| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 文献综述 | 第13-22页 |
| 第一章 杆状病毒载体及IgG Fc研究进展 | 第13-22页 |
| 1.1 杆状病毒作为基因递送载体 | 第13-15页 |
| 1.1.1 杆状病毒体外转导条件的优化 | 第13-14页 |
| 1.1.2 增强转基因表达的策略 | 第14页 |
| 1.1.3 BacMam与宿主抗病毒免疫 | 第14-15页 |
| 1.2 杆状病毒表面展示系统 | 第15-17页 |
| 1.2.1 GP64作为杆状病毒展示系统的融合分子 | 第15页 |
| 1.2.2 肽段插入天然的GP64 | 第15-16页 |
| 1.2.3 可选择的其他展示策略 | 第16-17页 |
| 1.3 杆状病毒与其他基因递送系统的比较 | 第17-18页 |
| 1.4 杆状病毒与补体系统 | 第18-19页 |
| 1.4.1 补体系统 | 第18页 |
| 1.4.2 杆状病毒激活补体的途径 | 第18页 |
| 1.4.3 拮抗补体杆状病毒载体研究 | 第18-19页 |
| 1.5 IgG Fc研究进展 | 第19-20页 |
| 1.5.1 人IgG1 Fc及受体研究进展 | 第19-20页 |
| 1.5.2 猪IgG1 Fc及受体研究进展 | 第20页 |
| 1.5.3 基于IgG1 Fc融合策略的疫苗研究 | 第20页 |
| 1.5.4 表面展示IgG1 Fc的病毒载体疫苗研究 | 第20页 |
| 1.6 本研究的目的和意义 | 第20-22页 |
| 试验研究 | 第22-51页 |
| 第二章 表面展示猪不同亚型IgG Fc重组杆状病毒的构建 | 第22-38页 |
| 2.1 试验材料 | 第22-24页 |
| 2.1.1 质粒、菌株、细胞 | 第22页 |
| 2.1.2 主要试剂及仪器 | 第22-23页 |
| 2.1.3 主要溶液 | 第23页 |
| 2.1.4 引物设计与合成 | 第23-24页 |
| 2.2 方法 | 第24-30页 |
| 2.2.1 pFBDM-P10-gp64SP-vsvgED-Fc转移载体的构建 | 第24-26页 |
| 2.2.2 重组杆状病毒穿梭载体的构建 | 第26-27页 |
| 2.2.3 重组杆状病毒的包装和滴定 | 第27-28页 |
| 2.2.4 重组杆状病毒的鉴定 | 第28-30页 |
| 2.3 结果与分析 | 第30-36页 |
| 2.3.1 pFBDM-P10-gp64SP-vsvgED-Fc转移载体的构建 | 第30-32页 |
| 2.3.2 重组穿梭载体Bacmid的构建和鉴定 | 第32页 |
| 2.3.3 重组杆状病毒的扩增和滴度测定 | 第32-34页 |
| 2.3.4 重组杆状病毒的PCR鉴定 | 第34-35页 |
| 2.3.5 重组杆状病毒的Western blot鉴定 | 第35-36页 |
| 2.3.6 重组杆状病毒的间接免疫荧光分析（IFA） | 第36页 |
| 2.4 讨论 | 第36-37页 |
| 2.5 小结 | 第37-38页 |
| 第三章 展示Fc重组杆状病毒的转基因潜力评价 | 第38-45页 |
| 3.1 试验材料 | 第38页 |
| 3.1.1 菌株、质粒、细胞 | 第38页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第38页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第38页 |
| 3.1.4 主要溶液和培养基的配置 | 第38页 |
| 3.2 方法 | 第38-40页 |
| 3.2.1 展示不同亚型IgG Fc重组杆状病毒体外补体逃逸活性检测 | 第38-39页 |
| 3.2.2 展示不同亚型IgG Fc重组杆状病毒在IEC细胞上转基因表达能力的比较 | 第39-40页 |
| 3.3 结果 | 第40-43页 |
| 3.3.1 展示不同亚型IgG Fc重组杆状病毒补体拮抗能力比较 | 第40-41页 |
| 3.3.2 展示不同亚型IgG Fc重组杆状病毒在IEC细胞上的转基因表达能力比较 | 第41-43页 |
| 3.4 讨论 | 第43-44页 |
| 3.5 小结 | 第44-45页 |
| 第四章 展示Fc重组杆状病毒与Fc受体结合能力分析 | 第45-51页 |
| 4.1 试验材料 | 第45页 |
| 4.1.1 质粒、菌株 | 第45页 |
| 4.1.2 主要试剂及仪器 | 第45页 |
| 4.1.3 主要溶液配制 | 第45页 |
| 4.2 方法 | 第45-47页 |
| 4.2.1 FcγRI蛋白的原核表达 | 第45-47页 |
| 4.2.2 间接ELISA检测FcγRI与展示Fc重组杆状病毒结合能力 | 第47页 |
| 4.3 结果 | 第47-49页 |
| 4.3.1 重组FcγRI表达载体的构建 | 第47页 |
| 4.3.2 重组FcγRI的表达和纯化 | 第47-48页 |
| 4.3.3 间接ELISA检测FcγRI与展示Fc重组杆状病毒结合能力 | 第48-49页 |
| 4.4 讨论 | 第49-50页 |
| 4.5 小结 | 第50-51页 |
| 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-60页 |
| 附录 | 第60-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 作者简介 | 第64页 |
