摘要 | 第3-4页 |
ABSTRACT | 第4页 |
中英文缩略语表 | 第5-8页 |
第1章. 绪论 | 第8-14页 |
1.1 糖尿病与肥胖 | 第8-10页 |
1.1.1 糖尿病的流行病学 | 第8页 |
1.1.2 肥胖与糖尿病关系 | 第8-9页 |
1.1.3 2型糖尿病的发病机理以及主要治疗手段 | 第9-10页 |
1.2 翻译调控肿瘤蛋白(TCTP)的主要生理功能 | 第10-12页 |
1.3 CD36和AMPK对组织细胞中脂肪酸的摄取和利用 | 第12-14页 |
第2章.实验材料、仪器和方法 | 第14-30页 |
2.1 实验材料 | 第14-16页 |
2.1.1 细胞株和TCTP腺病毒 | 第14页 |
2.1.2 试剂 | 第14-16页 |
2.1.3 试剂盒 | 第16页 |
2.2 实验仪器 | 第16-17页 |
2.2.1 主要仪器 | 第16-17页 |
2.3 抗体 | 第17-18页 |
2.3.1 主要抗体 | 第17-18页 |
2.4 抑制剂、激动剂 | 第18-19页 |
2.4.1 主要抑制剂和激动剂 | 第18-19页 |
2.5 实验溶剂 | 第19-20页 |
2.5.1 5X电泳缓冲液 | 第19页 |
2.5.2 10X TBS | 第19页 |
2.5.3 10X转膜缓冲液 | 第19-20页 |
2.5.4 RPMI1640完全培养基 | 第20页 |
2.6 实验方法 | 第20-30页 |
2.6.1 细胞培养、保种及PA高脂处理 | 第20-21页 |
2.6.2 腺病毒转染INS1E细胞 | 第21页 |
2.6.3 油红染色 | 第21页 |
2.6.4 Biotin-Streptavidin-Agarose Surface细胞膜蛋白提取及检测 | 第21-22页 |
2.6.5 抑制剂,激活剂处理INS1E细胞 | 第22-23页 |
2.6.6 细胞的活力测定(MTS法) | 第23-24页 |
2.6.7 Western-blot检测 | 第24-27页 |
2.6.8 细胞免疫共沉淀 | 第27页 |
2.6.9 动物实验 | 第27-28页 |
2.6.10 组织冰冻制作及冰冻切片免疫荧光 | 第28-29页 |
2.6.11 TUNEL法检测INS1E细胞凋亡 | 第29页 |
2.6.12 论文中用到的统计学方法 | 第29-30页 |
第3章.实验结果 | 第30-48页 |
3.1 TCTP与棕榈酸钠(下文皆简称为PA)诱导INS1E细胞凋亡密切相关 | 第30-38页 |
3.1.1 INS1E细胞在PA处理不同时间点对脂肪酸的摄取 | 第30-32页 |
3.1.2 PA对INS1E细胞增殖的影响 | 第32页 |
3.1.3 PA对INS1E细胞中TCTP、Cleaved caspase3、Bax和MCL1蛋白表达的影响 | 第32-33页 |
3.1.4 PA促进INS1E细胞的凋亡 | 第33-34页 |
3.1.5 INS1E细胞中TCTP的表达水平可以影响PA引发的细胞凋亡 | 第34-36页 |
3.1.6 高脂喂养C57小鼠胰岛β细胞中TCTP和胰岛素分泌的变化 | 第36-38页 |
3.2 CD36参与PA引发的INS1E细胞凋亡 | 第38-40页 |
3.2.1 PA对INS1E细胞中CD36蛋白的表达水平影响 | 第38页 |
3.2.2 PA促进INS1E细胞中的CD36向细胞膜迁移 | 第38-39页 |
3.2.3 CD36介导PA引起的INS1E细胞凋亡 | 第39-40页 |
3.3 INS1E细胞中PA激活CD36-Fyn-LKB1-AMPK-TCTP信号通路进而引发细胞凋亡 | 第40-45页 |
3.3.1 PA可以激活INS1E细胞中的AMPK | 第40-41页 |
3.3.2 INS1E细胞中PA可通过活化AMPK下调TCTP的表达 | 第41-42页 |
3.3.3 抑制Fyn活性可以激活AMPK并下调TCTP表达 | 第42-43页 |
3.3.4 抑制Fyn活性可以促使INS1E细胞中的LKB1从细胞核向细胞质迁移 | 第43-45页 |
3.4 PA可能通过使INS1E细胞中的TCTP泛素化降解而导致细胞凋亡 | 第45-48页 |
3.4.1 PA可以促进INS1E细胞中TCTP的泛素化降解 | 第45-47页 |
3.4.2 Trim 21 可能是TCTP的泛素化酶 | 第47-48页 |
第4章.讨论和结论 | 第48-53页 |
参考文献 | 第53-56页 |
致谢 | 第56页 |