| 符号说明 | 第1-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1 前言 | 第13-24页 |
| ·植物应对各种生物及非生物胁迫的机制 | 第13-15页 |
| ·植物与低温胁迫 | 第13-14页 |
| ·植物与干旱胁迫 | 第14页 |
| ·植物与高盐胁迫 | 第14-15页 |
| ·植物与病原菌 | 第15页 |
| ·MAPK级联途径的基本组成 | 第15-16页 |
| ·MAPK的分类及结构特点 | 第16-18页 |
| ·植物MAPK信号途径的作用 | 第18-22页 |
| ·植物MAPKKKs与非生物胁迫 | 第19-20页 |
| ·植物MAPKKKs与生物胁迫 | 第20-21页 |
| ·植物MAPKKKs与生长发育 | 第21-22页 |
| ·植物MAPKKKs与激素信号分子 | 第22页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第22-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-48页 |
| ·实验材料 | 第24-26页 |
| ·植物材料 | 第24页 |
| ·酶与各种生化试剂 | 第24页 |
| ·菌株与质粒 | 第24页 |
| ·PCR引物 | 第24-26页 |
| ·DNA测序 | 第26页 |
| ·实验方法 | 第26-48页 |
| ·棉花幼苗的培养与处理 | 第26-27页 |
| ·植物总RNA的提取 | 第27-28页 |
| ·利用CTAB法提取棉花总RNA | 第27-28页 |
| ·利用Trizol试剂提取烟草总RNA | 第28页 |
| ·cDNA第一条链的合成 | 第28-29页 |
| ·目的片段的回收 | 第29页 |
| ·目的片段与克隆载体连接 | 第29-30页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第30-31页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第30页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第30-31页 |
| ·试剂盒微量提取大肠杆菌质粒DNA | 第31页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第31-32页 |
| ·cDNA的纯化和末端加尾反应（用于 5'RACE） | 第32页 |
| ·cDNA的纯化 | 第32页 |
| ·cDNA 5'末端加尾反应 | 第32页 |
| ·GhMAPKKK42全长cDNA序列的获得 | 第32-36页 |
| ·中间片段的获得 | 第32-33页 |
| ·5'RACE获取 5'末端序列 | 第33-34页 |
| ·3'RACE获取 3'末端序列 | 第34-35页 |
| ·cDNA全长序列的获取 | 第35-36页 |
| ·植物基因组DNA的提取 | 第36-37页 |
| ·小量法提取基因组DNA | 第36页 |
| ·CTAB法提取基因组DNA | 第36-37页 |
| ·GhMAPKKK42全长基因组序列的获取 | 第37-38页 |
| ·植物表达载体的构建与转化 | 第38-40页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第38-39页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第39页 |
| ·农杆菌感受态细胞的转化 | 第39-40页 |
| ·农杆菌介导转化烟草 | 第40页 |
| ·转基因烟草鉴定 | 第40-41页 |
| ·转基因烟草生理活性分析 | 第41-42页 |
| ·酶活性含量测定 | 第42页 |
| ·转基因本生烟抗病性分析 | 第42-43页 |
| ·病原菌培养基的配制 | 第42页 |
| ·病原菌的活化 | 第42页 |
| ·病原细菌离体接种 | 第42-43页 |
| ·荧光定量PCR（qPCR）分析 | 第43页 |
| ·组织化学染色分析 | 第43-44页 |
| ·数据库及网络资源 | 第44页 |
| ·生物学软件 | 第44页 |
| ·酵母双杂交 | 第44-45页 |
| ·表达载体的构建 | 第44页 |
| ·酵母感受态的制备 | 第44-45页 |
| ·诱饵载体转化酵母感受态细胞 | 第45页 |
| ·共转化酵母感受态细胞 | 第45页 |
| ·基因瞬时表达 | 第45-48页 |
| ·制备洋葱表皮瞬时表达载体 | 第45-46页 |
| ·基因枪微弹的制备 | 第46页 |
| ·基因枪转化 | 第46-48页 |
| 3 结果与分析 | 第48-67页 |
| ·棉花GhMAPKKK42基因的分离 | 第48-50页 |
| ·棉花总RNA的提取及转录 | 第48页 |
| ·GhMAPKKK42中间片段的分离 | 第48页 |
| ·GhMAPKKK425'片段的分离 | 第48-49页 |
| ·GhMAPKKK423'片段的分离 | 第49页 |
| ·GhMAPKKK42 cDNA全长的分离 | 第49页 |
| ·GhMAPKKK42 DNA全长的分离 | 第49-50页 |
| ·GhMAPKKK42启动子序列的分离 | 第50页 |
| ·序列分析 | 第50-54页 |
| ·GhMAPKKK42 cDNA全长序列分析 | 第50-52页 |
| ·GhMAPKKK42氨基酸序列分析 | 第52-53页 |
| ·GhMAPKKK42启动子序列的分析 | 第53-54页 |
| ·GhMAPKKK42的亚细胞定位分析 | 第54-55页 |
| ·GhMAPKKK42的表达模式分析 | 第55-58页 |
| ·GhMAPKKK42生物功能特性分析 | 第58-67页 |
| ·GhMAPKKK42超表达转基因本生烟的获取及鉴定 | 第58-59页 |
| ·GhMAPKKK42与非生物胁迫 | 第59-63页 |
| ·GhMAPKKK42与干旱胁迫 | 第59-61页 |
| ·GhMAPKKK42与高盐胁迫 | 第61-62页 |
| ·GhMAPKKK42与低温胁迫 | 第62-63页 |
| ·GhMAPKKK42与生物胁迫 | 第63-65页 |
| ·GhMAPKKK42与MAPKK和MAPK的互作关系 | 第65-67页 |
| 4 讨论 | 第67-71页 |
| 5 结论 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第79页 |
