| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-23页 |
| ·食品防腐剂的研究进展及发展趋势 | 第11-13页 |
| ·食品防腐的研究进展及存在的问题 | 第11-12页 |
| ·天然防腐剂的研究进展 | 第12-13页 |
| ·防御素 | 第13-14页 |
| ·两种防御素的分子生物学特性及生物学功能 | 第14-16页 |
| ·人α-防御素5 的分子生物学特性及生物学功能 | 第14-15页 |
| ·人β-防御素3 的分子生物学特性及生物学功能 | 第15-16页 |
| ·防御素的基因工程研究 | 第16-19页 |
| ·防御素在大肠杆菌中的表达 | 第17-18页 |
| ·防御素基因在毕赤酵母中的表达 | 第18-19页 |
| ·两种防御素的研究现状 | 第19-20页 |
| ·人α-防御素5 的基因工程研究进展 | 第19页 |
| ·人β-防御素3 的基因工程研究进展 | 第19-20页 |
| ·立题依据 | 第20-21页 |
| ·主要研究内容和技术路线 | 第21-23页 |
| ·主要研究内容 | 第21-22页 |
| ·技术路线 | 第22-23页 |
| 第二章 重组人防御素真核表达载体的构建 | 第23-38页 |
| ·引言 | 第23页 |
| ·实验材料与设备 | 第23-28页 |
| ·主要仪器与设备 | 第23-24页 |
| ·质粒与菌株 | 第24-25页 |
| ·主要试剂与工具酶 | 第25-27页 |
| ·溶液与培养基 | 第27-28页 |
| ·实验方法 | 第28-33页 |
| ·人防御素基因的获得 | 第28页 |
| ·引物的设计与合成 | 第28-29页 |
| ·目的片段的扩增 | 第29页 |
| ·PCR产物纯化回收 | 第29-30页 |
| ·载体及产物双酶切 | 第30页 |
| ·酶切后目的产物的回收 | 第30-31页 |
| ·体外连接 | 第31页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞制备及转化 | 第31-32页 |
| ·重组子的筛选与鉴定 | 第32-33页 |
| ·实验结果与讨论 | 第33-37页 |
| ·人防御素基因的获得 | 第33-35页 |
| ·目的基因的扩增 | 第35页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第35-37页 |
| ·本章小结 | 第37-38页 |
| 第三章 重组人防御素毕赤酵母的构建与诱导表达 | 第38-53页 |
| ·引言 | 第38页 |
| ·实验材料与设备 | 第38-43页 |
| ·主要仪器与设备 | 第38-39页 |
| ·质粒与菌株 | 第39-40页 |
| ·主要试剂 | 第40页 |
| ·溶液与培养基 | 第40-43页 |
| ·实验方法 | 第43-48页 |
| ·重组质粒转化毕赤酵母宿主 | 第43-44页 |
| ·转化子表型的菌落PCR鉴定 | 第44-45页 |
| ·重组酵母的诱导表达 | 第45页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE电泳 | 第45-47页 |
| ·人防御素表达量的测定 | 第47-48页 |
| ·实验结果与讨论 | 第48-51页 |
| ·重组酵母菌构建 | 第48-49页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE电泳 | 第49-50页 |
| ·人防御素蛋白表达量的测定 | 第50-51页 |
| ·本章小结 | 第51-53页 |
| 第四章 重组人防御素理化性质研究 | 第53-65页 |
| ·引言 | 第53页 |
| ·实验材料与设备 | 第53-54页 |
| ·实验仪器与设备 | 第53-54页 |
| ·实验菌株 | 第54页 |
| ·培养基与溶液 | 第54页 |
| ·防御素 | 第54页 |
| ·实验方法 | 第54-56页 |
| ·重组人防御素抑菌效果检测 | 第54-55页 |
| ·重组人防御素最小抑菌浓度测定 | 第55页 |
| ·重组人防御素的温度敏感性测定 | 第55-56页 |
| ·重组人防御素的pH敏感性测定 | 第56页 |
| ·重组人防御素的盐浓度敏感性测定 | 第56页 |
| ·实验结果与讨论 | 第56-64页 |
| ·重组人防御素抑菌效果检测 | 第56-59页 |
| ·重组人防御素最小抑菌浓度的测定 | 第59-60页 |
| ·重组人防御素对温度的敏感性 | 第60-61页 |
| ·重组人防御素对pH的敏感性 | 第61-62页 |
| ·重组人防御素的盐浓度敏感性测定 | 第62-64页 |
| ·本章小结 | 第64-65页 |
| 第五章 重组人防御素在面包防腐中的应用与研究 | 第65-70页 |
| ·引言 | 第65页 |
| ·实验材料与设备 | 第65-66页 |
| ·实验设备 | 第65-66页 |
| ·实验材料 | 第66页 |
| ·实验方法 | 第66-67页 |
| ·白面包加工工艺 | 第66-67页 |
| ·人α-防御素5 前体蛋白和人β-防御素3 的添加 | 第67页 |
| ·实验结果与讨论 | 第67-69页 |
| ·本章小结 | 第69-70页 |
| 结论与展望 | 第70-73页 |
| 参考文献 | 第73-80页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 答辩委员会对论文的评定意见 | 第82页 |