果蝇Mre11蛋白精氨酸甲基化位点检测及相关突变果蝇构建
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-16页 |
| ·DNA损伤修复 | 第9-10页 |
| ·MRN复合物 | 第10-12页 |
| ·Mrell蛋白功能 | 第12-13页 |
| ·蛋白甲基化修饰 | 第13-14页 |
| ·Mrell蛋白的甲基化研究 | 第14-15页 |
| ·本文的研究目的 | 第15-16页 |
| 第二章 前言 | 第16-18页 |
| ·研究背景 | 第16页 |
| ·立项依据 | 第16页 |
| ·研究内容 | 第16-18页 |
| 第三章 材料与方法 | 第18-47页 |
| ·材料 | 第18-26页 |
| ·质粒载体 | 第18-20页 |
| ·试剂 | 第20-21页 |
| ·培养基及缓冲液 | 第21-22页 |
| ·果蝇株 | 第22-23页 |
| ·软件 | 第23页 |
| ·仪器 | 第23-24页 |
| ·引物 | 第24-26页 |
| ·实验方法 | 第26-47页 |
| ·融合蛋白表达、纯化及体外甲基化反应 | 第26-33页 |
| ·序列分析及位点特异性甲基化抗体制备 | 第33-36页 |
| ·原位点突变的Knock-in果蝇模型构建 | 第36-41页 |
| ·点突变及删切克隆构建 | 第41-47页 |
| 第四章 结果 | 第47-69页 |
| ·融合蛋白表达、纯化及体外甲基化反应 | 第47-59页 |
| ·融合蛋白表达载体构建 | 第47页 |
| ·蛋白表达条件摸索 | 第47-54页 |
| ·蛋白纯化 | 第54-58页 |
| ·体外甲基化反应 | 第58-59页 |
| ·序列分析及位点特异性甲基化抗体制备 | 第59-63页 |
| ·蛋白序列同源比对 | 第59-60页 |
| ·甲基化位点预测 | 第60页 |
| ·位点特异性甲基化抗体制备 | 第60-62页 |
| ·体内甲基化位点检测 | 第62-63页 |
| ·组织中靶蛋白的富集 | 第63页 |
| ·原位点突变的Knock-in果蝇模型构建 | 第63-66页 |
| ·Knock-out转基因载体构建 | 第63-65页 |
| ·Knock-out果蝇模型构建结果 | 第65-66页 |
| ·点突变及删切克隆构建 | 第66-69页 |
| ·点突变过渡载体的构建 | 第66页 |
| ·点突变转基因载体的构建 | 第66-68页 |
| ·GAR区删切克隆构建 | 第68-69页 |
| 第五章 结论 | 第69-70页 |
| 第六章 讨论 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-77页 |
| 附录 | 第77-79页 |
| 缩略词 | 第79-80页 |
| 在学期间研究成果 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
