| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 文献综述 | 第11-17页 |
| 1.1 类胰岛素生长因子的研究进展 | 第11-12页 |
| 1.2 IGF-I在鱼类中的研究进展 | 第12-13页 |
| 1.2.1 IGF-I在硬骨鱼中的情况 | 第12页 |
| 1.2.2 IGF-I在非硬骨鱼中的研究情况 | 第12-13页 |
| 1.3 IGF-I的基因结构和同源性比较 | 第13-14页 |
| 1.3.1 IGF-I基因和分子结构 | 第13页 |
| 1.3.2 IGF-I的同源性比较 | 第13-14页 |
| 1.4 IGF-I的调控和生理作用 | 第14-15页 |
| 1.4.1 IGF-I含量的调控 | 第14页 |
| 1.4.2 IGF-I的生理作用 | 第14-15页 |
| 1.5 本文研究的目的与意义 | 第15-17页 |
| 2. 军曹鱼类胰岛素生长因子-I（IGF-I）cDNA克隆及序列分析 | 第17-31页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-19页 |
| 2.1.1 动物材料 | 第17页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第17页 |
| 2.1.3 菌株和质粒 | 第17-18页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第18页 |
| 2.1.5 溶液及其配置方法 | 第18页 |
| 2.1.6 培养基及其配置方法 | 第18-19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-23页 |
| 2.2.1 军曹鱼IGF-I基因cDNA的获得 | 第19-20页 |
| 2.2.2 引物设计和PCR扩增cDNA | 第20页 |
| 2.2.3 PCR产物的回收和纯化 | 第20-21页 |
| 2.2.4 T载体连接转化及筛选阳性克隆 | 第21-22页 |
| 2.2.5 IGF-I序列测定及分析 | 第22页 |
| 2.2.6 设计荧光定量引物 | 第22页 |
| 2.2.7 各组织cDNA模板的制备 | 第22-23页 |
| 2.2.8 荧光定量PCR | 第23页 |
| 2.3 结果 | 第23-29页 |
| 2.3.1 军曹鱼类胰岛素生长因子-I基因的克隆 | 第23-24页 |
| 2.3.2 军曹鱼类胰岛素生长因子-I基因序列分析 | 第24-25页 |
| 2.3.3 军曹鱼类胰岛素生长因子-I氨基酸比对 | 第25-27页 |
| 2.3.4 军曹鱼类胰岛素生长因子-I基因系统树的构建 | 第27-28页 |
| 2.3.5 IGF-I基因在军曹鱼各组织中的表达 | 第28-29页 |
| 2.4 讨论 | 第29-31页 |
| 3 军曹鱼类胰岛素生长因子-I的原核表达系统构建 | 第31-45页 |
| 3.1 实验材料 | 第31-35页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第31页 |
| 3.1.2 载体和菌株 | 第31页 |
| 3.1.3 仪器 | 第31页 |
| 3.1.4 溶液及其配制方法 | 第31-35页 |
| 3.2 试验方法 | 第35-40页 |
| 3.2.1 军曹鱼类胰岛素生长因子-I成熟肽的克隆 | 第35-36页 |
| 3.2.2 重组表达载体构建 | 第36-37页 |
| 3.2.3 重组质粒在表达菌株Rosetta（DE3）p Lys S中的诱导表达与检测 | 第37-40页 |
| 3.3 结果 | 第40-43页 |
| 3.3.1 军曹鱼IGF-I基因成熟肽的克隆 | 第40页 |
| 3.3.2 IGF-I-pET-21a重组质粒的构建 | 第40-42页 |
| 3.3.3 重组质粒在表达菌株Rosetta（DE3）p Lys S中的表达 | 第42页 |
| 3.3.4 IGF-I融合蛋白的western blot验证 | 第42-43页 |
| 3.3.5 包涵体复性的验证 | 第43页 |
| 3.4 讨论 | 第43-45页 |
| 4 军曹鱼进食不同糖水平饲料对IGF-I基因组织表达的影响 | 第45-50页 |
| 4.1 材料与方法 | 第45-46页 |
| 4.1.1 实验鱼及饲养管理 | 第45-46页 |
| 4.2 实验方法 | 第46-47页 |
| 4.2.1 取样 | 第46-47页 |
| 4.2.2 总RNA提取 | 第47页 |
| 4.2.3 引物设计 | 第47页 |
| 4.2.4 各组织cDNA模板的制备 | 第47页 |
| 4.2.5 荧光定量PCR | 第47页 |
| 4.3 结果 | 第47-48页 |
| 4.3.1 养殖数据结果 | 第47-48页 |
| 4.3.2 荧光定量数据结果 | 第48页 |
| 4.4 讨论 | 第48-50页 |
| 5 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 作者简介 | 第60-61页 |
| 导师简介 | 第61页 |
