| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-23页 |
| 1.1 益生菌 | 第13-15页 |
| 1.1.1 益生菌概述 | 第13-14页 |
| 1.1.2 益生菌的选择标准 | 第14-15页 |
| 1.2 益生菌的降胆固醇作用 | 第15-21页 |
| 1.2.1 胆盐水解酶与降解胆固醇之间的关系 | 第15-16页 |
| 1.2.2 胆盐水解酶的来源 | 第16-18页 |
| 1.2.3 胆盐水解酶的活性位点 | 第18页 |
| 1.2.4 胆盐水解酶的功能和应用 | 第18-20页 |
| 1.2.5 胆盐水解酶的克隆和表达 | 第20-21页 |
| 1.3 本论文的立题依据及研究内容 | 第21-23页 |
| 第二章 乳杆菌益生特性的体外评价 | 第23-33页 |
| 2.1 前言 | 第23页 |
| 2.2 材料 | 第23-24页 |
| 2.2.1 菌株 | 第23-24页 |
| 2.2.2 主要药品、试剂和培养基 | 第24页 |
| 2.2.3 仪器 | 第24页 |
| 2.3 方法 | 第24-25页 |
| 2.3.1 菌株对酸的耐受性 | 第24页 |
| 2.3.2 菌株对胆盐的耐受性 | 第24页 |
| 2.3.3 菌株对胃肠液的耐受性 | 第24-25页 |
| 2.3.4 菌株降解胆固醇的能力 | 第25页 |
| 2.4 结果 | 第25-32页 |
| 2.4.1 乳杆菌对酸的耐受能力分析 | 第25-27页 |
| 2.4.2 各乳杆菌对胆盐的耐受能力 | 第27-29页 |
| 2.4.3 各菌株对胃肠液的耐受性 | 第29-30页 |
| 2.4.4 各乳杆菌降解胆固醇的能力评价 | 第30-32页 |
| 2.5 小结与讨论 | 第32-33页 |
| 第三章 植物乳杆菌培养条件的优化 | 第33-41页 |
| 3.1 前言 | 第33页 |
| 3.2 材料 | 第33-34页 |
| 3.2.1 菌株 | 第33-34页 |
| 3.2.2 主要药品、试剂和仪器 | 第34页 |
| 3.2.3 仪器 | 第34页 |
| 3.3 实验方法 | 第34-36页 |
| 3.3.1 初步探究半合成培养基的组分 | 第34页 |
| 3.3.2 氧气对植物乳杆菌生长情况的影响 | 第34-35页 |
| 3.3.3 正交试验设计 | 第35页 |
| 3.3.4 低聚果糖和低聚异麦芽糖对菌株生长的促进作用 | 第35-36页 |
| 3.4 结果 | 第36-39页 |
| 3.4.1 L.plantarum SDMCC050209在半合成培养基中的生长情况 | 第36-37页 |
| 3.4.2 氧气对L.plantarum SDMCC050209生长的影响 | 第37-38页 |
| 3.4.3 利用正交试验确定最佳的培养条件 | 第38-39页 |
| 3.4.4 低聚果糖和低聚异麦芽糖的促生长作用 | 第39页 |
| 3.5 小结与讨论 | 第39-41页 |
| 第四章 L.plantarum SDMCC050209胆盐水解酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达 | 第41-54页 |
| 4.1 前言 | 第41页 |
| 4.2 材料 | 第41-42页 |
| 4.2.1 菌株和质粒 | 第41页 |
| 4.2.2 主要药品、试剂和培养基 | 第41-42页 |
| 4.2.3 仪器 | 第42页 |
| 4.3 实验方法 | 第42-48页 |
| 4.3.1 L.plantarum SDMCC050209基因组的DNA的提取 | 第42-43页 |
| 4.3.2 Bsh相关基因的PCR扩增 | 第43页 |
| 4.3.3 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第43-44页 |
| 4.3.4 L.plantarum SDMCC050209 bsh1基因与pMD18-T载体的连接 | 第44页 |
| 4.3.5 连接产物转化感受态细胞 | 第44-45页 |
| 4.3.6 转化克隆的筛选和鉴定 | 第45页 |
| 4.3.7 表达重组质粒的构建 | 第45-46页 |
| 4.3.8 表达宿主菌的诱导表达和酶活测定 | 第46页 |
| 4.3.9 表达产物的SDS-PAGE鉴定 | 第46-47页 |
| 4.3.10 包涵体的提取和溶解 | 第47页 |
| 4.3.11 亲和层析法纯化包涵体 | 第47页 |
| 4.3.12 包涵体蛋白的柱上复性 | 第47页 |
| 4.3.13 重组蛋白逐级透析复性 | 第47页 |
| 4.3.14 重组蛋白的可溶表达 | 第47-48页 |
| 4.3.15 游离氨基酸法测定酶活 | 第48页 |
| 4.4 结果 | 第48-53页 |
| 4.4.1 基因组DNA的提取目的基因的扩增 | 第48-49页 |
| 4.4.2 bsh1基因的核苷酸序列分析 | 第49-50页 |
| 4.4.3 表达载体的构建 | 第50-51页 |
| 4.4.4 诱导表达产物的SDS-PAGE检验 | 第51-52页 |
| 4.4.5 金属螯合层析法纯化包涵体 | 第52页 |
| 4.4.6 重组蛋白的复性结果 | 第52-53页 |
| 4.5 小结与讨论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 附件 | 第64页 |
