| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 第一章 引言 | 第10-30页 |
| ·苏云金芽胞杆菌 | 第10-11页 |
| ·杀虫晶体蛋白的分类与鉴定 | 第11-18页 |
| ·Bt 杀虫晶体蛋白的分类 | 第11-12页 |
| ·Cry 基因的鉴定 | 第12-16页 |
| ·对鞘翅目害虫有杀虫活性的基因 | 第16-18页 |
| ·杀虫晶体蛋白的结构与作用机制 | 第18-25页 |
| ·Cry 毒素蛋白的结构 | 第18-23页 |
| ·Cry 毒素蛋白的作用机制 | 第23-24页 |
| ·Cry 毒素蛋白对鞘翅目的作用机制 | 第24-25页 |
| ·苏云金芽胞杆菌的应用 | 第25-29页 |
| ·Bt 工程菌 | 第26-27页 |
| ·转基因植物 | 第27-29页 |
| ·本研究立题依据及目的意义 | 第29-30页 |
| 第二章 材料与方法 | 第30-44页 |
| ·实验材料 | 第30-34页 |
| ·菌株与质粒 | 第30-31页 |
| ·试剂 | 第31-33页 |
| ·仪器设备 | 第33-34页 |
| ·供试昆虫 | 第34页 |
| ·研究方法 | 第34-44页 |
| ·晶体形态观察 | 第34页 |
| ·Bt 基因组的提取 | 第34页 |
| ·Bt 菌株的PCR-RFLP 鉴定 | 第34-37页 |
| ·基于基因组测序的基因克隆 | 第37-38页 |
| ·DNA 回收 | 第38页 |
| ·连接反应 | 第38页 |
| ·E. coli 感受态细胞制备 | 第38-39页 |
| ·热激转化 | 第39页 |
| ·E. coli 质粒DNA 提取 | 第39页 |
| ·Bt 电击感受态的制备与电击转化 | 第39-40页 |
| ·新cry 基因全长的扩增、克隆及序列测定 | 第40-41页 |
| ·Bt 新基因在大肠杆菌中表达研究 | 第41页 |
| ·新基因在苏云金芽胞杆菌无晶体突变株中表达的研究 | 第41-42页 |
| ·Cry 蛋白提取方法 | 第42页 |
| ·蛋白电泳检测 | 第42-43页 |
| ·暗黑鳃金龟、大黑鳃金龟及铜绿丽金龟的生物活性测定 | 第43-44页 |
| 第三章 结果与分析 | 第44-59页 |
| ·对蛴螬有活性的Bt 菌株筛选与基因鉴定 | 第44-51页 |
| ·活性菌株的筛选 | 第44-46页 |
| ·晶体形态特征观察 | 第46页 |
| ·杀虫晶体蛋白的SDS-PAGE 分析 | 第46-47页 |
| ·菌株中杀虫基因的鉴定 | 第47-49页 |
| ·全长引物的设计 | 第49-50页 |
| ·新基因的克隆及序列分析 | 第50-51页 |
| ·基于基因组信息的基因筛选 | 第51-53页 |
| ·基因组信息的获得 | 第51页 |
| ·基因组序列的信息学分析 | 第51-52页 |
| ·引物设计 | 第52页 |
| ·新基因的克隆及序列分析 | 第52-53页 |
| ·新基因的异源表达研究 | 第53-56页 |
| ·异源表达载体的构建 | 第53-54页 |
| ·异源表达 | 第54-56页 |
| ·Cry8Xxx 在苏云金芽胞杆菌无晶突变株中表达 | 第56-59页 |
| ·表达载体构建 | 第56-58页 |
| ·在无晶突变株中表达 | 第58-59页 |
| 第四章 讨论 | 第59-61页 |
| 全文主要结论与研究展望 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 致谢 | 第68-70页 |
| 附录一、各蛋白氨基酸组成分析表 | 第70-71页 |
| 附录二、硕士期间发表的论文 | 第71页 |