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1型鸭甲肝病毒在SPF鸡胚上的传代及其3C基因变异规律的研究

符号说明第4-8页
中文摘要第8-10页
Abstract第10-11页
1 引言第12-26页
    1.1 鸭病毒性肝炎概述第12-14页
        1.1.1 DHAV-1 病毒学分类第12页
        1.1.2 DHAV-1 病原特性第12-13页
        1.1.3 DHAV-1 流行病学第13页
        1.1.4 临床症状和病理变化第13-14页
    1.2 DHAV-1 分子生物学研究第14-15页
        1.2.1 DHAV-1 基因组主要结构第14页
        1.2.2 结构蛋白第14-15页
        1.2.3 非结构蛋白第15页
    1.3 DHAV-1 的培养特性第15-16页
        1.3.1 DHAV-1 在胚胎中的增殖第15-16页
        1.3.2 DHAV-1 在细胞中的培养第16页
    1.4 鸭甲肝病毒感染和致病的分子机制第16-17页
    1.5 DHAV-1 疫苗的研究现状第17-18页
        1.5.1 弱毒疫苗第18页
        1.5.2 灭活疫苗第18页
    1.6 诊断第18-23页
        1.6.1 病毒的分离和鉴定第18-19页
        1.6.2 血清学第19页
        1.6.3 鉴别诊断第19-20页
        1.6.4 分子生物学诊断第20页
        1.6.5 血清学捡测手段第20-23页
            1.6.5.1 血清中和试验(Virus-neutralization test,VN)第20-21页
            1.6.5.2 琼脂免疫扩散试验第21页
            1.6.5.3 间接血凝试验第21页
            1.6.5.4 酶联免疫吸附试验(ELISA)第21-23页
            1.6.5.5 其他血清学诊断方法第23页
    1.7 预防与控制第23-24页
    1.8 治疗第24页
    1.9 研究目的和意义第24-26页
2 材料与方法第26-34页
    2.1 材料第26-27页
        2.1.1 病料和菌株第26页
        2.1.2 实验动物第26页
        2.1.3 主要仪器第26页
        2.1.4 主要试剂第26页
        2.1.5 实验所用溶液配制第26-27页
        2.1.6 引物设计和合成第27页
    2.2 方法第27-34页
        2.2.1 DHAV-15 株毒在SPF鸡胚上的传代试验第27-28页
        2.2.2 各毒株各代次鸡胚传代毒 3C基因的测序第28-34页
            2.2.2.1 病毒RNA的提取第28页
            2.2.2.2 病毒的RT-PCR鉴定第28-29页
            2.2.2.3 PCR扩增第29-30页
            2.2.2.4 PCR产物的回收第30页
            2.2.2.5 连接第30-31页
            2.2.2.6 DH5a大肠杆菌感受态细胞的制备第31页
            2.2.2.7 转化第31-32页
            2.2.2.8 质粒DNA的提取第32页
            2.2.2.9 重组质粒的双酶切鉴定第32页
            2.2.2.10 阳性克隆序列测定第32-33页
            2.2.2.11 3C序列分析第33页
            2.2.2.12 动物回归试验第33-34页
3 结果与分析第34-47页
    3.1 传代后胚体死亡规律第34-35页
    3.2 DHAV-1 鸡胚传代毒的 3C序列测定第35页
    3.3 阳性质粒的双酶切鉴定结果第35-36页
    3.4 5 株DHAV-1 病毒传代后各代次 3C蛋白克隆测序后基因及氨基酸序列比对的结果及分析第36-47页
        3.4.1 1A传代后各代次 3C蛋白克隆测序后基因及氨基酸序列比对的结果及分析第36-37页
        3.4.2 2A传代后各代次 3C蛋白克隆测序后基因及氨基酸序列比对的结果及分析第37-39页
        3.4.3 3A传代后各代次 3C蛋白克隆测序后基因及氨基酸序列比对的结果及分析第39-41页
        3.4.4 4A传代后各代次 3C蛋白克隆测序后基因及氨基酸序列比对的结果及分析第41-43页
        3.4.5 5A传代后各代次 3C蛋白克隆测序后基因及氨基酸序列比对的结果及分析第43-45页
        3.4.6 动物回归试验结果第45-47页
4 讨论第47-50页
5 结论第50-51页
6 参考文献第51-59页
致谢第59-60页
攻读学位期间发表论文情况第60页

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