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n-3不饱和脂肪酸改善LPS诱导的小鼠抑郁样行为及相关病理变化机制研究

摘要第4-6页
Abstract第6-8页
1 绪论第14-21页
    1.1 抑郁症第14页
    1.2 关于抑郁症假说第14-16页
        1.2.1 单胺类缺乏学说第14页
        1.2.2 HPA轴功能障碍假说第14-15页
        1.2.3 神经营养因子假说第15页
        1.2.4 免疫炎症假说第15-16页
    1.3 LPS、炎症与抑郁症第16页
    1.4 n-3 和n-6 不饱和脂肪酸、炎症与抑郁症第16-18页
        1.4.1 多不饱和脂肪酸第16页
        1.4.2 n-3 和n-6 PUFAs与炎症第16-17页
        1.4.3 n-6 和n-3 PUFAs与抑郁症第17-18页
    1.5 Fat-1 小鼠模型第18页
    1.6 研究的目的意义与研究的主要内容第18-21页
        1.6.1 研究的目的意义第18-19页
        1.6.2 研究的主要内容第19-20页
        1.6.3 研究技术路线第20-21页
2 实验材料与仪器第21-23页
    2.1 实验动物第21页
    2.2 实验试剂第21-22页
    2.3 实验仪器第22-23页
3 实验方法第23-34页
    3.1 实验动物的繁殖第23页
    3.2 转基因小鼠的基因型鉴定第23-24页
        3.2.1 小鼠基因组DNA的提取第23页
        3.2.2 PCR鉴定小鼠基因型第23-24页
    3.3 实验动物侧脑室手术及实验分组第24-25页
    3.4 行为学实验方法第25-27页
        3.4.1 糖水偏好实验方法第25页
        3.4.2 小鼠悬尾实验方法第25-26页
        3.4.3 强迫游泳实验方法第26页
        3.4.4 旷场实验方法第26页
        3.4.5 高架迷宫实验第26-27页
    3.5 外周免疫细胞及外周血清炎症细胞因子测定实验方法第27页
        3.5.1 巨噬细胞吞噬能力实验方法第27页
        3.5.2 巨噬细胞MTT增殖活力测定方法第27页
        3.5.3 外周血清炎症因子IL-1β 及皮质酮激素测定方法第27页
    3.6 小鼠脑组织n-3 PUFAs和n-6 PUFAs的含量及比例测定实验方法第27-28页
        3.6.1 大脑脂肪酸提取及甲酯化方法第27-28页
        3.6.2 气相色谱测定脂肪酸组分及含量实验方法第28页
    3.7 海马组织炎症因子含量测定方法第28-29页
        3.7.1 总蛋白的提取及含量测定第28-29页
        3.7.2 炎症因子含量的测定第29页
    3.8 荧光定量PCR检测海马组织mRNA相对表达实验方法第29-31页
        3.8.1 组织总RNA抽提方法第29页
        3.8.2. 琼脂糖凝胶电泳检测总RNA的质量第29页
        3.8.3 反转录实验步骤第29-30页
        3.8.4 荧光定量PCR实验步骤第30页
        3.8.5 荧光定量结果表示第30-31页
        3.8.6 引物序列第31页
    3.9 Western Blot检测海马组织相关蛋白表达实验方法第31-34页
        3.9.1 蛋白质样品的制备第31-32页
        3.9.2 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳第32-33页
        3.9.3 转膜第33页
        3.9.4 封闭及免疫反应第33页
        3.9.5 化学发光显色第33-34页
4 实验结果第34-49页
    4.1 Fat-1 转基因小鼠的基因型鉴定第34页
    4.2 小鼠脑组织n-3 和n-6 PUFAs的测定第34-35页
    4.3 行为学实验结果第35-38页
        4.3.1 Fat-1 小鼠对LPS诱导的糖水偏好度的影响第35-36页
        4.3.2 Fat-1 小鼠对LPS诱导的小鼠悬尾不动时间的影响第36页
        4.3.3 Fat-1 小鼠对LPS诱导的小鼠强迫游泳不动时间的影响第36-37页
        4.3.4 Fat-1 小鼠对LPS诱导的旷场迷宫中行为的影响第37页
        4.3.5 Fat-1 小鼠对LPS诱导的高架迷宫中行为的影响第37-38页
    4.4 外周激素及免疫变化测定实验结果第38-41页
        4.4.1 Fat-1 小鼠对LPS诱导的小鼠巨噬细胞活性的影响第39页
        4.4.2 Fat-1 小鼠对LPS诱导的小鼠巨噬细胞吞噬能力的影响第39-40页
        4.4.3 Fat-1 小鼠对LPS诱导的小鼠外周血清中IL-1β 表达水平的影响第40页
        4.4.4 Fat-1 小鼠对LPS诱导的小鼠外周血清中皮质酮表达水平的影响第40-41页
    4.5 海马组织炎症因子表达的变化实验结果第41-43页
        4.5.1 Fat-1 小鼠对LPS诱导的小鼠M1相关炎症因子的影响第41-42页
        4.5.2 Fat-1 小鼠对LPS诱导的小鼠M2相关炎症因子的影响第42页
        4.5.3 Fat-1 小鼠对LPS诱导的小鼠iNOS和NO的影响第42-43页
    4.6 海马组织基因和蛋白表达实验结果第43-49页
        4.6.1 小胶质细胞表型M1和M2表型变化结果第43-45页
        4.6.2 神经营养相关表达的变化结果第45-49页
5 讨论第49-55页
    5.1 抑郁症与行为学改变及PUFAs的改善作用第49页
    5.2 抑郁症与外周免疫及PUFAs的改善作用第49-51页
    5.3 抑郁症与小胶质细胞炎症反应及PUFAs的改善作用第51-53页
    5.4 抑郁症与神经营养因子及PUFAs的改善作用第53-55页
6 结论与展望第55-56页
    6.1 结论第55页
    6.2 创新点第55页
    6.3 展望第55-56页
参考文献第56-70页
附录第70-71页
致谢第71-72页
作者简介第72-73页
导师简介第73页

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