| 中文摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1.引言 | 第10-20页 |
| ·多不饱和脂肪酸简述 | 第10-14页 |
| ·脂肪酸的分类与命名 | 第10-11页 |
| ·多不饱和脂肪酸的来源 | 第11页 |
| ·动物来源 | 第11页 |
| ·植物来源 | 第11页 |
| ·海洋生物来源 | 第11页 |
| ·多不饱和脂肪酸的功能 | 第11-13页 |
| ·多不饱和脂肪酸与植物的抗逆性 | 第12页 |
| ·多不饱和脂肪酸的营养功能 | 第12-13页 |
| ·多不饱和脂肪酸合成途径 | 第13-14页 |
| ·多不饱和脂肪酸合成相关酶 | 第14-17页 |
| ·Δ5 脂肪酸去饱和酶 | 第15页 |
| ·Δ8 脂肪酸去饱和酶 | 第15页 |
| ·Δ9 脂肪酸链延长酶 | 第15-16页 |
| ·ω3 脂肪酸去饱和酶 | 第16页 |
| ·Δ6 脂肪酸去饱和酶 | 第16页 |
| ·Δ12脂肪酸去饱和酶 | 第16-17页 |
| ·多不饱和脂肪酸在高等植物中的异源合成 | 第17-19页 |
| ·多基因聚合方法 | 第17-18页 |
| ·杂交法 | 第17页 |
| ·分次转化法 | 第17-18页 |
| ·共转化法 | 第18页 |
| ·独立基因表达盒法 | 第18页 |
| ·多不饱和脂肪酸在高等植物中的合成 | 第18-19页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 2. 材料与方法 | 第20-31页 |
| ·试验材料 | 第20-22页 |
| ·植物材料 | 第20页 |
| ·菌株及质粒 | 第20-21页 |
| ·酶、生化试剂及培养基 | 第21页 |
| ·用到的引物 | 第21页 |
| ·主要仪器和分析软件 | 第21-22页 |
| ·试验方法 | 第22-31页 |
| ·基因组DNA提取方法（CTAB法） | 第22-23页 |
| ·质粒DNA提取方法（碱法） | 第23-24页 |
| ·质粒DNA的酶切体系 | 第24页 |
| ·DNA片段的回收（试剂盒） | 第24-26页 |
| ·目的基因和载体的连接反应（以pMD18-T simple vector为例） | 第26页 |
| ·多基因盒表达载体构建 | 第26页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备以及转化 | 第26-27页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第26-27页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第27页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备以及转化 | 第27-28页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第27-28页 |
| ·农杆菌感受态细胞的转化 | 第28页 |
| ·目的基因鉴定的PCR程序及反应体系（以Δ8Des基因为例） | 第28页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第28-29页 |
| ·阳性菌落的鉴定并保存 | 第29页 |
| ·棉花转化方法 | 第29-30页 |
| ·农杆菌介导的喷花法（郭三堆等，2010） | 第30页 |
| ·子房注射法（李静等，2005年） | 第30页 |
| ·棉花阳性植株的筛选与鉴定 | 第30-31页 |
| ·棉花转基因植株除草剂抗性筛选 | 第30页 |
| ·棉花转基因阳性株PCR鉴定 | 第30页 |
| ·棉花转基因植株种子脂肪酸鉴定 | 第30-31页 |
| 3. 结果与分析 | 第31-55页 |
| ·DGLA合成相关酶基因的亚克隆 | 第31-42页 |
| ·棉花种子特异性α球蛋白启动子的获得 | 第31-34页 |
| ·棉花种子特异性α球蛋白启动子替换辅助载体中的 35S启动子 | 第34-37页 |
| ·小眼虫藻△8 去饱和酶基因的亚克隆 | 第37-40页 |
| ·球等鞭金藻△9 链延长酶基因的亚克隆 | 第40-42页 |
| ·辅助载体PAUX(α)-△9Elo -△8Des的构建 | 第42-46页 |
| ·多基因辅助载体PAUX(α)-△9Elo-△8Des构建原理 | 第42-43页 |
| ·△9Elo和△8Des基因表达盒的串联 | 第43-46页 |
| ·植物表达载体pCamBAR-(α-△9Elo)-(α-△8Des)的构建 | 第46-49页 |
| ·植物表达载体pCamBAR-(α-△9Elo)-(α-△8Des)棉花转化与检测 | 第49-55页 |
| ·棉花的遗传转化 | 第49页 |
| ·转基因棉花的除草剂鉴定 | 第49-50页 |
| ·转基因棉花的多不饱和脂肪酸相关基因PCR鉴定 | 第50-52页 |
| ·转基因棉花种子不饱和脂肪酸鉴定 | 第52-55页 |
| 4.讨论 | 第55-59页 |
| ·转基因植株抗除草剂和PCR检测结果差异的可能原因 | 第55-56页 |
| ·转基因植株多不饱和脂肪酸检测结果及转化效率 | 第56-57页 |
| ·不同棉花遗传转化方法的比较 | 第57-58页 |
| ·影响棉花遗传转化的因素 | 第58-59页 |
| 5. 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
