| 英文缩略词 | 第1-9页 |
| 中文论著摘要 | 第9-12页 |
| 英文论著摘要 | 第12-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-78页 |
| 1 卵巢恶性肿瘤概述 | 第15-40页 |
| ·卵巢恶性肿瘤流行病及病因学 | 第15-21页 |
| ·发病率 | 第15-16页 |
| ·卵巢癌的高危因素 | 第16-21页 |
| ·生殖因素 | 第16-21页 |
| ·月经状况与卵巢癌 | 第16页 |
| ·孕产次与卵巢癌 | 第16-17页 |
| ·不孕症与卵巢癌 | 第17页 |
| ·诱导排卵与卵巢癌 | 第17-18页 |
| ·口服避孕药与卵巢癌 | 第18页 |
| ·癌家族史 | 第18页 |
| ·子宫切除术及输卵管绝育术 | 第18-19页 |
| ·不合理膳食 | 第19-20页 |
| ·性激素与卵巢癌 | 第20-21页 |
| ·卵巢恶性肿瘤分子病理 | 第21-40页 |
| ·癌基因 | 第21-25页 |
| ·Her-2/neu 基因 | 第21-22页 |
| ·ras 基因 | 第22-24页 |
| ·EGFR | 第24-25页 |
| ·抑癌基因 | 第25-32页 |
| ·p53 抑癌基因 | 第25-26页 |
| ·P16 抑癌基因 | 第26-28页 |
| ·BRCA1与BRCA2基因 | 第28-29页 |
| ·PTEN | 第29-31页 |
| ·nm23 基因 | 第31-32页 |
| ·生长因子与卵巢癌 | 第32-40页 |
| ·表皮生长因子（EGF）与卵巢癌 | 第33页 |
| ·转化生长因子β与卵巢癌 | 第33-35页 |
| ·胰岛素样生长因子与卵巢癌 | 第35-36页 |
| ·血管内皮生长因子与卵巢癌 | 第36-40页 |
| 2 OPCML 基因概述 | 第40-46页 |
| ·OPCML的结构与功能 | 第40-41页 |
| ·OPCML在常见肿瘤中的表达 | 第41-43页 |
| ·OPCML 在卵巢癌中的表达 | 第41-42页 |
| ·OPCML 在宫颈癌中的表达 | 第42页 |
| ·OPCML 在肝细胞癌中的表达 | 第42-43页 |
| ·OPCML 与其他肿瘤 | 第43页 |
| ·OPCML 基因的抗肿瘤机制 | 第43-46页 |
| ·OPCML 与肿瘤的防治 | 第46页 |
| 3 昆虫杆状病毒概述 | 第46-63页 |
| ·杆状病毒的分类 | 第47页 |
| ·杆状病毒基因组的结构和功能研究 | 第47-48页 |
| ·杆状病毒的生活周期 | 第48-50页 |
| ·重组杆状病毒系统的构建 | 第50-52页 |
| ·昆虫细胞系的组织来源 | 第52-53页 |
| ·昆虫杆状病毒载体表达系统的特点 | 第53-57页 |
| ·昆虫杆状病毒载体表达系统优点 | 第53-55页 |
| ·昆虫杆状病毒载体表达系统缺点 | 第55-57页 |
| ·昆虫细胞系统和培养基 | 第57-58页 |
| ·宿主细胞工程 | 第58-59页 |
| ·宿主细胞的继代效率 | 第59页 |
| ·表达蛋白质高效纯化方法的进步 | 第59-63页 |
| ·用于纯化的新tag 的发展 | 第59-60页 |
| ·通过BEVS 获得膜蛋白 | 第60页 |
| ·抑制蛋白降解提高重组蛋白表达水平 | 第60-61页 |
| ·利用活体昆虫进行目的基因的表达 | 第61-63页 |
| 综述参考文献 | 第63-78页 |
| 第二章 OPCML 基因在杆状病毒—昆虫系统中的表达及其初步活性研究 | 第78-120页 |
| 第一部分 OPCML 基因全长扩增和携带其基因的真核表达载体的构建 | 第78-100页 |
| 1 前言 | 第78页 |
| 2 材料与方法 | 第78-89页 |
| ·材料 | 第78-81页 |
| ·组织来源 | 第78-79页 |
| ·主要试剂 | 第79-80页 |
| ·仪器 | 第80页 |
| ·用具处理 | 第80-81页 |
| ·OPCML基因的引物设计 | 第81页 |
| ·感受态的制备 | 第81页 |
| ·实验方法 | 第81-89页 |
| ·OPCML杆状病毒表达系统的构建 | 第81-89页 |
| ·目的基因OPCML 克隆 | 第81-86页 |
| ·小鼠脑组织总RNA 的提取 | 第81-83页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第83-84页 |
| ·PCR 扩增OPCML 基因片段 | 第84-85页 |
| ·OPCML 的纯化与回收 | 第85-86页 |
| ·连接片段与载体的准备 | 第86页 |
| ·OPCML 与PACGp67A 的连接 | 第86-87页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌DH5α | 第87页 |
| ·挑选阳性克隆 | 第87-88页 |
| ·质粒DNA 的提取 | 第88页 |
| ·重组质粒双酶切法鉴定 | 第88-89页 |
| ·重组质粒的测序 | 第89页 |
| ·测序结果的序列分析 | 第89页 |
| 3 结果 | 第89-97页 |
| ·OPCML 基因的克隆 | 第89-90页 |
| ·重组OPCML-PACGp67A 的筛选及鉴定 | 第90-91页 |
| ·OPCML 全长测序结果及BLAST 比对结果 | 第91-97页 |
| 4. 讨论 | 第97-100页 |
| 第二部分 OPCML蛋白在SF9昆虫细胞中的表达、纯化及其活性研究 | 第100-120页 |
| 1 前言 | 第100-101页 |
| 2 材料与方法 | 第101-112页 |
| ·材料 | 第101-103页 |
| ·仪器 | 第103页 |
| ·方法 | 第103-112页 |
| ·SF9 细胞的培养 | 第103-104页 |
| ·重组 OPCML-PACGp67A 质粒染昆虫细胞 | 第104-105页 |
| ·重组杆状病毒的收获、滴度测定 | 第105-107页 |
| ·OPCML蛋白质的初步纯化 | 第107页 |
| ·SDS-PAGE和Western-blotting检测OPCML蛋白的表达 | 第107-112页 |
| 3 结果 | 第112-116页 |
| ·SF9 细胞病变 | 第112页 |
| ·重组杆状病毒的收获、滴度测定 | 第112-113页 |
| ·OPCML蛋白纯化 | 第113页 |
| ·BCA法测定蛋白浓度 | 第113-114页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE和Western-blot检测 | 第114-116页 |
| 4 讨论 | 第116-120页 |
| 第三章 OPCML蛋白对卵巢癌A2780细胞生物学功能影响的检测 | 第120-133页 |
| 1 前言 | 第120-121页 |
| 2 材料与方法 | 第121-125页 |
| ·材料 | 第121-123页 |
| ·质粒与细胞 | 第121页 |
| ·主要试剂 | 第121页 |
| ·试剂的配制 | 第121-122页 |
| ·仪器 | 第122-123页 |
| ·实验方法 | 第123-125页 |
| ·卵巢癌 A2780 细胞的复苏和培养 | 第123页 |
| ·细胞增殖实验 | 第123-124页 |
| ·细胞粘附实验 | 第124页 |
| ·流式细胞术测定细胞周期 | 第124-125页 |
| ·统计学处理 | 第125页 |
| 3 结果 | 第125-129页 |
| ·倒置显微镜下观察 | 第125-126页 |
| ·细胞的增殖实验 | 第126-127页 |
| ·细胞粘附实验 | 第127-128页 |
| ·流式细胞术测定细胞周期 | 第128-129页 |
| 4 讨论 | 第129-133页 |
| 论文参考文献 | 第133-137页 |
| 致谢 | 第137页 |
