| 摘要 | 第5-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 英文缩略表 | 第11-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-19页 |
| 1.1 病原学 | 第12-13页 |
| 1.1.1 分类 | 第12页 |
| 1.1.2 形态 | 第12页 |
| 1.1.3 病毒粒子的理化性质 | 第12-13页 |
| 1.2 BHV-1 分子生物学研究进展 | 第13页 |
| 1.2.1 BHV-1 基因组结构 | 第13页 |
| 1.2.2 编码蛋白 | 第13页 |
| 1.3 gE蛋白研究进展 | 第13-14页 |
| 1.4 VP8蛋白和gD蛋白研究进展 | 第14-15页 |
| 1.5 BHV-1 在细胞中的复制 | 第15页 |
| 1.6 流行病学 | 第15-16页 |
| 1.7 牛传染性鼻气管炎诊断 | 第16-18页 |
| 1.7.1 病毒的分离 | 第17页 |
| 1.7.2 电子显微镜观察 | 第17页 |
| 1.7.3 血清学试验 | 第17页 |
| 1.7.3.1 中和试验(VN) | 第17页 |
| 1.7.3.2 酶联免疫吸附试验（ELISA） | 第17页 |
| 1.7.4 PCR检测技术 | 第17-18页 |
| 1.8 牛传染性鼻气管炎的防控 | 第18页 |
| 1.9 目的和意义 | 第18-19页 |
| 第二章 牛传染性鼻气管炎病毒单克隆抗体的制备 | 第19-29页 |
| 2.1 材料与方法 | 第19-22页 |
| 2.1.1 病毒株、细胞、载体及实验动物 | 第19页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第19页 |
| 2.1.3 病毒培养及纯化 | 第19-20页 |
| 2.1.4 纯化病毒的电镜观察 | 第20页 |
| 2.1.5 病毒的灭活 | 第20页 |
| 2.1.6 单克隆抗体的制备 | 第20-21页 |
| 2.1.6.1 动物免疫 | 第20页 |
| 2.1.6.2 间接ELISA的建立 | 第20-21页 |
| 2.1.6.3 细胞融合及阳性杂交瘤细胞的筛选 | 第21页 |
| 2.1.7 单克隆抗体腹水的制备及效价测定 | 第21-22页 |
| 2.1.8 单克隆抗体生物学特性检测 | 第22页 |
| 2.1.8.1 MAb亚类的鉴定 | 第22页 |
| 2.1.8.2 MAb的间接免疫荧光(IFA)鉴定 | 第22页 |
| 2.1.8.3 MAb的western blot鉴定 | 第22页 |
| 2.2 结果 | 第22-27页 |
| 2.2.1 病毒纯化结果 | 第22-25页 |
| 2.2.1.1 PEG沉淀法纯化病毒 | 第22-23页 |
| 2.2.1.2 蔗糖垫或蔗糖密度梯度超速离心法纯化病毒 | 第23页 |
| 2.2.1.3 蔗糖垫与蔗糖密度梯度离心纯化病毒的比较 | 第23-25页 |
| 2.2.2 病毒的纯化效果 | 第25页 |
| 2.2.3 小鼠免疫 | 第25-26页 |
| 2.2.4 MAb亚类鉴定及腹水效价的测定 | 第26-27页 |
| 2.2.5 间接免疫荧光鉴定 | 第27页 |
| 2.2.6 MAb的western blot鉴定 | 第27页 |
| 2.3 讨论 | 第27-29页 |
| 第三章 牛传染性鼻气管炎病毒VP8蛋白表位鉴定 | 第29-35页 |
| 3.1 材料与方法 | 第29-30页 |
| 3.1.1 分泌BHV-1 的VP8蛋白MAb的杂交瘤细胞株及载体 | 第29页 |
| 3.1.2 主要试剂及设备 | 第29页 |
| 3.1.3 杂交瘤细胞的复苏 | 第29页 |
| 3.1.4 腹水的制备及效价的测定 | 第29-30页 |
| 3.1.5 MAb的IFA鉴定 | 第30页 |
| 3.1.6 抗原表位的初步定位 | 第30页 |
| 3.1.7 抗原表位的精确定位 | 第30页 |
| 3.1.8 抗原表位的保守性分析 | 第30页 |
| 3.2 结果 | 第30-33页 |
| 3.2.1 MAb腹水效价的测定及IFA鉴定 | 第30-31页 |
| 3.2.2 抗原表位的初步定位 | 第31-32页 |
| 3.2.3 抗原表位的精确定位 | 第32-33页 |
| 3.2.4 抗原表位保守性分析 | 第33页 |
| 3.3 讨论 | 第33-35页 |
| 第四章 牛传染性鼻气管炎病毒gD蛋白抗原表位鉴定 | 第35-39页 |
| 4.1 材料与方法 | 第35-36页 |
| 4.1.1 分泌BHV-1 的gD蛋白MAb的杂交瘤细胞株及载体 | 第35页 |
| 4.1.2 主要试剂及设备 | 第35页 |
| 4.1.3 腹水制备及效价测定 | 第35页 |
| 4.1.4 抗原表位的初步定位 | 第35-36页 |
| 4.1.5 抗原表位的精确定位 | 第36页 |
| 4.1.6 抗原表位的保守性分析 | 第36页 |
| 4.2 结果 | 第36-38页 |
| 4.2.1 MAb 5B7腹水的制备及效价测定 | 第36页 |
| 4.2.2 抗原表位的初步定位 | 第36-37页 |
| 4.2.3 抗原表位的精确定位 | 第37页 |
| 4.2.4 抗原表位的保守性分析 | 第37-38页 |
| 4.3 讨论 | 第38-39页 |
| 第五章 全文结论 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
| 作者简历 | 第47页 |
