响 | 第24-25页 |
3.3.2 植物激素对花青素合成的影响 | 第25页 |
3.3.3 光对花青素合成的影响 | 第25页 |
3.4 花青素的研究展望 | 第25-26页 |
4 果树突变体的产生及鉴定 | 第26-29页 |
4.1 自然芽变 | 第26页 |
4.2 芽变的鉴定方法 | 第26-28页 |
4.2.1 染色体观察法 | 第26-27页 |
4.2.2 同工酶分析法 | 第27页 |
4.2.3 孢粉学研究法 | 第27-28页 |
4.2.4 分子生物技术 | 第28页 |
4.3 人工诱变 | 第28-29页 |
4.3.1 辐射诱变国内外进展 | 第28页 |
4.3.2 辐射诱变材料 | 第28-29页 |
4.3.3 辐射诱变剂 | 第29页 |
4.3.4 辐射效应 | 第29页 |
5 果树研究中常用的分子标记技术 | 第29-31页 |
5.1 限制性片段长度多态性(RFLP) | 第29-30页 |
5.2 随机扩增多态性DNA(RAPD) | 第30页 |
5.3 扩增片段长度多态性(AFLP) | 第30-31页 |
5.4 相关序列扩增多态性(SRAP) | 第31页 |
5.5 简单重复序列(SSR) | 第31页 |
6 cDNA-AFLP技术及其应用 | 第31-35页 |
6.1 cDNA-AFLP技术原理 | 第32页 |
6.2 cDNA-AFLP技术流程 | 第32-33页 |
6.3 cDNA-AFLP技术特点 | 第33-34页 |
6.3.1 可以反映基因间表达量的差异 | 第33页 |
6.3.2 重复性高,假阳性低 | 第33页 |
6.3.3 全面获取转录组的表达信息 | 第33-34页 |
6.4 cDNA-AFLP技术应用 | 第34-35页 |
第二章 梨果皮色泽变异品种(系)的分子标记鉴定 | 第35-45页 |
摘要 | 第35页 |
前言 | 第35-36页 |
1 材料与方法 | 第36-38页 |
1.1 试验材料 | 第36-37页 |
1.2 试验方法 | 第37页 |
1.2.1 基因组DNA的提取 | 第37页 |
1.2.2 AFLP标记分析 | 第37页 |
1.2.3 SRAP标记分析 | 第37页 |
1.3 数据统计与处理 | 第37-38页 |
2 结果与分析 | 第38-42页 |
2.1 基因组DNA扩增结果 | 第38页 |
2.2 AFLP标记鉴定色泽变异品种(系) | 第38-39页 |
2.3 SRAP标记鉴定色泽变异品种(系) | 第39-41页 |
2.4 不同品种(系)的指纹图谱及系谱关系 | 第41-42页 |
3 讨论 | 第42-43页 |
3.1 分子标记在果树突变系鉴定中的应用 | 第42页 |
3.2 不同分子标记的鉴别效率 | 第42-43页 |
4 小结 | 第43-45页 |
第三章 早红考密斯及其绿色变异系果皮中花青素含量的比较研究 | 第45-51页 |
摘要 | 第45页 |
前言 | 第45-46页 |
1 试验材料与方法 | 第46页 |
1.1 试验材料 | 第46页 |
1.2 试验方法 | 第46页 |
2 结果分析 | 第46-48页 |
2.1 早红考密斯及其绿色变异系果皮中花青素含量的变化 | 第46-48页 |
2.2 早红考密斯及其变异系果皮花青素含量的比较 | 第48页 |
3 讨论 | 第48-49页 |
4 小结 | 第49-51页 |
第四章 早红考密斯及其绿色变异系CDNA-AFLP的表达差异分析 | 第51-77页 |
摘要 | 第51页 |
前言 | 第51-52页 |
1 试验材料与方法 | 第52-58页 |
1.1 试验材料 | 第52页 |
1.2 试验方法 | 第52-58页 |
1.2.1 RNA提取 | 第52页 |
1.2.2 第一链cDNA反应合成 | 第52-53页 |
1.2.3 第二链cDNA反应合成 | 第53页 |
1.2.4 cDNA纯化 | 第53-54页 |
1.2.5 cDNA-AFLP反应体系 | 第54-56页 |
1.2.6 6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第56页 |
1.2.7 条带统计 | 第56-57页 |
1.2.8 差异片段的回收、纯化 | 第57页 |
1.2.9 目的片段的连接与转化 | 第57-58页 |
1.2.10 阳性克隆的检测及测序 | 第58页 |
1.2.11 序列比对分析 | 第58页 |
2 结果分析 | 第58-71页 |
2.1 RNA检测 | 第58-59页 |
2.2 cDNA-AFLP体系优化 | 第59-60页 |
2.3 cDNA-AFLP结果分析 | 第60-62页 |
2.4 6%聚丙烯酰胺凝胶回收 | 第62-63页 |
2.5 阳性克隆的检测 | 第63页 |
2.6 测序结果 | 第63-70页 |
2.7 差异片段序列的BLAST结果分析 | 第70-71页 |
3 讨论 | 第71-75页 |
4 小结 | 第75-77页 |
第五章 差异表达基因与花青素积累的关系研究 | 第77-87页 |
摘要 | 第77页 |
前言 | 第77-78页 |
1 材料与方法 | 第78-80页 |
1.1 试验材料 | 第78页 |
1.2 试验方法 | 第78-80页 |
1.2.1 果皮RNA提取 | 第78页 |
1.2.2 cDNA合成及检测 | 第78-79页 |
1.2.3 PyMADS18荧光引物设计及检测 | 第79页 |
1.2.4 荧光定量PCR | 第79-80页 |
2 结果分析 | 第80-84页 |
2.1 果皮总RNA检测 | 第80页 |
2.2 合成cDNA检测 | 第80-81页 |
2.3 TDF11的BLAST结果 | 第81-82页 |
2.4 实时荧光定量PCR分析 | 第82-83页 |
2.5 早红考密斯及其绿色变异系PyMADS18基因表达量分析 | 第83-84页 |
2.6 早红考密斯及其变异系的PyMADS18基因表达量比较 | 第84页 |
3 讨论 | 第84-86页 |
4 小结 | 第86-87页 |
全文结论 | 第87-89页 |
主要创新点 | 第89-91页 |
参考文献 | 第91-99页 |
攻读硕士学位期间所发表论文 | 第99-101页 |
致谢 | 第101页 |