摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
缩略词表 | 第11-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-23页 |
1.1 肝再生的研究进展 | 第13-17页 |
1.1.1 肝脏的结构和功能 | 第13页 |
1.1.2 肝再生的概念 | 第13-14页 |
1.1.3 肝再生模型的建立 | 第14页 |
1.1.4 肝再生的进程及其调控 | 第14-17页 |
1.2 磷脂酶Cγ2(PLCG2)的研究进展 | 第17-19页 |
1.2.1 磷脂酶Cγ2(PLCG2)的结构 | 第17-19页 |
1.2.2 PLCγ2 的生物学功能 | 第19页 |
1.3 siRNA的研究进展 | 第19-21页 |
1.3.1 siRNAs的生物合成 | 第19-21页 |
1.3.2 siRNAs的功能 | 第21页 |
1.4 研究目的和意义 | 第21页 |
1.5 研究内容 | 第21-23页 |
第二章 从转录组水平解析PLCG2在大鼠肝再生中调节细胞增殖的途径和方式 | 第23-36页 |
2.1 材料与方法 | 第24-27页 |
2.1.1 大鼠肝再生模型制备 | 第24页 |
2.1.2 大鼠肝细胞的分离 | 第24-25页 |
2.1.3 Rat Genome 2302.0 芯片检测及数据整理 | 第25页 |
2.1.4 有意义表达基因和肝再生相关基因的确认 | 第25-26页 |
2.1.5 PLCG2调控细胞增殖相关信号通路和生理活动及其相关基因的确认 | 第26页 |
2.1.6 信号传导活动与细胞增殖活动的相关性分析 | 第26-27页 |
2.2 结果与分析 | 第27-32页 |
2.2.1 芯片结果的可靠性分析 | 第27页 |
2.2.2 PLCG2信号通路相关基因的表达变化 | 第27-29页 |
2.2.3 PLCG2信号通路调控细胞增殖的相关基因表达变化 | 第29-31页 |
2.2.4 大鼠肝再生中细胞增殖信号通路的信号传导活动与细胞增殖活动的相关性192.3 讨论 | 第31-32页 |
2.3 讨论 | 第32-36页 |
第三章 PLCG2对大鼠肝细胞株BRL-3A的作用研究 | 第36-52页 |
3.1 材料与方法 | 第37-45页 |
3.1.1 主要耗材及仪器 | 第37页 |
3.1.2 主要试剂及配制 | 第37-41页 |
3.1.3 实验用细胞系 | 第41页 |
3.1.4 小RNA的设计与合成 | 第41-42页 |
3.1.5 大鼠正常肝细胞BRL-3A的培养 | 第42页 |
3.1.6 小RNA的转染 | 第42页 |
3.1.7 总RNA提取 | 第42-43页 |
3.1.8 实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR) | 第43-44页 |
3.1.9 MTT法检测细胞活力 | 第44页 |
3.1.10 BrdU标记法检测细胞增殖 | 第44-45页 |
3.1.11 流式细胞术(Flow-Cytometry)检测细胞周期 | 第45页 |
3.1.12 蛋白免疫印迹(Western Blot)验证 | 第45页 |
3.1.13 统计学分析 | 第45页 |
3.2 结果 | 第45-50页 |
3.2.1 有效PLCG2 siRNA的筛选 | 第45-46页 |
3.2.2 siRNA对BRL-3A细胞活力及细胞增殖的影响 | 第46-47页 |
3.2.3 siRNAs对BRL-3A细胞中目的基因/蛋白表达的影响 | 第47-48页 |
3.2.4 PLCG2调控BRL-3A细胞增殖的途径和方式 | 第48-50页 |
3.3 讨论 | 第50-52页 |
参考文献 | 第52-63页 |
结论 | 第63-64页 |
攻读硕士学位期间参加的科研项目和发表的论文 | 第64-65页 |
致谢 | 第65-66页 |