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PHB基因对胶质瘤干细胞的调控研究

缩略词表第4-5页
摘要第5-7页
Abstract第7-8页
前言第9-12页
实验材料和方法第12-27页
    1. 材料与来源第12-15页
        1.1 菌株与质粒第12页
        1.2 主要试剂第12-15页
    2 实验方法第15-27页
        2.1 胶质瘤干细胞(GSC)的分离和鉴定第15页
        2.2 血清诱导胶质瘤干细胞(GSC)分化为非干性肿瘤细胞(NSTC)第15页
        2.3 质谱筛选差异表达蛋白第15页
        2.4 构建pLKO.1-PHB-shRNA质粒第15-19页
        2.5 构建Flag-PHB质粒第19-22页
        2.6 HEK293细胞培养和Flag-PHB质粒转染后检测其表达第22页
        2.7 免疫共沉淀第22-23页
        2.8 病毒包装、感染GSC及筛选Flag-PHB阳性的GSC第23页
        2.9 质谱鉴定第23页
        2.10 检测细胞活力和肿瘤细胞球形成能力第23-24页
        2.11 限制性梯度稀释实验(Limiting Dilution)第24-25页
        2.12 免疫荧光染色第25页
        2.13 免疫组织化学染色第25-27页
实验结果第27-41页
    1. GSC和NSTC中差异表达蛋白质的筛选第27-28页
    2. 根据数据库分析PHB与胶质瘤临床表型的相关性第28-30页
    3. PHB在GSC中特异性高表达第30页
    4. PHB在GSC分化过程中其表达水平逐渐降低第30-31页
    5. 在临床脑胶质瘤患者中PHB表达水平与脑胶质瘤恶性程度呈正相关第31页
    6. pLKO.1-PHB-shRNA和Flag-PHB质粒的构建第31-33页
        6.1 pLKO.1-PHB-shRNA质粒的构建第32页
        6.2 Flag-PHB质粒的构建第32-33页
    7. 敲低PHB基因表达抑制GSC肿瘤细胞球的形成能力和细胞活力第33-36页
    8. 敲低PHB基因表达对NSTC的细胞活力没有影响第36-37页
    9. 敲低PHB基因对GSC肿瘤发生的影响第37页
    10. PHB在GSC中亚细胞定位的研究第37-39页
    11. PHB相互作用蛋白的鉴定第39-41页
讨论第41-43页
结论第43-44页
参考文献第44-47页
个人简历第47-48页
致谢第48页

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