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青蒿素合成途径关键酶基因及转录因子AaBBX22的调控研究

摘要第6-8页
ABSTRACT第8-10页
绪论第15-30页
    1.1 植物次生代谢途径第15-22页
        1.1.1 植物次生代谢途径的意义第15-16页
        1.1.2 萜类代谢途径第16-21页
        1.1.3 植物萜类代谢途径的产物第21-22页
    1.2 青蒿素生物合成途径第22-26页
        1.2.1 青蒿素生物合成途径简介第22-24页
        1.2.2 青蒿素生物合成途径的关键酶及研究进展第24-26页
    1.3 转录因子的研究对青蒿素生物合成的意义第26-29页
        1.3.1 转录因子及其功能简介第26页
        1.3.2 转录因子对青蒿素生物合成途径的调控第26-27页
        1.3.3 逆境胁迫类转录因子与青蒿素合成第27-29页
    1.4 本研究的目的和主要内容第29-30页
        1.4.1 本研究的目的第29页
        1.4.2 本研究的主要内容第29-30页
第二章 共转化FPS基因和DBR2基因提高青蒿素含量第30-48页
    2.1 前言第30-31页
    2.2 材料与试剂第31-34页
        2.2.1 植株材料第31页
        2.2.2 菌株第31页
        2.2.3 试剂和载体第31-32页
        2.2.4 常用试剂、母液及培养基的配制第32-33页
        2.2.5 引物序列第33页
        2.2.6 主要实验仪器设备第33-34页
    2.3 方法第34-42页
        2.3.1 克隆载体的构建第34-36页
        2.3.2 植物表达载体的构建第36-38页
        2.3.3 青蒿无菌苗的培养第38页
        2.3.4 根癌农杆菌转化青蒿叶片第38页
        2.3.5 青蒿转化苗的PCR阳性检测第38-39页
        2.3.6 实时荧光定量PCR检测转基因阳性青蒿植株中过表达基因的表达情况第39-41页
        2.3.7 转基因阳性青蒿植株的含量检测第41-42页
    2.4 结果第42-46页
        2.4.1 表达载体的构建第42-43页
        2.4.2 转基因植株PCR阳性检测结果第43-44页
        2.4.3 实时荧光定量PCR检测结果第44-46页
        2.4.4 转基因青蒿植株的含量检测第46页
    2.5 讨论第46-48页
第三章 共转化FPS基因和ALDH1基因提高青蒿素含量第48-60页
    3.1 前言第48页
    3.2 材料与试剂第48-50页
        3.2.1 植株材料第48页
        3.2.2 菌株第48-49页
        3.2.3 试剂和载体第49页
        3.2.4 常用试剂、母液及培养基的配制第49页
        3.2.5 引物序列第49页
        3.2.6 主要实验仪器设备第49-50页
    3.3 方法第50-54页
        3.3.1 克隆载体的构建第50-52页
        3.3.2 植物表达载体的构建第52-53页
        3.3.3 青蒿无菌苗的培养和根癌农杆菌转化青蒿叶片第53页
        3.3.4 青蒿转化苗的PCR阳性检测第53页
        3.3.5 实时荧光定量PCR检测转基因阳性青蒿植株中过表达基因的表达情况第53-54页
        3.3.6 转基因阳性青蒿植株的含量检测第54页
    3.4 结果第54-58页
        3.4.1 表达载体的构建第54-55页
        3.4.2 转基因植株PCR阳性检测结果第55-56页
        3.4.3 实时荧光定量PCR检测结果第56-58页
        3.4.4 转基因青蒿植株的含量检测第58页
    3.5 讨论第58-60页
第四章 青蒿B-BOX型锌指蛋白基因Aa BBX22的克隆及表达分析第60-72页
    4.1 引言第60-61页
    4.2 材料与试剂第61页
    4.3 方法第61-63页
        4.3.1 材料处理第61页
        4.3.2 RNA抽提及反转成c DNA第61页
        4.3.3 AaBBX22基因的克隆第61-62页
        4.3.4 AaBBX22基因的生物信息学分析第62页
        4.3.5 AaBBX22基因在青蒿不同组织中的表达第62页
        4.3.6 不同胁迫条件下AaBBX22基因的差异表达分析第62-63页
    4.4 结果第63-70页
        4.4.1 青蒿AaBBX22基因克隆及序列分析第63-66页
        4.4.2 AaBBX22基因在青蒿不同组织中的特异表达第66页
        4.4.3 不同胁迫条件下的Aa BBX22基因的表达差异性分析第66-70页
    4.5 讨论第70-72页
第五章 总结与展望第72-75页
    5.1 总结第72-73页
    5.2 创新点第73-74页
    5.3 展望第74-75页
参考文献第75-79页
致谢第79-80页
攻读硕士学位期间已发表或录用的论文及专利第80页

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