| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 主要缩略词表 | 第6-9页 |
| 第1章 前言 | 第9-19页 |
| ·绿脓杆菌外毒素A研究进展 | 第9-10页 |
| ·绿脓杆菌外毒素A的结构分析 | 第10-11页 |
| ·重组绿脓杆菌外毒素A的构建表达和纯化 | 第11-12页 |
| ·绿脓杆菌外毒素A的作用机理 | 第12-14页 |
| ·蓝色荧光蛋白及绿色荧光蛋白的荧光共振能量转移 | 第14-15页 |
| ·绿脓杆菌外毒素A的应用进展 | 第15-17页 |
| ·本论文的目的和意义 | 第17-19页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第19-35页 |
| ·实验材料 | 第19-25页 |
| ·菌株和质粒 | 第19页 |
| ·分子生物学常用工具酶以及试剂盒 | 第19-20页 |
| ·常用生化试剂 | 第20-21页 |
| ·常用细胞培养试剂及细胞系 | 第21-22页 |
| ·常用细胞染色试剂和抗体 | 第22-23页 |
| ·实验用到的引物 | 第23-24页 |
| ·实验仪器和设备 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-35页 |
| ·菌种保存方法 | 第25页 |
| ·常用培养基的配制 | 第25页 |
| ·常用溶液及缓冲液的配制 | 第25-26页 |
| ·分子生物学常规操作 | 第26页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第26-27页 |
| ·SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第27-28页 |
| ·蛋白含量的测定 | 第28-29页 |
| ·蛋白表达载体的构建 | 第29页 |
| ·组氨酸镍柱再生 | 第29-31页 |
| ·融合蛋白表达和纯化 | 第31页 |
| ·HeLa细胞培养、传代和冻存 | 第31-32页 |
| ·HeLa细胞的毒素处理和检测 | 第32页 |
| ·BPG的胞内裂解结果Westernblotting | 第32-33页 |
| ·HeLa细胞的BPG处理和检测 | 第33-35页 |
| 第3章 荧光标记毒素蛋白的胞内转运和酶切动力学研究 | 第35-50页 |
| ·融合毒素蛋白的基因构建、表达和纯化 | 第35-38页 |
| ·PEA毒素序列的获得 | 第35-37页 |
| ·融合毒素的表达载体构建 | 第37-38页 |
| ·融合毒素的细菌表达和亲和纯化 | 第38页 |
| ·融合毒素蛋白关于细胞内化时间的探讨 | 第38-50页 |
| ·融合蛋白毒素在HeLa细胞内的示踪 | 第38-43页 |
| ·BPG在单个细胞中的酶切效率检测及定位 | 第43-48页 |
| ·BPG在细胞群体中被内化及酶切的探索 | 第48-50页 |
| 第4章 结果讨论 | 第50-54页 |
| ·pH酸化对PE毒素分子毒性作用增强的机理探究 | 第50-52页 |
| ·KDEL对PE毒素处理细胞的分子动力学影响 | 第52-53页 |
| ·类furin蛋白酶切割BPG蛋白的切割效率和亚细胞定位探究 | 第53-54页 |
| 第5章 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 附录 | 第59页 |
| 在校期间科研情况 | 第59页 |
| 个人简历 | 第59页 |
