| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-50页 |
| 1 分泌菊粉酶的微生物 | 第15-19页 |
| ·酵母 | 第15-18页 |
| ·丝状真菌 | 第18页 |
| ·细菌 | 第18-19页 |
| 2 菊粉酶的特性及应用 | 第19-24页 |
| ·菊粉酶的分子量 | 第20页 |
| ·菊粉酶的最适pH值 | 第20页 |
| ·菊粉酶的最适温度 | 第20-21页 |
| ·金属离子对菊粉酶活性的影响 | 第21-22页 |
| ·蛋白抑制剂对菊粉酶活性的影响 | 第22-24页 |
| 3 菊粉酶基因的克隆、特性和表达 | 第24-25页 |
| 4 菊粉酶的应用 | 第25-29页 |
| ·用菊粉生产高果糖浆 | 第25-27页 |
| ·利用菊粉酶来生产燃料酒精 | 第27-28页 |
| ·利用菊粉酶来生产寡聚果糖 | 第28-29页 |
| 5 巴斯德毕赤酵母表达系统 | 第29-32页 |
| 6 酿酒酵母表达系统 | 第32-33页 |
| 7 生物乙醇的研究进展 | 第33-47页 |
| ·生物乙醇的原料 | 第34-37页 |
| ·生物乙醇的生产 | 第37-41页 |
| ·酿酒酵母的代谢工程 | 第41-47页 |
| 8 本论文的研究内容和意义 | 第47-50页 |
| 第二章 海洋季也蒙毕赤酵母(P.guilliermondii)strain1重组菊粉酶的真核表达和产酶条件的优化 | 第50-72页 |
| 1 前言 | 第50-51页 |
| 2 重组菊粉酶在Pichia.pastoris X-33中的表达 | 第51-65页 |
| ·材料与方法 | 第51-61页 |
| ·结果与分析 | 第61-65页 |
| 3 季也蒙毕赤酵母重组酶产酶条件的优化 | 第65-71页 |
| ·材料与方法 | 第65-66页 |
| ·结果与讨论 | 第66-71页 |
| 4 本章小结 | 第71-72页 |
| 第三章 重组菊粉酶的纯化和酶学性质研究 | 第72-88页 |
| 1 前言 | 第72-73页 |
| 2 材料和方法 | 第73-79页 |
| ·菌株 | 第73页 |
| ·培养基和试剂 | 第73-74页 |
| ·方法 | 第74-79页 |
| 3 结果与讨论 | 第79-87页 |
| ·重组菊粉酶纯化过程参数和不连续SDS-PAGE凝胶电泳 | 第79-81页 |
| ·纯化重组菊粉酶的最适温度和对温度的稳定性 | 第81-82页 |
| ·纯化重组菊粉酶的最适pH值和对pH的稳定性 | 第82-83页 |
| ·金属离子对菊粉酶酶活的影响 | 第83-84页 |
| ·蛋白抑制剂对纯化菊粉酶酶活的影响 | 第84-85页 |
| ·动力学常数K_m和最大反应速度V_(max) | 第85-86页 |
| ·纯化菊粉酶对菊粉的水解作用 | 第86-87页 |
| 4 本章小结 | 第87-88页 |
| 第四章 利用菊粉水解液发酵生产酒精 | 第88-101页 |
| 1 前言 | 第88-89页 |
| 2 材料与方法 | 第89-93页 |
| ·菌株 | 第89-90页 |
| ·培养基及试剂 | 第90-91页 |
| ·方法 | 第91-93页 |
| 3 结果与讨论 | 第93-100页 |
| ·重组菊粉酶的发酵生产 | 第93-94页 |
| ·最佳菊粉酶粗酶添加量的确定 | 第94-95页 |
| ·最佳酒精发酵时间的确定 | 第95-96页 |
| ·酒精发酵结果 | 第96-97页 |
| ·使用豆饼粉水解液加菊粉进行酒精发酵 | 第97-98页 |
| ·1.0L发酵体系酒精发酵结果 | 第98-100页 |
| 4 本章小结 | 第100-101页 |
| 第五章 酒精酵母的代谢工程和菊粉一步发酵生产乙醇 | 第101-122页 |
| 1 前言 | 第101-102页 |
| 2 材料与方法 | 第102-110页 |
| ·质粒和菌株 | 第102-103页 |
| ·培养基和试剂 | 第103-104页 |
| ·培养基 | 第103-104页 |
| ·试剂 | 第104页 |
| ·方法 | 第104-110页 |
| 3 结果与讨论 | 第110-121页 |
| ·尿嘧啶缺陷型的诱变筛选 | 第110-111页 |
| ·菊粉酶基因INU1的克隆载体构建 | 第111-113页 |
| ·YCPlac33PGK-INU1在酿酒酵母中的表达 | 第113-115页 |
| ·利用转化子直接发酵菊粉产酒精 | 第115-117页 |
| ·2-L发酵罐发酵酒精 | 第117-119页 |
| ·使用菊芋干粉发酵酒精 | 第119-121页 |
| 4 本章小结 | 第121-122页 |
| 总结与创新点 | 第122-124页 |
| 参考文献 | 第124-135页 |
| 附录 | 第135-136页 |
| 发表的学术论文 | 第136-138页 |
| 致谢 | 第138页 |
