| 中文摘要 | 第3-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩略语表 | 第12-15页 |
| 第一章 前言 | 第15-17页 |
| 第二章 DDX46在食管鳞癌组织和细胞系中的表达 | 第17-30页 |
| 1 实验材料 | 第17-19页 |
| 1.1 实验试剂 | 第17-18页 |
| 1.2 实验器材 | 第18页 |
| 1.3 组织标本 | 第18页 |
| 1.4 细胞株 | 第18页 |
| 1.5 主要工作液配制 | 第18-19页 |
| 2 实验方法 | 第19-24页 |
| 2.1 临床组织标本收集 | 第19页 |
| 2.2 组织标本qRT-PCR检测 | 第19-21页 |
| 2.3 组织标本免疫组化染色 | 第21-22页 |
| 2.4 细胞培养 | 第22页 |
| 2.5 细胞样本qRT-PCR检测 | 第22-23页 |
| 2.6 统计学方法 | 第23-24页 |
| 3 结果 | 第24-26页 |
| 3.1 食管鳞癌新鲜组织中DDX46基因mRNA的表达较相对应正常组织明显升高 | 第24页 |
| 3.2 食管鳞癌组织中DDX46蛋白的表达较相对应食管正常组织明显升高 | 第24-25页 |
| 3.3 食管鳞癌细胞株中DDX46基因mRNA的表达上调 | 第25-26页 |
| 4 讨论 | 第26-30页 |
| 第三章 RNAi沉默DDX46基因对食管鳞癌细胞增殖的影响 | 第30-51页 |
| 1 实验材料 | 第30-35页 |
| 1.1 实验质粒 | 第30页 |
| 1.2 实验菌株 | 第30-31页 |
| 1.3 细胞株 | 第31页 |
| 1.4 实验试剂 | 第31-32页 |
| 1.5 实验器材 | 第32-33页 |
| 1.6 主要工作液配制 | 第33-35页 |
| 2 实验方法 | 第35-40页 |
| 2.1 总体实验流程 | 第35页 |
| 2.2 细胞培养 | 第35-36页 |
| 2.3 DDX46基因RNAi慢病毒载体制备 | 第36页 |
| 2.4 DDX46基因RNAi慢病毒包装 | 第36-37页 |
| 2.5 DDX46 基因 RNAi 慢病毒感染食管鳞癌细胞 | 第37-38页 |
| 2.6 qRT-PCR检测DDX46基因mRNA水平的敲减效率 | 第38页 |
| 2.7 Western blot检测DDX46基因蛋白水平的敲减效率 | 第38页 |
| 2.8 Cellomics细胞计数检测 | 第38-39页 |
| 2.9 MTT细胞活力检测 | 第39页 |
| 2.10 克隆形成检测 | 第39页 |
| 2.11 细胞周期检测 | 第39页 |
| 2.12 细胞凋亡检测 | 第39-40页 |
| 2.13 统计学方法 | 第40页 |
| 3 结果 | 第40-48页 |
| 3.1 慢病毒感染目的细胞的效率 | 第40页 |
| 3.2 shRNA慢病毒介导的RNAi有效抑制DDX46基因的表达 | 第40-42页 |
| 3.3 RNAi沉默DDX46基因抑制食管鳞癌细胞生长 | 第42-44页 |
| 3.4 RNAi沉默DDX46基因抑制食管鳞癌细胞活力 | 第44页 |
| 3.5 RNAi沉默DDX46基因抑制食管鳞癌细胞克隆形成 | 第44-45页 |
| 3.6 RNAi沉默DDX46基因影响食管鳞癌细胞周期 | 第45-47页 |
| 3.7 RNAi沉默DDX46基因诱导食管鳞癌细胞凋亡 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-51页 |
| 第四章 RNAi沉默DDX46基因食管鳞癌细胞裸鼠成瘤实验 | 第51-66页 |
| 1 实验材料 | 第51-52页 |
| 1.1 实验试剂 | 第51页 |
| 1.2 实验器材 | 第51页 |
| 1.3 细胞株 | 第51-52页 |
| 1.4 实验动物 | 第52页 |
| 2 实验方法 | 第52-53页 |
| 2.1 实验流程 | 第52页 |
| 2.2 细胞培养 | 第52页 |
| 2.3 DDX46基因RNAi慢病毒感染食管鳞癌Eca-109细胞 | 第52页 |
| 2.4 皮下接种 | 第52页 |
| 2.5 检测成瘤情况 | 第52-53页 |
| 2.6 统计学方法 | 第53页 |
| 3 结果 | 第53-64页 |
| 3.1 慢病毒感染Eca-109细胞的效率 | 第53-54页 |
| 3.2 RNAi沉默DDX46基因抑制裸鼠成瘤（瘤体测量） | 第54-61页 |
| 3.3 RNAi沉默DDX46基因抑制裸鼠成瘤（活体小动物成像） | 第61-64页 |
| 3.4 接种Het-1A细胞无裸鼠成瘤 | 第64页 |
| 4 讨论 | 第64-66页 |
| 第五章 RNAi沉默DDX46基因抑制食管鳞癌细胞增殖并诱导细胞凋亡的机制研究 | 第66-94页 |
| 1 实验材料 | 第66-68页 |
| 1.1 芯片信息 | 第66页 |
| 1.2 实验试剂 | 第66-67页 |
| 1.3 实验器材 | 第67页 |
| 1.4 细胞株 | 第67页 |
| 1.5 实验主要工作液配制 | 第67-68页 |
| 2 实验方法 | 第68-70页 |
| 2.1 实验流程 | 第68页 |
| 2.2 样品细胞总RNA抽提和质检 | 第68页 |
| 2.3 IVT反应获得片段化aRNA | 第68-69页 |
| 2.4 芯片杂交洗染、扫描 | 第69页 |
| 2.5 差异表达基因qRT-PCR和Western blot检测验证 | 第69页 |
| 2.6 PathScan& | 第69页 |
| 2.7 统计学方法 | 第69-70页 |
| 3 结果 | 第70-86页 |
| 3.1 RNA质检结果 | 第70-71页 |
| 3.2 芯片数据质控 | 第71-74页 |
| 3.3 探针数据分析结果 | 第74-77页 |
| 3.4 生物信息分析结果（IPA分析） | 第77-81页 |
| 3.5 差异表达基因qRT-PCR和Western blot检测验证结果 | 第81-83页 |
| 3.6 PathScan& | 第83-85页 |
| 3.7 RNAi沉默DDX46基因抑制PI3K的表达 | 第85-86页 |
| 4 讨论 | 第86-94页 |
| 第六章 结论 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-102页 |
| 文献综述 | 第102-132页 |
| 综述一 DDX（DEAD-box）蛋白家族RNA解旋酶与肿瘤关系的研究现状 | 第102-122页 |
| 参考文献 | 第112-122页 |
| 综述二 Estrogen and estrogen receptors in gastrointestinal tract cancer | 第122-132页 |
| References | 第127-132页 |
| 在学期间的获奖和研究成果 | 第132-133页 |
| 致谢 | 第133页 |
