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壳聚糖基生物材料对角膜上皮层及内皮层损伤修复作用的研究

中文摘要第1-8页
Abstract第8-18页
缩略语第18-20页
第一章 文献综述第20-45页
 1 角膜及角膜损伤治疗简介第21-27页
   ·角膜的基本结构第21-23页
     ·角膜上皮层第21页
     ·前弹力层第21-22页
     ·基质层第22页
     ·后弹力层第22页
     ·内皮层第22-23页
   ·眼表损伤及重建第23-25页
     ·结膜移植术第23-24页
     ·角膜缘移植术第24页
     ·角膜上皮成形术第24页
     ·羊膜移植术第24-25页
   ·角膜内皮盲及其治疗进展第25-27页
     ·无缝线,带后板层角膜的内皮细胞移植第26页
     ·无缝线,带后弹力膜的内皮细胞移植第26-27页
     ·体外培养角膜内皮细胞的移植第27页
 2 组织工程化角膜第27-45页
   ·组织工程学简介第27-28页
   ·组织工程角膜的研究进展第28-29页
   ·组织工程角膜的种子细胞第29-36页
     ·角膜上皮重建的种子细胞第30-33页
     ·角膜内皮移植的种子细胞第33-36页
   ·构建组织工程角膜的载体第36-44页
     ·明胶薄膜第36页
     ·羊膜第36-37页
     ·角膜基质片第37页
     ·胶原第37-38页
     ·透明质酸第38-39页
     ·甲壳素与壳聚糖第39-42页
     ·以后弹力膜为载体行培养的内皮细胞移植第42-44页
   ·展望第44-45页
第二章 组织工程化角膜细胞载体的制备及其性质研究第45-84页
 第一节 羟乙基壳聚糖的制备及其性质研究第45-61页
  1 材料与方法第45-54页
   ·材料与仪器第45-46页
     ·实验材料与试剂第45-46页
     ·主要仪器第46页
   ·HECTS 的制备与纯化第46-47页
     ·壳聚糖的纯化第46-47页
     ·羟乙基壳聚糖的制备及纯化第47页
   ·FTIR 结构表征第47页
   ·取代度的测定第47页
   ·HECTS 质量指标的测定第47-50页
     ·分子量的测定第47-48页
     ·旋转黏度的测定第48页
     ·水分的测定第48页
     ·灰分的测定第48-49页
     ·重金属的测定第49-50页
     ·蛋白质含量测定第50页
   ·HECTS 的细胞毒性第50-52页
     ·溶液的配置第50-51页
     ·毒性评价方法第51-52页
   ·HECTS 对兔角膜上皮及内皮细胞生长的影响第52-54页
     ·兔角膜上皮及内皮细胞的体外培养第52-53页
     ·HECTS 对兔角膜上皮细胞生长的影响第53页
     ·HECTS 对兔角膜内皮细胞生长的影响第53页
     ·统计学分析第53-54页
  2 实验结果第54-59页
   ·HECTS 的制备第54页
   ·HECTS 的FTIR 表征第54-55页
   ·取代度的测定第55-56页
   ·HECTS 性质指标第56页
   ·HECTS 细胞毒性第56-58页
   ·HECTS 对角膜上皮和内皮细胞生长的影响第58-59页
  3 讨论第59-60页
  4 本节小结第60-61页
 第二节 羟乙基壳聚糖共混膜的制备及其性质研究第61-84页
  1 材料与方法第61-69页
   ·实验材料与试剂第61-62页
   ·主要仪器第62页
   ·HECTS 共混膜的制备及无菌处理第62-63页
   ·共混膜的理化性质的测定第63-64页
     ·膜片的透光率第63页
     ·膜片的含水量第63页
     ·离子通透性的测定第63页
     ·膜片对葡萄糖通透性的测定第63-64页
   ·共混膜的细胞毒性评价第64-65页
   ·兔角膜基质细胞与HECTS 共混膜的相容性评价第65-66页
     ·兔角膜基质细胞的体外培养第65页
     ·兔角膜基质细胞培养于共混膜上第65页
     ·荧光显微观察基质细胞在膜片上生长的状态第65-66页
   ·兔角膜内皮细胞与HECTS 共混膜的相容性评价第66页
     ·兔角膜内皮细胞的体外培养第66页
     ·兔角膜内皮细胞培养于共混膜上第66页
     ·内皮细胞在膜片上生长的超微结构观察第66页
   ·HECTS 共混膜的体外酶解第66页
   ·HECTS 共混膜的体内降解性及组织相容性评价第66-67页
   ·HECTS 共混膜在兔眼前房内的降解性及生物相容性评价第67-69页
     ·手术方法第67-68页
     ·术后处理及常规观察第68页
     ·组织切片观察第68-69页
   ·统计学分析第69页
  2 实验结果第69-81页
   ·共混膜的理化性质第69-72页
     ·膜片的透光率第69-70页
     ·膜片的含水量和离子通透性第70-71页
     ·膜片对葡萄糖的通透性第71-72页
   ·共混膜的细胞毒性第72页
   ·HECTS 共混膜与兔角膜基质细胞的相容性第72-74页
     ·基质细胞在共混膜上的生长状态第72-73页
     ·基质细胞在共混膜上的荧光染色观察第73-74页
   ·HECTS 共混膜与兔角膜内皮细胞的相容性第74-78页
     ·角膜内皮细胞的体外培养第74-75页
     ·角膜内皮细胞在膜上的显微观察第75-77页
     ·角膜内皮细胞在共混膜上超微结构观察第77-78页
   ·HECTS 共混膜的体外酶解第78页
   ·HECTS 共混膜的体内降解性及组织相容性第78-80页
   ·HECTS 共混膜在兔眼前房内的降解性第80-81页
     ·共混膜片植入兔眼前房后术眼的常规性观察第80-81页
     ·共混膜片植入兔眼前房后术眼的组织学观察第81页
  3 讨论第81-82页
  4 本节小结第82-84页
第三章 组织工程化壳聚糖基膜片对角膜上皮机械损伤修复的研究第84-96页
 1 材料与方法第84-88页
   ·实验材料第84-85页
   ·主要仪器第85页
   ·兔角膜上皮细胞的体外培养第85页
   ·角膜上皮细胞在HECTS-1 共混膜上培养第85-86页
     ·HECTS 共混膜的制备及无菌处理第85-86页
     ·角膜上皮细胞接种于HECTS-1 共混膜上第86页
     ·角膜上皮细胞在膜上的显微观察第86页
     ·角膜上皮细胞在膜上的荧光显微镜观察第86页
   ·载细胞膜片修复机械损伤角膜上皮层第86-88页
     ·实验动物第86页
     ·手术方案第86-87页
     ·术后护理及裂隙灯观察第87页
     ·角膜上皮层的扫描电镜及组织切片观察第87-88页
 2 实验结果第88-93页
   ·兔角膜上皮细胞的原代和传代培养第88-89页
   ·HECTS-1 共混膜上培养的角膜上皮细胞的观察第89-90页
   ·载角膜上皮细胞的HECTS-1 膜片对角膜上皮层机械损伤的修复第90-93页
     ·术后损伤区的荧光染色观察第90-92页
     ·术后损伤区面积的比较第92页
     ·组织切片观察第92-93页
     ·修复后的角膜上皮扫描电镜观察第93页
 3 讨论第93-94页
 4 本章小结第94-96页
第四章 多糖水凝胶固定角膜内皮细胞行角膜内皮层原位诱导修复的研究第96-119页
 第一节 水凝胶的生物学性质研究第96-108页
  1 材料与方法第96-101页
   ·主要原料与试剂第96-97页
   ·主要仪器和设备第97页
   ·多糖水凝胶热源的测定第97-98页
     ·供试品准备第97-98页
     ·实验过程第98页
   ·HC 的细胞毒性评价第98页
   ·HC 对于角膜内皮细胞生长的影响第98-99页
     ·兔角膜内皮细胞的培养第98页
     ·HC 对兔角膜内皮细胞生长的影响第98-99页
   ·HC 的皮内反应试验第99-100页
     ·动物准备第99页
     ·皮内注射第99页
     ·动物观察第99-100页
     ·结果评价第100页
   ·HC 体内降解性与生物相容性评价第100-101页
  2 实验结果第101-106页
   ·多糖水凝胶内毒素检测第101页
   ·HC 的细胞毒性评价第101页
   ·HC 凝胶浸提液对角膜内皮细胞生长的影响第101-103页
   ·HC 的皮内刺激试验第103-104页
   ·肌肉内降解性与生物相容性评价第104-106页
  3 讨论第106页
  4 本节小结第106-108页
 第二节 多糖水凝胶固定角膜内皮细胞对角膜内皮层原位诱导修复研究第108-119页
  1 实验材料与方法第108-110页
   ·实验材料和试剂第108页
   ·兔眼前房内HC 的降解性与生物相容性评价第108-109页
     ·实验动物第108页
     ·手术方案第108-109页
     ·术后护理第109页
     ·术后观察第109页
     ·组织切片观察第109页
   ·原位形成水凝胶对角膜内皮层的原位修复第109-110页
     ·兔角膜内皮细胞的体外培养第109页
     ·内皮层的原位修复实验第109-110页
  2 实验结果第110-116页
   ·HC 于兔眼前房内的生物降解性与生物相容性评价第110-112页
     ·术后常规观察第110-111页
     ·组织切片观察第111-112页
   ·内皮层原位修复实验第112-116页
     ·术后外眼像观察第112-113页
     ·扫描电镜观察第113-114页
     ·组织学观察第114-115页
     ·裂隙灯观察第115-116页
  3 讨论第116-117页
  4 本节小结第117-119页
全文总结第119-121页
论文创新点及不足第121-122页
参考文献第122-136页
致谢第136-137页
个人简历第137-138页
博士期间发表的学术论文第138页

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