摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
第一章 绪论 | 第12-21页 |
1.1 G蛋白偶联受体 | 第12-16页 |
1.1.1 GPCRs的结构与分类 | 第12-13页 |
1.1.2 基于GPCRs的信号传导系统 | 第13-16页 |
1.1.3 以G蛋白偶联受体为靶点的药物开发以及市场前景 | 第16页 |
1.2 中链脂肪酸受体GPR84概述 | 第16-21页 |
1.2.1 游离脂肪酸受体及其分类 | 第16-17页 |
1.2.2 GPR84的功能及其配体 | 第17-19页 |
1.2.3 GPR84与疾病 | 第19-21页 |
第二章 研究目的与内容 | 第21-23页 |
2.1 研究目的 | 第21页 |
2.2 研究内容 | 第21-23页 |
第三章 材料与方法 | 第23-35页 |
3.1 实验材料 | 第23-30页 |
3.1.1 质粒和细胞株 | 第23页 |
3.1.2 试剂及耗材 | 第23-24页 |
3.1.3 仪器 | 第24-26页 |
3.1.4 试剂配制 | 第26-30页 |
3.2 实验方法 | 第30-35页 |
3.2.1 细胞转染和稳转细胞系构建 | 第30页 |
3.2.2 RT-PCR | 第30-31页 |
3.2.3 钙流实验 | 第31页 |
3.2.4 环腺苷酸(cAMP)实验 | 第31-32页 |
3.2.5 免疫荧光染色 | 第32页 |
3.2.6 流式细胞分析(FACS) | 第32页 |
3.2.7 Western blot检测ERK磷酸化水平 | 第32-33页 |
3.2.8 GPR84拮抗剂的高通量筛选 | 第33-34页 |
3.2.9 数据处理及分析 | 第34-35页 |
第四章 结果与分析 | 第35-44页 |
4.1 构建稳定表达GPR84/Gα16蛋白的HEK293细胞株 | 第35页 |
4.2 GPR84基因表达及其受体蛋白定位 | 第35-36页 |
4.3 6-OAU提高GPR84介导的细胞质内Ca~(2+)浓度 | 第36页 |
4.4 6-OAU通过GPR84降低细胞内cAMP水平 | 第36-37页 |
4.5 6-OAU通过激活GPR84导致ERK磷酸化 | 第37-38页 |
4.6 6-OAU诱导GPR84发生脱敏现象 | 第38-39页 |
4.7 6-OAU诱导GPR84发生内吞现象 | 第39-40页 |
4.8 GPR84拮抗剂的高通量筛选(初筛) | 第40-41页 |
4.9 GPR84拮抗剂的复筛及其活性验证 | 第41-44页 |
第五章 结论及意义 | 第44-46页 |
参考文献 | 第46-49页 |
在学期间所取得的科研成果 | 第49-50页 |
致谢 | 第50页 |