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以腹切米突变体为材料解析粳米腹白形成的生理与分子机制

摘要第11-14页
ABSTRACT第14-16页
第一章 文献综述第17-41页
    1. 粳稻垩白研究的重要性第17页
    2. 垩白形成机制的复杂性第17-23页
        2.1 形成机制因垩白类型而变第17-18页
        2.2 涉及复杂的碳、氮多种代谢之间的互作第18-19页
        2.3 环境效应的不确定性第19页
        2.4 垩白是由多基因控制的复杂性状第19-23页
            2.4.1 垩白性状的QTL定位第19-20页
            2.4.2 垩白相关基因的克隆和功能分析第20-23页
    3. 突变体在水稻生物学研究中的应用第23-25页
        3.1 水稻突变体创制方法第23-24页
        3.2 水稻突变体库第24-25页
        3.3 突变体在基因克隆和功能分析中的应用第25页
    4. 系统生物学理论与技术第25-29页
        4.1 转录组学第26-27页
        4.2 蛋白质组学第27-28页
        4.3 代谢组学第28-29页
    5. 系统生物学在垩白研究中的应用第29-30页
    6. 本研究的目的和意义第30页
    7. 本研究的技术路线第30-32页
    参考文献第32-41页
第二章 成熟籽粒垩白与透明胚乳在生化组成上的差异第41-61页
    1 材料及方法第42-47页
        1.1 供试材料第42-44页
        1.2 胚效应和垩白效应的量化分析方法第44-45页
        1.3 测定项目及方法第45-47页
            1.3.1 扫描电镜观察第45-46页
            1.3.2 支链淀粉精细结构分析第46页
            1.3.3 淀粉、蛋白组分和植酸含量测定第46页
            1.3.4 氨基酸组分含量测定第46页
            1.3.5 矿质元素含量测定第46-47页
        1.4 数据分析第47页
    2 结果与分析第47-52页
        2.1 垩白米形态学特征第47-48页
        2.2 淀粉和蛋白质组分第48-51页
        2.3 氨基酸组分第51页
        2.4 胚乳的矿质元素分析第51-52页
    3 讨论第52-54页
        3.1 腹切米突变体DY1102在垩白理化基础研究中的应用第52-53页
        3.2 胚在垩白形成中的作用第53-54页
        3.3 垩白形成的生理生化基础第54页
    4 结论第54-56页
    参考文献第56-61页
第三章 成熟籽粒腹白胚乳蛋白质的iTRAQ全谱分析第61-81页
    1 材料及方法第62-65页
        1.1 供试材料第62-63页
        1.2 测定项目及方法第63-65页
            1.2.1 蛋白质提取第63页
            1.2.2 蛋白酶解与iTRAQ标记第63-64页
            1.2.3 混合肽段SCX分离第64页
            1.2.4 LC-MS分析第64页
            1.2.5 蛋白质的鉴定与定量第64-65页
    2 结果与分析第65-71页
        2.1 蛋白质鉴定结果及分类第65-66页
        2.2 垩白相关差异表达蛋白的功能分类第66-67页
        2.3 碳代谢相关差异蛋白第67-69页
        2.4 蛋白代谢相关差异蛋白第69-70页
        2.5 ROS清除系统相关差异蛋白第70页
        2.6 垩白性状相关其他可能代谢途径第70-71页
    3 讨论第71-74页
        3.1 腹切米突变体DY1102在垩白胚乳蛋白质全谱分析中的应用第71-72页
        3.2 碳代谢与垩白形成的关系第72-73页
            3.2.1 淀粉合成第72页
            3.2.2 细胞壁合成第72页
            3.2.3 淀粉降解第72-73页
        3.3 蛋白质累积与垩白形成的关系第73页
            3.3.1 蛋白质折叠第73页
            3.3.2 蛋白质降解第73页
        3.4 碳、氮代谢及其互作在垩白研究中的重要性第73-74页
    4 结论第74-75页
    参考文献第75-81页
第四章 籽粒发育过程中腹白和透明胚乳在代谢组上的差异第81-111页
    1 材料及方法第82-84页
        1.1 供试材料第82-83页
        1.2 测定项目及方法第83-84页
            1.2.1 代谢物组分提取第83页
            1.2.2 UPLC-MS分析第83页
            1.2.3 GC-MS分析第83-84页
            1.2.4 数据处理分析第84页
    2 结果与分析第84-101页
        2.1 腹切米突变体颖果发育特征第84-86页
        2.2 发育籽粒胚乳的代谢组全谱分析第86-88页
        2.3 发育籽粒代谢组动态变化特征第88-90页
        2.4 垩白胚乳中代谢通路特征第90-101页
            2.4.1 氨基酸及其衍生物代谢第90-93页
            2.4.2 碳水化合物代谢及其衍生物第93-96页
            2.4.3 脂类第96-97页
            2.4.4 CPGECs(辅助因子、辅基及电子载体)第97页
            2.4.5 嘌呤及嘧啶代谢第97-98页
            2.4.6 多肽第98页
            2.4.7 植物激素第98页
            2.4.8 次生代谢物第98-101页
    3 讨论第101-105页
        3.1 垩白形成是否是籽粒发育加快的结果?第101-102页
        3.2 细胞内碳、氮代谢状态的感知和调控第102-103页
        3.3 垩白形成的其他相关代谢途径第103-104页
            3.3.1 含硫氨基酸第103页
            3.3.2 ROS清除第103页
            3.3.3 渗透调节作用第103-104页
            3.3.4 细胞壁合成第104页
            3.3.5 矿质养分稳态第104页
        3.4 胚在垩白形成中的作用第104-105页
    4 结论第105-106页
    参考文献第106-111页
第五章 籽粒发育过程中腹白相关基因表达的转录组和蛋白质组联合分析第111-151页
    1 材料及方法第113-115页
        1.1 供试材料第113页
        1.2 测定项目及方法第113-115页
            1.2.1 RNA-Seq分析第113-114页
            1.2.2 iTRAQ分析第114页
            1.2.3 差异表达基因RT-PCR验证第114页
            1.2.4 差异表达蛋白MRM验证第114-115页
    2 结果与分析第115-140页
        2.1 数据质量评估第115-119页
        2.2 转录组和蛋白质组数据间的相关性分析第119页
        2.3 籽粒发育相关基因表达的转录组和蛋白质组分析第119-120页
        2.4 籽粒垩白相关基因表达的转录组和蛋白质组分析第120-122页
        2.5 垩白相关碳代谢基因第122-125页
            2.5.1 中心代谢及氧化磷酸化产能降低第122-123页
            2.5.2 储藏物和结构物分解增强第123页
            2.5.3 脂质代谢偏向于短链脂肪酸合成第123-125页
        2.6 垩白相关的氨基酸代谢基因第125-127页
            2.6.1 Thr合成能力增强第125页
            2.6.2 SAM循环趋于活跃第125页
            2.6.3 芳香族氨基酸合成增强,但未偏向木质素合成第125-127页
        2.7 垩白相关的蛋白质代谢基因第127-131页
            2.7.1 转录调控因子表达增强第127页
            2.7.2 mRNA监督质控及降解途径受扰第127页
            2.7.3 核糖体蛋白表达丰度下调第127-128页
            2.7.4 蛋白质的非泛素介导降解增强第128-129页
            2.7.5 醇溶蛋白表达丰度下调第129-131页
        2.8 垩白相关的光合作用基因第131-132页
        2.9 垩白相关的胁迫响应基因表达分析第132-136页
            2.9.1 AsA、GSH分解加强第132-134页
            2.9.2 LEAs后期表达上升第134-136页
        2.10 垩白相关的跨膜转运基因第136-138页
        2.11 垩白相关的激素代谢基因第138-140页
    3 讨论第140-143页
        3.1 碳、氮代谢由储藏物和结构物合成转向次生代谢第140-141页
        3.2 垩白组织中的醇溶蛋白积累减弱第141-142页
        3.3 果皮光合作用与垩白形成第142页
        3.4 激素、转运子与胚-胚乳关系第142-143页
    4 结论第143-144页
    参考文献第144-151页
第六章 全文讨论与总结第151-159页
    1 全文讨论第151-154页
        1.1 腹切米突变体及其在垩白形成机制研究中的应用第151-152页
        1.2 系统生物学的整合思维在分析垩白等复杂性状中的应用第152-154页
        1.3 垩白等稻米品质性状的复杂性与精确栽培第154页
    2 主要结论第154-156页
        2.1 垩白形成可能是胁迫引发的碳、氮代谢转向第155页
        2.2 氮代谢在垩白形成中具有重要作用第155页
        2.3 矿质营养代谢与垩白形成也具有重要关联第155页
        2.4 胚和果皮参与调控垩白形成第155-156页
    3 创新点第156页
    4 不足之处第156-157页
    参考文献第157-159页
附录第159-201页
    附表1 成熟胚乳上调表达蛋白功能分类第159-164页
    附表2 成熟胚乳下调表达蛋白的功能分类第164-167页
    附表3 发育颖果代谢物的功能分类第167-176页
    附表4 qRT-PCR引物序列第176-178页
    附表5 发育颖果差异表达基因的功能分类第178-185页
    附表6 发育颖果差异表达蛋白的功能分类第185-201页
攻读博士学位期间已完成的论文第201-203页
致谢第203页

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