| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 1 引言 | 第11-23页 |
| 1.1 心脏的发育 | 第11-13页 |
| 1.2 心脏发育过程中的转录因子 | 第13-16页 |
| 1.2.1 GATA家族 | 第13-14页 |
| 1.2.2 Tbx5 | 第14-15页 |
| 1.2.3 NKX2.5 | 第15页 |
| 1.2.4 eHand和dHand | 第15-16页 |
| 1.3 心肌肥大 | 第16-20页 |
| 1.3.1 心肌肥大的概述 | 第16页 |
| 1.3.2 心肌肥大的分类 | 第16-18页 |
| 1.3.3 介导病理心肌肥大的信号通路 | 第18-20页 |
| 1.4 G蛋白 | 第20-21页 |
| 1.5 本课题研究意义 | 第21-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-34页 |
| 2.1 材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.2 主要实验仪器和耗材 | 第24-25页 |
| 2.2 方法 | 第25-34页 |
| 2.2.1 引物设计与合成 | 第25-26页 |
| 2.2.2 细胞与组织的总RNA提取 | 第26-27页 |
| 2.2.3 PCR | 第27页 |
| 2.2.4 感受态细胞的制备 | 第27-28页 |
| 2.2.5 转化与菌落扩培 | 第28页 |
| 2.2.6 内毒素真核表达质粒的中量提取 | 第28-29页 |
| 2.2.7 细胞的培养和转染 | 第29页 |
| 2.2.8 荧光素酶报告系统分析 | 第29-30页 |
| 2.2.9 LacZ报告基因检测 | 第30页 |
| 2.2.10 异丙肾上腺素(ISO)刺激心肌肥大小鼠模型的制备 | 第30-31页 |
| 2.2.11 组织蛋白样品的提取与检测 | 第31页 |
| 2.2.12 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第31-32页 |
| 2.2.13 Western blot免疫印记 | 第32页 |
| 2.2.14 PVDF蛋白印迹膜再生 | 第32-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-45页 |
| 3.1 GEFT基因的结构分析与敲除小鼠基因型的鉴定 | 第34-35页 |
| 3.2 GEFT敲除小鼠在病理刺激下易于心肌肥大 | 第35-37页 |
| 3.3 病理刺激下GEFT敲除后Cdc42的表达被抑制 | 第37-39页 |
| 3.4 GEFT与心肌肥大相关因子的研究 | 第39-40页 |
| 3.5 GEFT对ANF-luc、BRE-luc、3TP-luc和p21-luc的转录活性分析 | 第40-45页 |
| 3.5.1 GEFT抑制肥大标志基因ANF-luc报告基因的转录活性 | 第41-42页 |
| 3.5.2 GEFT抑制细胞周期信号通路相关标志基因p21-luc报告基因的转录活性 | 第42-43页 |
| 3.5.3 GEFT抑制细胞分化相关标志基因BRE-luc报告基因的转录活性 | 第43-44页 |
| 3.5.4 GEFT抑制TGF-β 信号通路相关标志基因 3TP-luc报告基因的转录活性 | 第44-45页 |
| 4 讨论 | 第45-47页 |
| 结语 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 附录一 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54页 |
