摘要 | 第8-12页 |
ABSTRACT | 第12-15页 |
符号说明 | 第16-17页 |
前言及背景 | 第17-32页 |
1. 上皮间质转化(EMT)与肿瘤之间的关系 | 第18-24页 |
1.1 EMT的定义及特征 | 第18页 |
1.2 EMT的调控机制 | 第18-22页 |
1.3 微环境改变对EMT的影响 | 第22-23页 |
1.4 从EMT入手针对肿瘤的治疗进展 | 第23-24页 |
2. 丙戊酸钠(VPA)与前列腺癌的关系 | 第24-25页 |
3. MicroRNA(miRNA)在肿瘤调控、诊断治疗中的作用 | 第25-32页 |
3.1 miRNA的定义及生物学特征 | 第25页 |
3.2 miRNA的作用机制 | 第25-26页 |
3.3 miRNA与肿瘤的密切关系 | 第26-27页 |
3.4 miRNA在EMT过程中的作用 | 第27-28页 |
3.5 miRNA在前列腺癌中的作用 | 第28-29页 |
3.6 肿瘤相关部分miRNA | 第29-32页 |
材料和方法 | 第32-47页 |
1. 实验中常规材料设备的准备 | 第32-34页 |
1.1 细胞的采集及培养的材料 | 第32页 |
1.2 试剂和耗材的准备 | 第32-33页 |
1.3 主要仪器的准备 | 第33-34页 |
2. 各种试剂的配置及实验具体方法 | 第34-44页 |
2.1 溶液配置 | 第34-35页 |
2.2 细胞培养 | 第35-36页 |
2.3 Western blotting检测各组细胞实验中SMAD4蛋白的表达 | 第36-39页 |
2.4 运用实时荧光定量RT-PCR检测mRNA及miRNA | 第39-43页 |
2.5 细胞质粒的转染 | 第43-44页 |
3. 具体实验方法的设计 | 第44-46页 |
3.1 运用生物信息学方法寻找相关的miRNA | 第44-45页 |
3.2 测定VPA处理后的SMAD4的蛋白和mRNA水平的变化 | 第45页 |
3.3 实验验证VPA对通过生物信息学方法寻找相关的miRNA在的影响 | 第45页 |
3.4 通过转染技术找出可影响SMAD4表达的miRNA | 第45-46页 |
3.5 通过转染miRNA抑制剂观察能否消除VPA对SMAD4表达的影响 | 第46页 |
4. 统计学分析 | 第46-47页 |
结论 | 第47-56页 |
1 找到相应的miRNA | 第47-48页 |
2 VPA抑制SMAD4的表达 | 第48-50页 |
3 VPA上调miR-20a,34a,and 449a的表达 | 第50-52页 |
4 MiR-34a抑制SMAD4的表达 | 第52-54页 |
5 调低miR-34a的表达可消除VPA对SMAD4的抑制效果 | 第54-56页 |
讨论 | 第56-59页 |
小结 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-72页 |
致谢 | 第72-73页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第73-74页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第74-75页 |
英文论文Ⅰ | 第75-89页 |
英文论文Ⅱ | 第89-95页 |