致谢 | 第4-6页 |
中文摘要 | 第6-8页 |
英文摘要 | 第8-10页 |
英文缩略词表 | 第11-16页 |
1 引言 | 第16-20页 |
2. 材料和试剂 | 第20-27页 |
2.1 主要仪器 | 第20-21页 |
2.2 主要试剂耗材 | 第21-22页 |
2.3 小鼠 | 第22-23页 |
2.4 细胞 | 第23页 |
2.5 试剂配制 | 第23-27页 |
2.5.1 LPS储存液 | 第23页 |
2.5.2 HDM储存液 | 第23页 |
2.5.3 福尔马林 | 第23页 |
2.5.4 麻醉剂 | 第23页 |
2.5.5 PBS配置 | 第23-24页 |
2.5.6 核酸电泳缓冲液 | 第24页 |
2.5.7 DNA Loading Buffer | 第24页 |
2.5.8 EDTA | 第24-25页 |
2.5.9 Tris Buffer | 第25页 |
2.5.10 Tris Buffer | 第25页 |
2.5.11 蛋白Running Buffer | 第25页 |
2.5.12 蛋白Trans Buffer | 第25页 |
2.5.13 Protein Loading Buffer | 第25-26页 |
2.5.14 白细胞计数液配置 | 第26-27页 |
3. 实验方法 | 第27-37页 |
3.1 小鼠基因型鉴定 | 第27-28页 |
3.1.1 引物设计 | 第27页 |
3.1.2 PCR反应体系 | 第27页 |
3.1.3 PCR条件 | 第27-28页 |
3.2 小鼠哮喘模型的建立及肺泡灌洗液处理 | 第28-29页 |
3.2.1 HDM造模方法 | 第28-29页 |
3.2.2 OVA造模方法 | 第29页 |
3.3 肺组织切片和HE染色 | 第29-30页 |
3.4 PAS染色 | 第30页 |
3.5 免疫组化 | 第30-31页 |
3.6 细胞免疫荧光 | 第31-32页 |
3.7 细胞RNA提取及荧光定量PCR | 第32页 |
3.8 蛋白制样 | 第32-33页 |
3.9 免疫印迹 | 第33-35页 |
3.9.1 清洗玻璃板 | 第33页 |
3.9.2 灌胶与上样 | 第33-34页 |
3.9.3 电泳 | 第34页 |
3.9.4 转膜 | 第34页 |
3.9.5 免疫反应 | 第34-35页 |
3.10 DC纯化 | 第35页 |
3.11 DC抗原吞噬实验 | 第35-36页 |
3.12 DC成熟实验 | 第36页 |
3.13 体外DC迁移实验(Transwell实验) | 第36-37页 |
4. 实验结果 | 第37-50页 |
4.1 构建树突状细胞特异性敲除Shp2的小鼠品系 | 第37-40页 |
4.2 树突状细胞特异性敲除Shp2缓解HDM诱导的过敏性哮喘 | 第40-44页 |
4.3 树突状细胞特异性敲除Shp2缓解OVA诱导的过敏性哮喘 | 第44-46页 |
4.4 Shp2特异性缺失对树突状细胞的吞噬、成熟的影响 | 第46-48页 |
4.5 Shp2缺失调控树突状细胞的迁移能力 | 第48-50页 |
5. 讨论 | 第50-52页 |
6. 结论 | 第52-53页 |
附录 | 第53-55页 |
参考文献 | 第55-57页 |
靶向蛋白酪氨酸磷酸酶Shp2的抑制剂研究进展 | 第57-73页 |
参考文献 | 第68-73页 |
作者简历及在读期间取得的科研成果 | 第73页 |