| 中文摘要 | 第10-11页 |
| ABSTRACT | 第11-12页 |
| 第一章 综述 | 第13-21页 |
| 1 MT的概述 | 第13-17页 |
| 1.1 MT的命名 | 第13页 |
| 1.2 MT的分类 | 第13-14页 |
| 1.3 MT的结构特征 | 第14页 |
| 1.4 MT的理化性质 | 第14-15页 |
| 1.5 MT的生理功能 | 第15-16页 |
| 1.6 MT的诱导表达 | 第16-17页 |
| 1.7 MT的应用前景 | 第17页 |
| 2 原核表达系统简介 | 第17-18页 |
| 2.1 大肠杆菌表达系统简介 | 第17-18页 |
| 2.2 载体的选择 | 第18页 |
| 2.3 phoA分泌型载体 | 第18页 |
| 3 本研究内容和目的意义 | 第18-21页 |
| 第二章 河南华溪蟹金属硫蛋白分泌型表达载体的构建 | 第21-35页 |
| 1 实验材料与试剂 | 第21-23页 |
| 1.1 实验材料 | 第21-22页 |
| 1.2 实验试剂 | 第22-23页 |
| 1.3 实验仪器 | 第23页 |
| 2 实验方法与步骤 | 第23-29页 |
| 2.1 pGEM-T-MT质粒 | 第23页 |
| 2.2 引物设计 | 第23-24页 |
| 2.3 PCR反应 | 第24-25页 |
| 2.4 重组质粒的构建及鉴定 | 第25-29页 |
| 3 结果 | 第29-32页 |
| 3.1 PCR扩增MT基因结果 | 第29-31页 |
| 3.2 双酶切鉴定结果 | 第31-32页 |
| 3.3 测序结果 | 第32页 |
| 4 讨论 | 第32-33页 |
| 5 本章小结 | 第33-35页 |
| 第三章 重组phoA-MT的表达、纯化 | 第35-45页 |
| 1 实验材料与试剂 | 第35-36页 |
| 1.1 实验材料 | 第35页 |
| 1.2 实验试剂 | 第35-36页 |
| 1.3 实验仪器 | 第36页 |
| 2. 实验方法与步骤 | 第36-39页 |
| 2.1 工程菌phoA-MT/BL21(DE3)诱导表达 | 第36页 |
| 2.2 重组MT的纯化 | 第36-37页 |
| 2.3 重组MT的鉴定 | 第37-39页 |
| 3. 结果 | 第39-42页 |
| 3.1 诱导表达条件筛选 | 第39-40页 |
| 3.2 重组蛋白SDS-PAGE分析鉴定 | 第40-41页 |
| 3.3 重组蛋白非还原性PAGE分析鉴定 | 第41页 |
| 3.4 重组蛋白WB分析 | 第41-42页 |
| 4. 讨论 | 第42-43页 |
| 5 本章小结 | 第43-45页 |
| 第四章 重组phoA-MT性质及其功能鉴定 | 第45-53页 |
| 1 实验材料与试剂 | 第45页 |
| 1.1 实验材料 | 第45页 |
| 1.2 实验试剂 | 第45页 |
| 1.3 实验仪器 | 第45页 |
| 2 实验方法与步骤 | 第45-47页 |
| 2.1 重组phoA-MT蛋白浓度测定 | 第45-46页 |
| 2.2 紫外光谱扫描分析重组phoA-MT | 第46页 |
| 2.3 重组phoA-MT羟自由基清除率测定 | 第46-47页 |
| 3 结果 | 第47-50页 |
| 3.1 重组蛋白浓度测定 | 第47-48页 |
| 3.2 重组蛋白紫外光谱扫描分析 | 第48-49页 |
| 3.3 重组phoA-MT羟自由基清除率测定 | 第49-50页 |
| 4 讨论 | 第50页 |
| 5 本章总结 | 第50-53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |
| 中英文缩略词对照表 | 第60-61页 |
| 攻读学位期间取得的成果 | 第61-63页 |
| 致谢 | 第63-65页 |
| 个人情况及联系方式 | 第65-71页 |
| 附录 | 第71-74页 |