缩略词表 | 第4-5页 |
摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
前言 | 第9-12页 |
实验材料和方法 | 第12-27页 |
1. 材料与来源 | 第12-15页 |
1.1 菌株与质粒 | 第12页 |
1.2 主要试剂 | 第12-15页 |
2 实验方法 | 第15-27页 |
2.1 胶质瘤干细胞(GSC)的分离和鉴定 | 第15页 |
2.2 血清诱导胶质瘤干细胞(GSC)分化为非干性肿瘤细胞(NSTC) | 第15页 |
2.3 质谱筛选差异表达蛋白 | 第15页 |
2.4 构建pLKO.1-PHB-shRNA质粒 | 第15-19页 |
2.5 构建Flag-PHB质粒 | 第19-22页 |
2.6 HEK293细胞培养和Flag-PHB质粒转染后检测其表达 | 第22页 |
2.7 免疫共沉淀 | 第22-23页 |
2.8 病毒包装、感染GSC及筛选Flag-PHB阳性的GSC | 第23页 |
2.9 质谱鉴定 | 第23页 |
2.10 检测细胞活力和肿瘤细胞球形成能力 | 第23-24页 |
2.11 限制性梯度稀释实验(Limiting Dilution) | 第24-25页 |
2.12 免疫荧光染色 | 第25页 |
2.13 免疫组织化学染色 | 第25-27页 |
实验结果 | 第27-41页 |
1. GSC和NSTC中差异表达蛋白质的筛选 | 第27-28页 |
2. 根据数据库分析PHB与胶质瘤临床表型的相关性 | 第28-30页 |
3. PHB在GSC中特异性高表达 | 第30页 |
4. PHB在GSC分化过程中其表达水平逐渐降低 | 第30-31页 |
5. 在临床脑胶质瘤患者中PHB表达水平与脑胶质瘤恶性程度呈正相关 | 第31页 |
6. pLKO.1-PHB-shRNA和Flag-PHB质粒的构建 | 第31-33页 |
6.1 pLKO.1-PHB-shRNA质粒的构建 | 第32页 |
6.2 Flag-PHB质粒的构建 | 第32-33页 |
7. 敲低PHB基因表达抑制GSC肿瘤细胞球的形成能力和细胞活力 | 第33-36页 |
8. 敲低PHB基因表达对NSTC的细胞活力没有影响 | 第36-37页 |
9. 敲低PHB基因对GSC肿瘤发生的影响 | 第37页 |
10. PHB在GSC中亚细胞定位的研究 | 第37-39页 |
11. PHB相互作用蛋白的鉴定 | 第39-41页 |
讨论 | 第41-43页 |
结论 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-47页 |
个人简历 | 第47-48页 |
致谢 | 第48页 |