摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
绪论 | 第15-30页 |
1.1 植物次生代谢途径 | 第15-22页 |
1.1.1 植物次生代谢途径的意义 | 第15-16页 |
1.1.2 萜类代谢途径 | 第16-21页 |
1.1.3 植物萜类代谢途径的产物 | 第21-22页 |
1.2 青蒿素生物合成途径 | 第22-26页 |
1.2.1 青蒿素生物合成途径简介 | 第22-24页 |
1.2.2 青蒿素生物合成途径的关键酶及研究进展 | 第24-26页 |
1.3 转录因子的研究对青蒿素生物合成的意义 | 第26-29页 |
1.3.1 转录因子及其功能简介 | 第26页 |
1.3.2 转录因子对青蒿素生物合成途径的调控 | 第26-27页 |
1.3.3 逆境胁迫类转录因子与青蒿素合成 | 第27-29页 |
1.4 本研究的目的和主要内容 | 第29-30页 |
1.4.1 本研究的目的 | 第29页 |
1.4.2 本研究的主要内容 | 第29-30页 |
第二章 共转化FPS基因和DBR2基因提高青蒿素含量 | 第30-48页 |
2.1 前言 | 第30-31页 |
2.2 材料与试剂 | 第31-34页 |
2.2.1 植株材料 | 第31页 |
2.2.2 菌株 | 第31页 |
2.2.3 试剂和载体 | 第31-32页 |
2.2.4 常用试剂、母液及培养基的配制 | 第32-33页 |
2.2.5 引物序列 | 第33页 |
2.2.6 主要实验仪器设备 | 第33-34页 |
2.3 方法 | 第34-42页 |
2.3.1 克隆载体的构建 | 第34-36页 |
2.3.2 植物表达载体的构建 | 第36-38页 |
2.3.3 青蒿无菌苗的培养 | 第38页 |
2.3.4 根癌农杆菌转化青蒿叶片 | 第38页 |
2.3.5 青蒿转化苗的PCR阳性检测 | 第38-39页 |
2.3.6 实时荧光定量PCR检测转基因阳性青蒿植株中过表达基因的表达情况 | 第39-41页 |
2.3.7 转基因阳性青蒿植株的含量检测 | 第41-42页 |
2.4 结果 | 第42-46页 |
2.4.1 表达载体的构建 | 第42-43页 |
2.4.2 转基因植株PCR阳性检测结果 | 第43-44页 |
2.4.3 实时荧光定量PCR检测结果 | 第44-46页 |
2.4.4 转基因青蒿植株的含量检测 | 第46页 |
2.5 讨论 | 第46-48页 |
第三章 共转化FPS基因和ALDH1基因提高青蒿素含量 | 第48-60页 |
3.1 前言 | 第48页 |
3.2 材料与试剂 | 第48-50页 |
3.2.1 植株材料 | 第48页 |
3.2.2 菌株 | 第48-49页 |
3.2.3 试剂和载体 | 第49页 |
3.2.4 常用试剂、母液及培养基的配制 | 第49页 |
3.2.5 引物序列 | 第49页 |
3.2.6 主要实验仪器设备 | 第49-50页 |
3.3 方法 | 第50-54页 |
3.3.1 克隆载体的构建 | 第50-52页 |
3.3.2 植物表达载体的构建 | 第52-53页 |
3.3.3 青蒿无菌苗的培养和根癌农杆菌转化青蒿叶片 | 第53页 |
3.3.4 青蒿转化苗的PCR阳性检测 | 第53页 |
3.3.5 实时荧光定量PCR检测转基因阳性青蒿植株中过表达基因的表达情况 | 第53-54页 |
3.3.6 转基因阳性青蒿植株的含量检测 | 第54页 |
3.4 结果 | 第54-58页 |
3.4.1 表达载体的构建 | 第54-55页 |
3.4.2 转基因植株PCR阳性检测结果 | 第55-56页 |
3.4.3 实时荧光定量PCR检测结果 | 第56-58页 |
3.4.4 转基因青蒿植株的含量检测 | 第58页 |
3.5 讨论 | 第58-60页 |
第四章 青蒿B-BOX型锌指蛋白基因Aa BBX22的克隆及表达分析 | 第60-72页 |
4.1 引言 | 第60-61页 |
4.2 材料与试剂 | 第61页 |
4.3 方法 | 第61-63页 |
4.3.1 材料处理 | 第61页 |
4.3.2 RNA抽提及反转成c DNA | 第61页 |
4.3.3 AaBBX22基因的克隆 | 第61-62页 |
4.3.4 AaBBX22基因的生物信息学分析 | 第62页 |
4.3.5 AaBBX22基因在青蒿不同组织中的表达 | 第62页 |
4.3.6 不同胁迫条件下AaBBX22基因的差异表达分析 | 第62-63页 |
4.4 结果 | 第63-70页 |
4.4.1 青蒿AaBBX22基因克隆及序列分析 | 第63-66页 |
4.4.2 AaBBX22基因在青蒿不同组织中的特异表达 | 第66页 |
4.4.3 不同胁迫条件下的Aa BBX22基因的表达差异性分析 | 第66-70页 |
4.5 讨论 | 第70-72页 |
第五章 总结与展望 | 第72-75页 |
5.1 总结 | 第72-73页 |
5.2 创新点 | 第73-74页 |
5.3 展望 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-79页 |
致谢 | 第79-80页 |
攻读硕士学位期间已发表或录用的论文及专利 | 第80页 |