| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 英文缩写词 | 第7-11页 |
| 1 前言 | 第11-19页 |
| 1.1 伏马菌素简介 | 第11-12页 |
| 1.2 伏马菌素B_1的毒性 | 第12-15页 |
| 1.2.1 神经毒性 | 第12-13页 |
| 1.2.2 对动物内部器官的毒性 | 第13页 |
| 1.2.3 免疫毒性 | 第13-14页 |
| 1.2.4 生殖毒性 | 第14页 |
| 1.2.5 植物毒性 | 第14-15页 |
| 1.2.6 昆虫毒性 | 第15页 |
| 1.3 伏马菌素B_1的作用机理 | 第15-17页 |
| 1.3.1 伏马菌素对鞘脂类新陈代谢的损害 | 第15-16页 |
| 1.3.2 伏马菌素对氧化应激的影响 | 第16页 |
| 1.3.3 抑制线粒体中复合物I的合成 | 第16-17页 |
| 1.3.4 非遗传毒性机制 | 第17页 |
| 1.4 昆虫离体细胞在药物毒性研究中的意义 | 第17-18页 |
| 1.5 选题意义和研究内容 | 第18-19页 |
| 2 材料和方法 | 第19-27页 |
| 2.1 供试药剂 | 第19页 |
| 2.2 供试生物 | 第19页 |
| 2.3 供试试剂 | 第19页 |
| 2.4 供试耗材及仪器设备 | 第19-20页 |
| 2.5 溶液的配置 | 第20-21页 |
| 2.6 试验方法 | 第21-27页 |
| 2.6.1 细胞培养及保存 | 第21页 |
| 2.6.2 细胞增殖试验 | 第21页 |
| 2.6.3 倒置相差显微镜检测观察FB_1对Sf9细胞形态的影响 | 第21-22页 |
| 2.6.4 伏马菌素B_1对Sf9细胞膜电位的影响 | 第22页 |
| 2.6.5 伏马菌素B_1对Sf9细胞周期的影响 | 第22页 |
| 2.6.6 伏马菌素B_1对Sf9细胞的线粒体膜电位变化 | 第22-23页 |
| 2.6.7 伏马菌素B_1对Sf9细胞的凋亡率 | 第23页 |
| 2.6.8 伏马菌素B_1处理Sf9细胞后差异表达基因分析 | 第23-26页 |
| 2.6.8.1 总RNA提取 | 第23-24页 |
| 2.6.8.2 mRNA的纯化、cDNA的合成、文库构建和测序 | 第24页 |
| 2.6.8.3 高通量测序数据处理方法 | 第24-26页 |
| 2.6.8.4 荧光实时定量PCR | 第26页 |
| 2.6.9 数据处理 | 第26-27页 |
| 3 结果与分析 | 第27-46页 |
| 3.1 FB_1对Sf9细胞增殖的抑制作用 | 第27页 |
| 3.2 FB_1对Sf9细胞形态的影响 | 第27-28页 |
| 3.3 伏马菌素B_1引起Sf9细胞膜电位去极化 | 第28-30页 |
| 3.4 FB_1引起Sf9细胞G2/M期的阻滞 | 第30-31页 |
| 3.5 伏马菌素B_1引起Sf9细胞线粒体膜电位超极化 | 第31-32页 |
| 3.6 Annexin V/PI双染法测定Sf9细胞的凋亡率 | 第32-34页 |
| 3.7 伏马菌素B_1处理Sf9细胞后差异表达基因分析 | 第34-44页 |
| 3.7.1 RNA的提取及质量检测 | 第34页 |
| 3.7.2 伏马菌素B_1处理Sf9细胞后表达基因的GO分类分析 | 第34-35页 |
| 3.7.3 差异表达基因 | 第35-36页 |
| 3.7.4 差异表达基因的GO富集分析 | 第36-40页 |
| 3.7.5 KEGG信号通路结果分析 | 第40-44页 |
| 3.8 荧光定量PCR验证差异表达基因 | 第44-46页 |
| 4 讨论和结论 | 第46-51页 |
| 4.1 讨论 | 第46-50页 |
| 4.1.1 FB_1对Sf9细胞分裂周期与细胞增殖生长的影响 | 第46页 |
| 4.1.2 FB_1对Sf9细胞膜系统的影响 | 第46-47页 |
| 4.1.3 FB_1处理后诱导Sf9细胞内的相关差异表达基因分析 | 第47-50页 |
| 4.1.3.1 药物代谢相关基因和代谢通路 | 第47页 |
| 4.1.3.2 生长发育相关基因及代谢通路 | 第47-48页 |
| 4.1.3.3 免疫相关基因及代谢通路 | 第48-49页 |
| 4.1.3.4 凋亡相关基因及代谢通路 | 第49页 |
| 4.1.3.5 其他代谢相关基因及代谢通路 | 第49-50页 |
| 4.2 结论 | 第50页 |
| 4.3 本文有待研究内容 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 附录 硕士期间科研及奖励情况 | 第58页 |
