| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-30页 |
| 1.1 马铃薯 | 第13-14页 |
| 1.2 马铃薯晚疫病 | 第14-16页 |
| 1.2.1 致病疫霉 | 第14页 |
| 1.2.2 致病疫霉侵染生活史 | 第14-16页 |
| 1.2.3 致病疫霉起源 | 第16页 |
| 1.3 植物与病原菌互作理论基础 | 第16-20页 |
| 1.3.1 基因对基因假说 | 第16页 |
| 1.3.2 警戒假说 | 第16-17页 |
| 1.3.3 诱饵假说和Zig-Zag理论 | 第17-20页 |
| 1.4 马铃薯抗晚疫病分子模式研究 | 第20-26页 |
| 1.4.1 胞外效应子激发免疫 | 第21-22页 |
| 1.4.2 Rpi-基因介导的RxLR型胞质效应子激发免疫 | 第22-26页 |
| 1.4.3 CRN类胞质效应子激发免疫 | 第26页 |
| 1.5 效应子组学 | 第26-29页 |
| 1.6 本研究的目的及内容 | 第29-30页 |
| 第二章 材料与方法 | 第30-45页 |
| 2.1 实验材料 | 第30-31页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第30页 |
| 2.1.2 载体及菌株 | 第30页 |
| 2.1.3 晚疫病病原菌 | 第30-31页 |
| 2.1.4 实验试剂 | 第31页 |
| 2.2 实验方法 | 第31-45页 |
| 2.2.1 P.infestans的效应子基因克隆及重组质粒构建 | 第31-34页 |
| 2.2.2 P.infestans的效应子分析 | 第34-36页 |
| 2.2.2.1 效应子筛选 | 第34页 |
| 2.2.2.2 PVX-agroinfection 分析 | 第34-35页 |
| 2.2.2.3 基于农押茜介导的基因瞬时表达分析(^Agroinfiltration assay) | 第35页 |
| 2.2.2.4 病毒介导的基因沉默分析 | 第35-36页 |
| 2.2.3 晚疫病病原菌接种鉴定 | 第36页 |
| 2.2.4 细胞死亡点统计及电导率测定 | 第36-37页 |
| 2.2.5 植物叶片总RNA提取及反转录 | 第37-39页 |
| 2.2.6 基因表达分析 | 第39-40页 |
| 2.2.7 基因亚细胞定位 | 第40页 |
| 2.2.8 Western blotting | 第40-41页 |
| 2.2.9 酵母双杂交 | 第41-43页 |
| 2.2.10 双分子荧光互补 | 第43-45页 |
| 第三章 结果与分析 | 第45-76页 |
| 3.1 候选无毒基因的筛选 | 第45-49页 |
| 3.1.1 候选无毒效应子及其对应Rpi基因的马铃薯材料 | 第45-49页 |
| 3.2 AVR2家族基因的功能分析 | 第49-53页 |
| 3.2.1 四个Rpi-R2同源基因克隆 | 第49-50页 |
| 3.2.2 Rpi-hjt1.1和Rpi-R2-like可以识别效应子Pi23008 | 第50页 |
| 3.2.3 AVR2家族基因高度多态性 | 第50-51页 |
| 3.2.4 Rpi-R2同源蛋白识别Ⅱ、Ⅲ类AVR2家族成员 | 第51-52页 |
| 3.2.5 细胞核输出信号结构域参与Rpi-R2同源蛋白对AVR2家族的识别 | 第52-53页 |
| 3.3 PI23008和PI13940的结构、功能及识别机制分析 | 第53-66页 |
| 3.3.1 Pi23008和Pi13940可以被Rpi-hjt1.1识别 | 第54-55页 |
| 3.3.2 马铃薯HJT349-3对不同晚疫病菌生理小种的抗性鉴定 | 第55-56页 |
| 3.3.3 Pi23008同源序列多态性及功能分析 | 第56-57页 |
| 3.3.4 Pi23008~(P95L,A98V)突变体逃避Rpi-hjt1.1识别 | 第57-58页 |
| 3.3.5 Pi13940~(K109M)突变体逃避Rpi-hjt1.1识别 | 第58-59页 |
| 3.3.6 Pi23008~(P95L,A98V)及Pi13940~(K109M)突变体逃避Rpi-hjt1.1识别机制 | 第59-61页 |
| 3.3.7 沉默StBSL1不影响Pi23008的识别,而干扰Pi13940的识别 | 第61-63页 |
| 3.3.8 Pi22724干扰Rpi-hjt1.1介导的HR表型 | 第63-65页 |
| 3.3.9 Pi22724促进P.infestans在本氏烟中生长 | 第65-66页 |
| 3.4 PI22798激发本氏烟草和普通烟草细胞死亡分子机理 | 第66-76页 |
| 3.4.1 Pi22798表达模式及其毒性功能 | 第67-68页 |
| 3.4.2 同源Pi22798蛋白序列高度保守且功能类似 | 第68-70页 |
| 3.4.3 40-165aa功能域能够激发细胞死亡 | 第70-71页 |
| 3.4.4 Pi22798定位于细胞核 | 第71页 |
| 3.4.5 Pi22798激发细胞死亡需要核定位信号域 | 第71-73页 |
| 3.4.6 Pi22798激发细胞死亡依赖于SGT1,而不是HSP90 | 第73-74页 |
| 3.4.7 AVR3b抑制Pi22798激发细胞死亡 | 第74-76页 |
| 第四章 讨论 | 第76-86页 |
| 4.1 无毒基因的分析途径 | 第76-77页 |
| 4.2 挖掘抗病基因可行策略 | 第77-78页 |
| 4.3 PVX-agroinfection和agroinfiltration分析方法的局限性 | 第78-79页 |
| 4.4 AVR2家族与Rpi-R2同源蛋白间的识别机制 | 第79-81页 |
| 4.5 Pi22724抑制Rpi-hjt1.1识别Pi23008可能机制 | 第81-82页 |
| 4.6 效应子Pi22798诱导细胞死亡机制 | 第82-84页 |
| 4.7 研究展望 | 第84-86页 |
| 参考文献 | 第86-103页 |
| 附录 | 第103-122页 |
| 附录一 供试马铃薯材料 | 第103-104页 |
| 附录二 本研究中RxLR效应子及功能基因引物 | 第104-108页 |
| 附录三 重要功能基因及效应子序列信息 | 第108-116页 |
| 附录四 培养基及试剂配方 | 第116-121页 |
| 附录五 攻读博士学位期间发表论文 | 第121-122页 |
| 致谢 | 第122-123页 |
