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50Hz极低频电磁场和1800MHz射频电磁场表观遗传学效应及其机制的研究

中文摘要第3-7页
英文摘要第7-12页
主要缩略词第17-18页
1 绪论第18-30页
    1.1 问题的提出及研究意义第18页
    1.2 国内外研究现状第18-27页
        1.2.1 极低频电磁场暴露和健康效应第19-21页
        1.2.2 射低频电磁场暴露和健康效应第21-23页
        1.2.3 EMF影响雄性生殖健康的可能机制第23-26页
        1.2.4 电磁场与表观遗传学第26-27页
    1.3 本文的研究目的和内容第27-30页
        1.3.1 研究目的第27-28页
        1.3.2 研究内容第28-29页
        1.3.3 本文的创新点第29-30页
2 50 Hz ELF-EMF对DNA甲基化的影响研究第30-64页
    2.1 引言第30页
    2.2 实验材料第30-32页
        2.2.1 实验细胞第30-32页
    2.3 实验方法第32-43页
        2.3.1 细胞培养与ELF-EMF暴露第32-33页
        2.3.2 CCK-8 法检测细胞生长第33页
        2.3.3 流式细胞仪测细胞凋亡率第33-34页
        2.3.4 流式细胞仪检测细胞周期第34页
        2.3.5 全基因组甲基化检测第34-35页
        2.3.6 基因表达的检测第35-38页
        2.3.7 Western Blot法检测蛋白的表达水平第38-39页
        2.3.8 基因芯片及其验证第39页
        2.3.9 MSP验证DNA甲基化修饰异常基因第39-42页
        2.3.10 统计学分析第42-43页
    2.4 实验结果第43-59页
        2.4.1 50 Hz ELF-EMF不会影响GC-2 细胞生长第43-44页
        2.4.2 50 Hz ELF-EMF对GC-2 细胞凋亡和细胞周期的影响第44-48页
        2.4.3 50 Hz ELF-EMF对GC-2 细胞全基因组甲基化水平的影响第48页
        2.4.4 50 Hz ELF-EMF对GC-2 细胞DNMTs表达水平的影响第48-51页
        2.4.5 50 Hz ELF-EMF暴露后DNA甲基化差异分析第51-54页
        2.4.6 50 Hz ELF-EMF暴露后基因表达分析第54-57页
        2.4.7 网络分析第57-59页
    2.5 讨论第59-62页
    2.6 本章小结第62-64页
3 50 Hz ELF-EMF影响miRNA介导的GC-2 细胞中信号通路的调控第64-106页
    3.1 引言第64页
    3.2 实验材料第64-66页
        3.2.1 实验细胞第64页
        3.2.2 主要实验仪器和耗材第64-65页
        3.2.3 主要试剂第65-66页
    3.3 实验方法第66-70页
        3.3.1 细胞培养与ELF-EMF暴露第66页
        3.3.2 RNA逆转录miRNA第66页
        3.3.3 反转录miRNA第一条链第66页
        3.3.4 miRNA qPCR反应第66-67页
        3.3.5 miRNA表达谱芯片第67页
        3.3.6 MSP检测宿主基因启动子甲基化状态第67-68页
        3.3.7 细胞转染第68-69页
        3.3.8 CCK-8 法检测转染后细胞生长第69页
        3.3.9 流式细胞仪测细胞凋亡率和细胞周期第69页
        3.3.10 Western Blot法检测蛋白的表达水平第69页
        3.3.11 靶基因预测第69-70页
        3.3.12 统计学分析第70页
    3.4 实验结果第70-101页
        3.4.1 50 Hz ELF-EMF暴露可以诱导miRNA差异表达第70-74页
        3.4.2 定量PCR验证 50 Hz ELF-EMF暴露后差异表达miRNAs第74-77页
        3.4.3 网络分析第77-78页
        3.4.4 50 Hz ELF-EMF不同强度暴露后核心miRNA的表达验证第78-79页
        3.4.5 50 Hz ELF-EMF介导潜在的miRNA的靶基因和功能分析第79-81页
        3.4.6 基于miRNA的表达谱GO和KEGG分析第81-85页
        3.4.7 不同的场强的ELF-EMF能改变GC-2 细胞中miR-26b-5p的表达第85-87页
        3.4.8 50 Hz ELF-EMF暴露并不会改变的miR-26b-5p宿主基因CTDSP1启动子的甲基化状态第87-88页
        3.4.9 miR-26b-5p对GC-2 细胞的生长无明显影响第88-90页
        3.4.10 miR-26b-5p过表达或者沉默不影响GC-2 细胞凋亡和引起细胞周期阻滞第90-92页
        3.4.11 过表达miR-26b-5p再暴露于 3 mT ELF-EMF对细胞生长的影响第92-93页
        3.4.12 过表达miR-26b-5p再暴露于 3 mT ELF-EMF对细胞凋亡和周期的影响第93-97页
        3.4.13 CCND2是mi R-26b-5p的直接调控的靶基因第97-99页
        3.4.14 50 Hz ELF-EMF可以改变CCND2 mRNA和蛋白的表达第99-100页
        3.4.15 3 mT ELF-EMF暴露条件下,过表达miR-26b-5p可以改变GC-2 细胞中CCND2表达第100-101页
    3.5 讨论第101-106页
4 1800 MHz RF-EMF对DNA甲基化的影响研究第106-126页
    4.1 引言第106页
    4.2 实验材料第106-108页
        4.2.1 实验细胞第106页
        4.2.2 主要实验设备第106-108页
    4.3 实验方法第108-113页
        4.3.1 细胞培养与RF-EMF暴露第108-109页
        4.3.2 CCK8法检测转染后细胞生长第109页
        4.3.3 流式细胞仪测细胞凋亡率第109页
        4.3.4 流式细胞仪检测细胞周期第109页
        4.3.5 基因表达的检测第109-110页
        4.3.6 全基因组甲基化检测第110-111页
        4.3.7 Western Blot 法检测蛋白的表达水平第111页
        4.3.8 基因芯片及其验证第111-113页
        4.3.9 统计学分析第113页
    4.4 实验结果第113-121页
        4.4.1 1800 MHz RF-EMF不影响GC-2 细胞生长第113-115页
        4.4.2 1800 MHz RF-EMF不会诱导GC-2 细胞凋亡或细胞周期阻滞第115-118页
        4.4.3 1800 MHz RF-EMF可以增加GC-2 细胞全基因组甲基化水平第118-119页
        4.4.4 1800 MHz RF-EMF可改变DNMTsmRNA和蛋白水平的表达第119-120页
        4.4.5 初步建立了 1800MHz RF-EMF致全基因组甲基化图谱第120-121页
    4.5 讨论第121-124页
    4.6 本章小结第124-126页
5 1800 MHz RF-EMF对miRNA的影响研究第126-152页
    5.1 引言第126页
    5.2 实验材料第126-128页
        5.2.1 实验细胞第126页
        5.2.2 主要实验设备第126-128页
    5.3 实验方法第128-130页
        5.3.1 细胞培养与RF-EMF暴露第128页
        5.3.2 基因表达的检测第128-130页
        5.3.3 基因芯片及其验证第130页
        5.3.4 统计学分析第130页
    5.4 实验结果第130-147页
        5.4.1 1800 MHz RF-EMF暴露可以诱导的miRNA的差异表达第130-132页
        5.4.2 qPCR验证差异表达的核心的miRNA第132-133页
        5.4.3 1800 MHz RF-EMF潜在的特异的miRNA的靶基因和功能分析第133页
        5.4.4 基因表达谱芯片筛选 1800 MHz RF-EMF暴露后差异表达基因第133-135页
        5.4.5 Signal-Net分析预测核心靶基因第135-136页
        5.4.6 microRNA-Gene-Network第136-139页
        5.4.7 基于mRNA表达谱GO分析和KEGG通路分析第139-144页
        5.4.8 相关信号通路的验证第144-147页
    5.5 讨论第147-150页
    5.6 本章小结第150-152页
6 结论与展望第152-156页
    6.1 主要结论第152-153页
        6.1.1 50 Hz ELF-EMF的表观遗传学研究第152页
        6.1.2 1800 MHz RF-EMF的表观遗传学研究第152-153页
    6.2 展望第153-156页
致谢第156-158页
参考文献第158-174页
附录第174页
    A. 作者在攻读博士学位期间科研及发表论文情况第174页
    B. 参加的科研项目情况第174页

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