| 摘要 | 第4-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 缩略词表 | 第16-18页 |
| 第一章 恶性胸腔积液与MICRORNA研究背景 | 第18-33页 |
| 1 恶性胸腔积液研究背景 | 第18-22页 |
| 1.1 恶性胸腔积液介绍 | 第18页 |
| 1.2 恶性胸腔积液的发病机制 | 第18-19页 |
| 1.3 临床症状与诊断 | 第19-20页 |
| 1.4 进展与治疗 | 第20-22页 |
| 2 MICRORNA的研究进展 | 第22-25页 |
| 2.1 microRNA简介 | 第22页 |
| 2.2 microRNA的产生与成熟 | 第22-24页 |
| 2.3 microRNA与肿瘤 | 第24-25页 |
| 3 参考文献 | 第25-33页 |
| 第二章 肺癌胸腔积液中主要免疫细胞的分析 | 第33-50页 |
| 1 前言 | 第33-37页 |
| 1.1 肺癌胸腔积液 | 第33-34页 |
| 1.2 肺癌胸腔积液中免疫细胞的研究现状 | 第34-37页 |
| 1.2.1 调节性T细胞(Treg) | 第34-35页 |
| 1.2.2 Th17细胞 | 第35-36页 |
| 1.2.3 NK细胞 | 第36-37页 |
| 2 实验材料与方法 | 第37-40页 |
| 2.1 实验材料 | 第38-39页 |
| 2.1.1 实验对象 | 第38页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第38页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第38-39页 |
| 2.2 实验方法 | 第39-40页 |
| 2.2.1 样本的收集 | 第39页 |
| 2.2.2 胸腔积液中细胞的分离 | 第39页 |
| 2.2.3 外周血中淋巴细胞的分离 | 第39-40页 |
| 2.2.4 细胞流式抗体的标记 | 第40页 |
| 2.2.5 数据统计分析 | 第40页 |
| 3 结果 | 第40-45页 |
| 3.1 样本临床资料 | 第41页 |
| 3.2 肺癌胸腔积液中Treg细胞水平上调 | 第41-42页 |
| 3.3 肺癌胸腔积液中Th17细胞与外周无显著性差异 | 第42-43页 |
| 3.4 肺癌胸腔积液中CD56~(dim)CD16~+NK细胞显著低于正常水平 | 第43-45页 |
| 4 讨论 | 第45-46页 |
| 5 参考文献 | 第46-50页 |
| 第三章 肺癌胸腔积液中差异表达MICRORNA的筛选及预后标志物的研究 | 第50-73页 |
| 1 前言 | 第50-51页 |
| 2 实验材料与方法 | 第51-55页 |
| 2.1 实验材料 | 第51-52页 |
| 2.1.1 实验对象 | 第51-52页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第52页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第52页 |
| 2.2 实验方法 | 第52-55页 |
| 2.2.1 样本的收集 | 第52-53页 |
| 2.2.2 样本的处理 | 第53页 |
| 2.2.3 miRNA芯片检测 | 第53页 |
| 2.2.4 差异MicroRNA的筛选 | 第53页 |
| 2.2.5 差异MicroRNA生物信息学分析 | 第53-54页 |
| 2.2.6 RNA的提取 | 第54-55页 |
| 2.2.7 Q-PCR验证芯片中差异表达的miRNA | 第55页 |
| 2.2.8 数据分析统计 | 第55页 |
| 3 结果 | 第55-67页 |
| 3.1 肺癌胸腔积液中miRNA表达的检测及初步分析 | 第55-59页 |
| 3.2 功能性miRNAs的生物信息学分析 | 第59-62页 |
| 3.3 差异表达miRNAs与患者生存期相关性分析 | 第62-65页 |
| 3.4 5个差异表达miRNA的临床意义 | 第65-66页 |
| 3.5 肺癌胸腔积液中miRNA表达模型不依赖于其他因素 | 第66-67页 |
| 4 讨论 | 第67-70页 |
| 5 参考文献 | 第70-73页 |
| 第四章 肺癌胸腔积液中MIR-141-CXCL1调控TREG机制的研究 | 第73-109页 |
| 1 前言 | 第73-75页 |
| 2 材料与方法 | 第75-84页 |
| 2.1 实验材料 | 第75-77页 |
| 2.1.1 实验对象 | 第75-76页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第76-77页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第77页 |
| 2.2 实验方法 | 第77-84页 |
| 2.2.1 样本的收集 | 第77-78页 |
| 2.2.2 流式检测胸腔积液和外周血中Treg细胞的表达水平 | 第78页 |
| 2.2.3 microRNA的转染及检测 | 第78页 |
| 2.2.4 细胞周期的检测 | 第78-79页 |
| 2.2.5 CFSE检测细胞增殖 | 第79页 |
| 2.2.6 Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡 | 第79页 |
| 2.2.7 Q-PCR检测miRNA和mRNA的表达 | 第79-81页 |
| 2.2.8 Proteome Profiler Array和ELISA检测细胞因子的表达 | 第81-82页 |
| 2.2.9 Western blot检测蛋白表达水平 | 第82页 |
| 2.2.10 免疫荧光染色确定肿瘤细胞分泌CXCL1 | 第82-83页 |
| 2.2.11 质粒构建与报告基因检测 | 第83页 |
| 2.2.12 细胞趋化性实验评估肺癌胸腔积液对Treg的趋化能力 | 第83页 |
| 2.2.13 肺癌小鼠模型的构建与处理 | 第83-84页 |
| 2.2.14 数据分析统计 | 第84页 |
| 3 结果 | 第84-100页 |
| 3.1 样本临床资料 | 第84-85页 |
| 3.2 Treg细胞在非小细胞肺癌胸腔积液中高表达 | 第85-86页 |
| 3.3 Treg细胞水平与患者生存期成负相关性 | 第86-87页 |
| 3.4 CXCL1在肺癌胸腔积液中高表达 | 第87-88页 |
| 3.5 CXCL1与肺癌积液中总高水平的Treg成正相关性 | 第88-89页 |
| 3.6 miR-141调控肺癌细胞中CXCL1的表达 | 第89-90页 |
| 3.7 miR-141不影响肿瘤细胞的增殖、凋亡和周期 | 第90-91页 |
| 3.8 非小细胞肺癌胸腔积液中miR-141与CXCL1成负相关性 | 第91-92页 |
| 3.9 miR-141-CXCL1途径调控Treg细胞向恶性胸腔积液的募集 | 第92-95页 |
| 3.10 CXCR2参与miR-141-CXCL1对Treg细胞的调控 | 第95-97页 |
| 3.11 miR-141-CXCL1调控Treg在动物肿瘤模型中的验证 | 第97-100页 |
| 4 讨论 | 第100-103页 |
| 5 参考文献 | 第103-109页 |
| 结论 | 第109-111页 |
| 博士研究生期间发表及待发表论文列表 | 第111-112页 |
| 致谢 | 第112-113页 |
