摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
第一章 文献综述 | 第8-20页 |
1 油菜主要病毒的研究现状 | 第8-10页 |
1.1 芜菁花叶病毒 | 第8-9页 |
1.2 黄瓜花叶病毒 | 第9页 |
1.3 油菜花叶病毒 | 第9-10页 |
2 植物抗病毒病的分子机制研究 | 第10-15页 |
2.1 植物对病毒的天然抗性 | 第10-11页 |
2.2 病原物介导的抗性 | 第11页 |
2.3 基因沉默现象 | 第11-15页 |
2.3.1 转录后水平的基因沉默 | 第11-14页 |
2.3.2 基因沉默抑制因子 | 第14-15页 |
3 植物中的SGS基因 | 第15-16页 |
3.1 SGS3 基因的抗病毒研究 | 第15-16页 |
3.2 SGS3 基因的结构特点 | 第16页 |
4 转基因拟南芥研究概况 | 第16-18页 |
4.1 拟南芥遗传转化方法的发展 | 第17-18页 |
4.2 转基因拟南芥的筛选 | 第18页 |
5、基因沉默与生长发育 | 第18-19页 |
6、本研究的目的与意义 | 第19-20页 |
第二章 不同油菜品种中BnSGS3 的拷贝数测定 | 第20-30页 |
1 材料与方法 | 第20-27页 |
1.1 试验材料 | 第20-21页 |
1.1.1 植物材料 | 第20-21页 |
1.1.2 主要试剂 | 第21页 |
1.1.3 主要耗材及仪器设备 | 第21页 |
1.2 试验方法 | 第21-27页 |
1.2.1 油菜基因组DNA的大量提取 | 第21-22页 |
1.2.2 Southern blot杂交探针设计 | 第22页 |
1.2.3 PCR扩增得到待标记的杂交探针 | 第22-23页 |
1.2.4 Southern blot探针标记 | 第23页 |
1.2.5 标记探针效率检测 | 第23-24页 |
1.2.6 基因组DNA的限制性内切酶酶解和电泳分离 | 第24-25页 |
1.2.7 DNA转膜与固定(虹吸印记法) | 第25-26页 |
1.2.8 Southern blot杂交 | 第26页 |
1.2.9 免疫检测 | 第26-27页 |
2 结果与分析 | 第27-29页 |
2.1 探针标记效率检测分析 | 第27页 |
2.2 Southern blot鉴定 | 第27-29页 |
3 结论与讨论 | 第29-30页 |
第三章BnSGS3 基因遗传转化拟南芥及转基因植株病毒接种鉴定 | 第30-41页 |
1 材料与方法 | 第30-35页 |
1.1 材料 | 第30-31页 |
1.1.1 植物及毒源材料 | 第30页 |
1.1.2 质粒 | 第30页 |
1.1.3 农杆菌菌株 | 第30-31页 |
1.1.4 主要试剂 | 第31页 |
1.2 方法 | 第31-35页 |
1.2.1 农杆菌感受态的制备 | 第31页 |
1.2.2 质粒转化农杆菌 | 第31-32页 |
1.2.3 农杆菌阳性转化子PCR检测 | 第32页 |
1.2.4 拟南芥遗传转化 | 第32-33页 |
1.2.5 除草剂筛选T0 代转基因拟南芥 | 第33页 |
1.2.6 转基因拟南芥基因组DNA提取 | 第33页 |
1.2.7 转基因拟南芥 PCR 检测 | 第33页 |
1.2.8 拟南芥人工接种病毒方法 | 第33-34页 |
1.2.9 病害调查 | 第34页 |
1.2.10 数据统计 | 第34-35页 |
2 结果与分析 | 第35-40页 |
2.1 阳性农杆菌转化子的PCR检测分析 | 第35页 |
2.3 农杆菌转化拟南芥分析 | 第35-36页 |
2.4 转基因拟南芥筛选分析 | 第36-37页 |
2.5 转基因拟南芥PCR检测 | 第37页 |
2.6 转基因拟南芥人工接种病毒分析 | 第37-40页 |
3 结论与讨论 | 第40-41页 |
第四章BnSGS3 基因对植物生长发育和抗病性的影响 | 第41-49页 |
1 材料与方法 | 第41-43页 |
1.1 材料 | 第41页 |
1.2 方法 | 第41-43页 |
1.2.1 不同类型拟南芥植株生长差异对比 | 第41-42页 |
1.2.2 油菜BnSGS3-SI转基因植株真菌接种试验 | 第42-43页 |
1.2.2.1 菌种制备 | 第42页 |
1.2.2.2 离体叶片真菌接种方法 | 第42页 |
1.2.2.3 活体接种真菌方法 | 第42-43页 |
2 结果与分析 | 第43-48页 |
2.1 不同处理拟南芥植株生长差异对比分析 | 第43-44页 |
2.2 油菜BnSGS3-SI转基因植株真菌接种试验分析 | 第44-48页 |
3 结论与讨论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-53页 |
致谢 | 第53页 |