| 中文摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩略语/符号说明 | 第14-17页 |
| 前言 | 第17-19页 |
| 研究现状、成果 | 第17-18页 |
| 研究目的、方法 | 第18-19页 |
| 对象与方法 | 第19-29页 |
| 1 实验细胞培养 | 第19-21页 |
| 1.1 实验材料和主要试剂 | 第19-20页 |
| 1.1.1 实验细胞 | 第19页 |
| 1.1.2 主要实验仪器 | 第19页 |
| 1.1.3 试剂及耗材 | 第19页 |
| 1.1.4 试剂配制 | 第19-20页 |
| 1.2 实验方法 | 第20-21页 |
| 1.2.1 心肌细胞的培养和传代 | 第20页 |
| 1.2.2 心肌细胞的计数 | 第20页 |
| 1.2.3 心肌细胞的冻存 | 第20页 |
| 1.2.4 心肌细胞的复苏 | 第20-21页 |
| 2 miR-27a与心肌细胞凋亡 | 第21-24页 |
| 2.1 主要试剂 | 第21页 |
| 2.2 主要仪器 | 第21页 |
| 2.3 实验方法 | 第21-24页 |
| 2.3.1 细胞干预 | 第21-22页 |
| 2.3.2 不同的RNA oligo片段转染心肌细胞 | 第22页 |
| 2.3.3 总RNA提取的步骤 | 第22-23页 |
| 2.3.4 实时荧光定量PCR检测miR-27a的表达 | 第23页 |
| 2.3.5 TUNEL染色法检测心肌细胞凋亡指数 | 第23-24页 |
| 3 miR-27a在高糖状态下对心肌细胞凋亡的影响 | 第24-28页 |
| 3.1 主要试剂 | 第24-25页 |
| 3.2 主要仪器 | 第25页 |
| 3.3 抗体 | 第25页 |
| 3.4 细胞干预 | 第25-26页 |
| 3.5 实验步骤 | 第26-28页 |
| 3.5.1 荧光定量PCR方法检测各组miR-27a的表达量 | 第26页 |
| 3.5.2 TUNEL染色检测各组心肌细胞凋亡指数 | 第26页 |
| 3.5.3 细胞总蛋白提取及浓度测定 | 第26页 |
| 3.5.4 Western Blotting检测步骤 | 第26-28页 |
| 4 miR-27a在GLP-1 改善高糖状态下心肌细胞凋亡中的作用 | 第28页 |
| 4.1 主要试剂及仪器 | 第28页 |
| 4.2 细胞干预 | 第28页 |
| 4.3 实验步骤 | 第28页 |
| 4.3.1 荧光定量PCR方法检测各组miR-27a的表达量 | 第28页 |
| 4.3.2 TUNEL染色检测各组心肌细胞凋亡指数(AI) | 第28页 |
| 5 统计学方法 | 第28-29页 |
| 结果 | 第29-40页 |
| 1 转染效率检测 | 第29页 |
| 2 miR-27a可促进心肌细胞的凋亡 | 第29-31页 |
| 2.1 miR-27a mimics转染浓度越高，miR-27a表达量越高，呈浓度依赖性 | 第29-30页 |
| 2.2 TUNEL结果表明，转染miR-27a mimics的心肌细胞凋亡明显增加，且呈浓度依赖性 | 第30-31页 |
| 3 miR-27a介导了高糖状态下心肌细胞的凋亡 | 第31-38页 |
| 3.1 高糖刺激miR-27a表达升高，转染miR-27a mimics可使miR-27a表达升高，转染miR-27a inhibitor可使miR-27a表达降低 | 第31-32页 |
| 3.2 TUNEL结果表明，高糖促进心肌细胞凋亡，过表达miR-27a使细胞凋亡增加，抑制miR-27a表达使细胞凋亡减少 | 第32-34页 |
| 3.3 Western Blotting检测凋亡相关蛋白表达结果 | 第34-38页 |
| 3.3.1 过表达miR-27a，促凋亡蛋白caspase-3、Bax、Apaf-1 表达增加；抑制miR-27a的表达，则促凋亡蛋白表达减少 | 第34-36页 |
| 3.3.2 过表达miR-27a，抑凋亡蛋白c IAP-1、Bcl-2 表达减少；抑制miR-27a的表达，则cIAP-1、Bcl-2 表达增加 | 第36-38页 |
| 4 miR-27a介导GLP-1 改善高糖状态下心肌细胞的凋亡 | 第38-40页 |
| 4.1 GLP-1 可抑制高糖培养的心肌细胞miR-27a的表达 | 第38页 |
| 4.2 TUNEL结果表明，GLP-1 可通过抑制miR-27a的表达改善心肌细胞凋亡 | 第38-40页 |
| 讨论 | 第40-51页 |
| 1 糖尿病心肌病概述 | 第41-42页 |
| 2 GLP-1 与心肌细胞凋亡 | 第42-44页 |
| 2.1 GLP-1 概述 | 第42页 |
| 2.2 GLP-1 的心血管保护作用 | 第42-43页 |
| 2.3 GLP-1 抑制心肌细胞凋亡的作用机制 | 第43-44页 |
| 3 miRNAs与心肌细胞凋亡 | 第44-46页 |
| 3.1 miRNAs概述 | 第44-45页 |
| 3.2 miR-27a与心血管疾病 | 第45-46页 |
| 3.3 miR-27a与心肌细胞凋亡 | 第46页 |
| 4 caspase家族与细胞凋亡 | 第46-51页 |
| 4.1 caspase家族简述 | 第46-47页 |
| 4.2 caspase诱导凋亡的机制 | 第47-48页 |
| 4.2.1 死亡受体通路 | 第47页 |
| 4.2.2 线粒体通路 | 第47-48页 |
| 4.2.3 内质网通路 | 第48页 |
| 4.3 caspase-3 在心肌细胞凋亡中的作用 | 第48页 |
| 4.4 caspase家族与其他凋亡调控基因 | 第48-51页 |
| 4.4.1 Bcl-2 家族 | 第48-49页 |
| 4.4.2 凋亡抑制因子 | 第49-51页 |
| 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-60页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第60-61页 |
| 综述 细胞凋亡的研究进展 | 第61-71页 |
| 综述参考文献 | 第67-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 个人简历 | 第72页 |
