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TCTP介导高脂诱发胰岛β细胞凋亡的分子机制研究

摘要第3-4页
ABSTRACT第4页
中英文缩略语表第5-8页
第1章. 绪论第8-14页
    1.1 糖尿病与肥胖第8-10页
        1.1.1 糖尿病的流行病学第8页
        1.1.2 肥胖与糖尿病关系第8-9页
        1.1.3 2型糖尿病的发病机理以及主要治疗手段第9-10页
    1.2 翻译调控肿瘤蛋白(TCTP)的主要生理功能第10-12页
    1.3 CD36和AMPK对组织细胞中脂肪酸的摄取和利用第12-14页
第2章.实验材料、仪器和方法第14-30页
    2.1 实验材料第14-16页
        2.1.1 细胞株和TCTP腺病毒第14页
        2.1.2 试剂第14-16页
        2.1.3 试剂盒第16页
    2.2 实验仪器第16-17页
        2.2.1 主要仪器第16-17页
    2.3 抗体第17-18页
        2.3.1 主要抗体第17-18页
    2.4 抑制剂、激动剂第18-19页
        2.4.1 主要抑制剂和激动剂第18-19页
    2.5 实验溶剂第19-20页
        2.5.1 5X电泳缓冲液第19页
        2.5.2 10X TBS第19页
        2.5.3 10X转膜缓冲液第19-20页
        2.5.4 RPMI1640完全培养基第20页
    2.6 实验方法第20-30页
        2.6.1 细胞培养、保种及PA高脂处理第20-21页
        2.6.2 腺病毒转染INS1E细胞第21页
        2.6.3 油红染色第21页
        2.6.4 Biotin-Streptavidin-Agarose Surface细胞膜蛋白提取及检测第21-22页
        2.6.5 抑制剂,激活剂处理INS1E细胞第22-23页
        2.6.6 细胞的活力测定(MTS法)第23-24页
        2.6.7 Western-blot检测第24-27页
        2.6.8 细胞免疫共沉淀第27页
        2.6.9 动物实验第27-28页
        2.6.10 组织冰冻制作及冰冻切片免疫荧光第28-29页
        2.6.11 TUNEL法检测INS1E细胞凋亡第29页
        2.6.12 论文中用到的统计学方法第29-30页
第3章.实验结果第30-48页
    3.1 TCTP与棕榈酸钠(下文皆简称为PA)诱导INS1E细胞凋亡密切相关第30-38页
        3.1.1 INS1E细胞在PA处理不同时间点对脂肪酸的摄取第30-32页
        3.1.2 PA对INS1E细胞增殖的影响第32页
        3.1.3 PA对INS1E细胞中TCTP、Cleaved caspase3、Bax和MCL1蛋白表达的影响第32-33页
        3.1.4 PA促进INS1E细胞的凋亡第33-34页
        3.1.5 INS1E细胞中TCTP的表达水平可以影响PA引发的细胞凋亡第34-36页
        3.1.6 高脂喂养C57小鼠胰岛β细胞中TCTP和胰岛素分泌的变化第36-38页
    3.2 CD36参与PA引发的INS1E细胞凋亡第38-40页
        3.2.1 PA对INS1E细胞中CD36蛋白的表达水平影响第38页
        3.2.2 PA促进INS1E细胞中的CD36向细胞膜迁移第38-39页
        3.2.3 CD36介导PA引起的INS1E细胞凋亡第39-40页
    3.3 INS1E细胞中PA激活CD36-Fyn-LKB1-AMPK-TCTP信号通路进而引发细胞凋亡第40-45页
        3.3.1 PA可以激活INS1E细胞中的AMPK第40-41页
        3.3.2 INS1E细胞中PA可通过活化AMPK下调TCTP的表达第41-42页
        3.3.3 抑制Fyn活性可以激活AMPK并下调TCTP表达第42-43页
        3.3.4 抑制Fyn活性可以促使INS1E细胞中的LKB1从细胞核向细胞质迁移第43-45页
    3.4 PA可能通过使INS1E细胞中的TCTP泛素化降解而导致细胞凋亡第45-48页
        3.4.1 PA可以促进INS1E细胞中TCTP的泛素化降解第45-47页
        3.4.2 Trim 21 可能是TCTP的泛素化酶第47-48页
第4章.讨论和结论第48-53页
参考文献第53-56页
致谢第56页

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