| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-20页 |
| 1.1 花青素的研究进展 | 第11-14页 |
| 1.1.1 植物花青素的基本结构及合成途径 | 第11-12页 |
| 1.1.2 花青素的生理活性 | 第12-13页 |
| 1.1.3 花青素在植物抵抗非生物胁迫中的作用 | 第13-14页 |
| 1.2 二氢黄酮醇-4-还原酶(DFR)的研究进展 | 第14-16页 |
| 1.2.1 DFR的结构和作用机制 | 第14-15页 |
| 1.2.2 DFR基因的表达特性 | 第15-16页 |
| 1.2.3 DFR与非生物胁迫的关系 | 第16页 |
| 1.3 唐古特白刺的研究进展 | 第16-18页 |
| 1.3.1 唐古特白刺的生态应用价值 | 第17页 |
| 1.3.2 唐古特白刺的化学成分 | 第17-18页 |
| 1.3.3 唐古特白刺抗逆生理及分子机制 | 第18页 |
| 1.4 研究目的、意义及技术路线 | 第18-20页 |
| 1.4.1 研究目的及意义 | 第18-19页 |
| 1.4.2 技术路线 | 第19-20页 |
| 第二章 NtDFR基因的克隆与生物信息学分析 | 第20-31页 |
| 2.1 实验材料 | 第20页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第20页 |
| 2.1.2 菌种和质粒 | 第20页 |
| 2.1.3 试剂与药品 | 第20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-26页 |
| 2.2.1 唐古特白刺幼苗培养 | 第20-21页 |
| 2.2.2 唐古特白刺总RNA提取 | 第21页 |
| 2.2.3 唐古特白刺cDNA第一链的合成 | 第21-22页 |
| 2.2.4 NtDFR基因全长克隆 | 第22-23页 |
| 2.2.4.1 NtDFR RACE PCR | 第22-23页 |
| 2.2.4.2 序列拼接 | 第23页 |
| 2.2.5 NtDFR生物信息学分析 | 第23页 |
| 2.2.6 NtDFR基因植物表达载体的构建及农杆菌转化 | 第23-26页 |
| 2.2.6.1 pPZP221-NtDFR植物表达载体的构建策略 | 第23-24页 |
| 2.2.6.2 NtDFR基因ORF的扩增 | 第24-25页 |
| 2.2.6.3 目的基因与pPZP221质粒的提取 | 第25页 |
| 2.2.6.4 目的基因与pPZP221质粒的双酶切 | 第25-26页 |
| 2.2.6.5 NtDFR基因与pPZP221植物表达载体的连接及转化 | 第26页 |
| 2.2.6.6 pPZP221-NtDFR重组载体转化农杆菌及阳性菌鉴定 | 第26页 |
| 2.3 结果与分析 | 第26-31页 |
| 2.3.1 NtDFR基因全长cDNA的克隆 | 第26-27页 |
| 2.3.2 NtDFR基因ORF的克隆 | 第27-30页 |
| 2.3.4 NtDFR真核表达载体的构建 | 第30-31页 |
| 第三章 NtDFR基因在拟南芥的功能分析 | 第31-42页 |
| 3.1 实验材料 | 第31页 |
| 3.2 实验方法 | 第31-33页 |
| 3.2.1 NtDFR转基因拟南芥的获得 | 第31-32页 |
| 3.2.1.1 Col-0拟南芥的培养及浸花序法侵染 | 第31页 |
| 3.2.1.2 NtDFR转基因拟南芥纯合体的筛选及分子生物学鉴定 | 第31-32页 |
| 3.2.2 NtDFR转基因拟南芥的培养及胁迫条件 | 第32页 |
| 3.2.3 NtDFR转基因拟南芥鲜重及叶绿素含量测定 | 第32页 |
| 3.2.4 花青素的提取及含量测定 | 第32-33页 |
| 3.2.5 几种抗氧化酶活性的测定 | 第33页 |
| 3.2.6 MDA和GSH含量测定 | 第33页 |
| 3.3 结果与分析 | 第33-42页 |
| 3.3.1 NtDFR基因在拟南芥中的功能鉴定 | 第33-34页 |
| 3.3.2 花青素标准曲线的建立 | 第34页 |
| 3.3.3 不同胁迫条件下NtDFR转基因拟南芥抗逆性分析 | 第34-40页 |
| 3.3.3.1 NtDFR增强拟南芥在UV-B胁迫下的耐受性 | 第34-36页 |
| 3.3.3.2 NtDFR增强拟南芥的抗干旱能力 | 第36-38页 |
| 3.3.3.3 NtDFR增强拟南芥的耐盐性 | 第38-40页 |
| 3.3.4 讨论 | 第40-42页 |
| 第四章 结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-48页 |
| 致谢 | 第48页 |
