| 中文摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 前言 | 第8-11页 |
| 第一部分 南京地区无偿献血者中戊型肝炎病毒(HEV)流行情况的研究 | 第11-20页 |
| 1、材料与方法 | 第11-15页 |
| 1.1 血液样本的收集与标准 | 第11页 |
| 1.2 实验试剂盒 | 第11页 |
| 1.3 HEV抗体的检测 | 第11-12页 |
| 1.3.1 HEV IgG抗体检测 | 第11-12页 |
| 1.3.2 HEV IgM抗体检测 | 第12页 |
| 1.4 HEV RNA检测 | 第12-15页 |
| 1.4.1 血液样本中HEV Viral RNA的提取 | 第12-14页 |
| 1.4.2 一步法SYBR Green检测HEV RNA | 第14-15页 |
| 2、结果 | 第15-17页 |
| 2.1 HEV IgM、HEVIgG检测结果及年龄分布比例 | 第15-16页 |
| 2.2 HEV RNA检测结果 | 第16-17页 |
| 3、讨论 | 第17-20页 |
| 第二部分、HEV ORF3蛋白在毒株分型上的应用研究 | 第20-37页 |
| 1、材料与方法 | 第20-32页 |
| 1.1 克隆载体与质粒 | 第20-23页 |
| 1.1.1 哺乳动物表达载体及细胞 | 第20页 |
| 1.1.2 Ⅰ-Ⅳ型ORF3基因来源 | 第20-23页 |
| 1.2 试剂盒与抗体 | 第23页 |
| 1.3 Ⅰ-Ⅳ型ORF3真核表达载体的构建 | 第23-28页 |
| 1.3.1 引物设计 | 第23-24页 |
| 1.3.2 目的片段扩增 | 第24页 |
| 1.3.3 扩增片段的切胶回收 | 第24-25页 |
| 1.3.4 酶切载体与PCR产物 | 第25-26页 |
| 1.3.5 酶切片段回收 | 第26页 |
| 1.3.6 连接反应 | 第26-27页 |
| 1.3.7 转化 | 第27页 |
| 1.3.8 真核表达载体的鉴定 | 第27-28页 |
| 1.4 Ⅰ-Ⅳ型ORF3抗原的表达 | 第28-30页 |
| 1.4.1 无内毒素质粒的提取 | 第28-29页 |
| 1.4.2 质粒定量 | 第29页 |
| 1.4.3 质粒转染 | 第29-30页 |
| 1.5 Ⅰ-Ⅳ型ORF3抗原在HEV毒株分型上的应用 | 第30-31页 |
| 1.5.1 ORF3抗原的收集 | 第30页 |
| 1.5.2 ORF3抗体检测ELISA板的制备 | 第30页 |
| 1.5.3 HEV IgM阳性样本的分型检测 | 第30-31页 |
| 1.6 ORF3阳性血清中ORF3抗体的western blot鉴定 | 第31-32页 |
| 1.6.1 ORF3抗原的收集 | 第31页 |
| 1.6.2 SDS-PAGE胶的制备 | 第31页 |
| 1.6.3 ORF3抗原的电泳 | 第31-32页 |
| 1.6.4 ORF3抗体的western blot验证 | 第32页 |
| 2、结果 | 第32-35页 |
| 2.1 Ⅰ-Ⅳ型ORF3真核表达载体的鉴定 | 第32-33页 |
| 2.2 Ⅰ-Ⅳ型ORF3抗原的表达与鉴定 | 第33-35页 |
| 2.3 Ⅰ型、Ⅳ型、Ⅰ型合并Ⅳ型ORF3抗体的特异性鉴定 | 第35页 |
| 3、讨论 | 第35-37页 |
| 参考文献 | 第37-41页 |
| 文献综述 | 第41-51页 |
| 参考文献 | 第47-51页 |
| 附录1: 主要仪器 | 第51-52页 |
| 附录2: 溶液的配制 | 第52-55页 |
| 附录3: 缩略词一览表 | 第55-56页 |
| 硕士期间发表的文章 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
